【摘要】  目的 观察益气活血中药对老年冠心病患者血小板活化率的影响。方法 75例老年冠心病患者随机分为对照组(35例)及治疗组(40例),对照组予西药常规治疗,治疗组加服益气活血中药,观察2组治疗前后血小板膜p选择素(cd62p)和血小板活化糖蛋白gpⅱb/ⅲa(pac-1)表达率的变化。结果 益气活血中药治疗2月后,血小板表面活性标志蛋白cd62p、pac-1表达率下降,与自身治疗前及对照组治疗后比较均有显著差异(p<0.05)。结论 益气活血中药对老年冠心病患者有较好的抗血小板活化作用。

【关键词】  益气活血中药；老年冠心病；血小板活化

 冠心病为老年常见病,动脉粥样硬化和血栓形成是其病理基础,而血小板活化和凝血系统的共同作用是血栓形成的基础。研究显示,冠心病患者血小板普遍处于高活化状态,是血栓形成的高危患者[1],而p选择素(cd62p)是血小板活化的标志。随着冠心病病情的加重,cd62p活性明显上升[2],而血小板活化糖蛋白gpⅱb/ⅲa(pac-1)是检测早期血小板活化的有效手段。益气活血中药方为笔者经验方,对老年冠心病具有较好的临床疗效。为探讨其疗效机制,本研究以cd62p、pac-1为检测指标,观察其对老年冠心病患者血小板活化阳性率的影响。

1  资料与方法　

　1.1  研究对象

    根据1999年who标准,参照《中药新药临床研究指导原则》[3]冠心病心绞痛的诊断标准。WWw.11665.cOm选择本院门诊及住院老年冠心病患者75例,其中男48例,女27例；年龄60～75岁,平均65.8岁；病程3.5～20年,平均8.1年。按病程、病情随机分为治疗组(40例)和对照组(35例),2组在性别、年龄、病程及病情等方面差异无显著性意义(p>0.05)。

　　1.2  研究方法

　　1.2.1  治疗方法

　　对照组口服鲁南欣康40～60 mg/d,小剂量阿司匹林75 mg/d。治疗组在上述治疗基础上加用益气活血中药(主要由黄芪、水蛭、丹参、莪术、鬼箭羽等组成,本院中药房提供原药材并加工,150 ml/袋),每次1袋,每日2次,30 d为1个疗程,观察时间为2个疗程。治疗期间不再应用其他具有抗凝血或活血化瘀作用的药物。

　　1.2.2  指标检测 

　　分别于治疗前1 d及治疗结束后第2日检测血小板活化阳性率。应用荧光标记的抗血小板糖蛋白抗体标记血小板。抗体由美国becton dickion公司提供：异硫氰标记的抗血小板gpⅱb/ⅲa上纤维蛋白原结合位点抗体(pac-1 fitc)、藻红素标记的抗血小板gmp140抗体(cd62p pe)、多甲藻素-叶绿素标记的抗血小板gpⅱb/ⅲa抗体(cd41a percp)、藻红素标记的鼠igg(migg pe)。然后用流式细胞仪(型号facsort calibur,美国becton dickion公司)检测pac-1阳性血小板、cd62p阳性血小板的百分率。

　　1.2.3  统计学方法 

　　平均值以x±s表示,应用spss11.5统计软件进行t检验。

　　2  结果

　　2.1  血小板表面活性标志蛋白p选择素的变化
   
　　2组患者治疗后血小板表面活性标志蛋白cd62p均较治疗前有所下降,前后比较均有显著差异；但治疗组cd62p下降幅度比对照组明显,且2组患者治疗前cd62p比较无显著差异(p＝0.081 7),而在治疗后则有显著差异(p＝0.000 0),表明治疗组应用中药联合西药在降低cd62p方面较对照组单纯应用西药具有更加显著的效果。见表1。表1  2组患者治疗前后cd62p比较(略)

　　2.2  血小板活化糖蛋白gpⅱb/ⅲa的变化
   
　　2组患者治疗后pac-1均较治疗前有所下降,前后比较均有显著差异；2组患者治疗前pac-1比较无显著差异(p＝0.210 8),而在治疗后则有显著差异(p＝0.000 0),提示治疗组应用中药联合西药对降低pac-1方面较对照组单纯应用西药具有明显优势。见表2。表2  2组患者治疗前后pac-1比较(略)

　　3  讨论
   
　　近年来研究提示,血小板被激活后,可与中性粒细胞粘附、聚集,在凝血系统的共同作用下形成血栓。在血栓发生过程中,由于血管内皮损伤,血管内皮下胶原暴露,使流经此处的血小板被激活。在血小板活化早期,血小板空间构型发生改变,血小板膜糖蛋白gpⅱb/ⅲa复合物构型改变,其纤维蛋白原受体暴露,促进纤维蛋白原与gpⅱb/ⅲa的相互识别和结合[4]。pac-1为gpⅱb/ⅲa复合物纤维蛋白原受体,在血小板活化后,gpⅱb/ⅲa受体的活性表达是引起血小板聚集的最后通路,检测血小板表面pac-1的表达量可以更精确地在更早阶段检测到血小板的活化。cd62p是一种相当分子质量为40 000 d的膜糖蛋白颗粒,定位于血小板内的α颗粒和内皮细胞棒管状(weible-palade)小体内。血小板活化时,血小板α颗粒膜与质膜融合,cd62p暴露于血小板质膜表面,成为血小板活化的一个特征性指标[5]。它不仅是活化血小板的特征性分子标志,而且在血栓形成中起重要作用。cd62p是通过介导血小板粘附于内皮细胞及血小板与中性粒细胞、血小板与单核细胞连接,从而产生中性粒细胞激活,血管活性物质、氧代谢产物释放,纤维蛋白原沉积等多种生物学效应,启动血栓形成过程。cd62p与血浆粘度、纤维蛋白原浓度呈正相关[6],因此,cd62p的升高可作为血栓疾病的病情监测和评价血栓前状态的有效指标,被誉为血小板功能检测的“金标准”。本研究以单克隆抗体为探针,采用流式细胞技术,直接测定血小板膜表面cd62p、血小板活化糖蛋白gpⅱb/ⅲa表达率而非测定血浆的含量,测定方法精密准确,灵敏度高。
   
　　中医学认为,“气为血帅,气行则血行”。年老体虚,久病耗气,气虚则运血无力而血行不畅,日久凝滞而瘀,血瘀又可加重气虚,故气虚与血瘀常互为因果。益气活血、化瘀通脉常为老年冠心病的基本治疗大法。笔者根据中医理论和前人经验,结合治疗老年冠心病的临床实践,自拟益气活血中药方。该方以黄芪为君,水蛭、丹参等为臣,益气药与活血祛瘀通络药相伍为用,遵“气为血帅,气行则血行”之理,益气有助于活血,祛瘀有益于行气,使补而不壅,攻邪不伤正,共奏益气活血、通脉养心之效。药理学研究表明,黄芪含黄芪多糖、葡萄糖醛、多种氨基酸、黄芪苷等,不仅能使人体大血管如心脏的冠状动脉和肾动脉扩张,而且能扩张全身末稍血管,进而改善血液流变性,提高组织细胞的摄氧,并能使血小板聚集性降低[7]；水蛭中所含水蛭素能阻止凝血酶对纤维蛋白原的作用,阻碍血液凝固,抑制血小板聚集和血栓形成,还含有一种组织胺样物质,可扩张血管,解除小动脉痉挛,活化纤溶酶、抑制胶原合成,从而降低血粘度,改善血液流变性；丹参具有扩冠、增加冠脉血流、增强心肌收缩力功能,并能解除冠脉平滑肌痉挛,降低血小板粘附率,抑制动脉粥样斑块形成,降低血脂作用。本研究结果表明,益气活血中药对老年冠心病患者具有较好的抗血小板活化的作用,此可能为其在临床上治疗冠心病取得较好疗效的机理之一。

【参考文献】
  1] 张文超,蒋作锋,张 锐,等.流式细胞术检测冠心病患者血小板表面糖蛋白的变化[j].广州医药,2007,38(1)：17－19.

　　[2] 王传新,卢振铎,杨晓静.冠心病患者治疗前后血小板活化指标cd62p及gpⅱb/ⅲa的检测及临床意义[j].临床检验杂志,2004,22(2)：135－136.

　　[3] 郑筱萸.中药新药临床研究指导原则[s].北京：中国医药科技出版社, 2002.68－72.

　　[4] 韩 悦,王兆铖,王爱青,等.糖尿病患者血小板膜糖蛋白的改变及临床意义[j].中华血液学杂志,1999,20：127－129.

　　[5] macchi l, christiaens l, brabant s, et al. resistance to aspirin in vitro is associated with increased platelet sensitivity to adenosinediphosphate[j]. thromb res,2002,107：45－49.

　　[6] 施寅铨,潘伟民.冠心病患者血小板膜糖蛋白cd62p表达和血粘度的临床研究[j].临床中老年保健,2003,3(1)：11－13.

　　[7] 高 建,徐先样,徐先俊,等.黄芪总皂甙抗血栓形成作用实验研究[j].中成药,2002,24(2)：116－118.