作者：徐烨， 张建平， 张凤华，
吴明华， 赵志国， 吴俊喜， 楚立
【摘要】 目的研究中药复方恬心汤对压力超负荷性心肌肥厚模型大鼠的作用及机理。方法采用大鼠腹主动脉缩窄法复制压力超负荷性心肌肥厚模型。于术后第8周测定心脏重量指数及血液生化指标，包括血管紧张素ⅱ（angⅱ）、内皮素(et)、醛固酮（ald）、心房钠尿肽(anp）、一氧化氮（no）、一氧化氮合酶（nos）、超氧化物歧化酶（sod）。结果模型对照组与假手术组比较, 心脏重量指数显著增加（p<0.01）；angⅱ、ald、et、anp显著升高，而nos、no、sod显著降低。卡托普利组、恬心汤干预组分别与模型对照组比较，心脏重量指数显著降低（p<0.01）；angⅱ、ald、et、anp显著降低，而nos、no、sod显著升高。wwW.11665.COM结论恬心汤可明显抑制压力超负荷性心肌肥厚大鼠心肌肥厚的发展，可能通过肾素-血管紧张素-醛固酮系统(raas）以及no系统而发挥作用。
【关键词】 恬心汤； 压力超负荷； 心肌肥厚； 大鼠
心肌肥大是心肌细胞对持续性负荷增加的一种适应性反应。初期的心肌肥大有一定代偿意义，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重构最终可导致心力衰竭，因此防止心肌肥厚对治疗心力衰竭有重要的意义。我们在长期临床实践和理论探索的基础上，研制出治疗心衰行之有效的益气活血中药复方恬心汤，临床应用于各类心脏病所导致的心力衰竭，取得了良好的临床疗效。本研究旨在探讨恬心汤对压力超负荷性心肌肥厚的作用，为临床应用提供实验依据。
1 材料与仪器
1.1 药物恬心汤由人参、当归、白芍、川芎、赤芍、丹参、炙黄芪、丹皮等组成，用水提醇沉法制成煎剂（1 g生药/ml），河北医科大学中医学院提供，实验时稀释至所需浓度。
1.2 动物健康雄性sd大鼠40只，体质量220～280 g，购于河北医科大学实验动物中心。
1.3 试剂与仪器卡托普利，常州制药厂有限公司生产，批号：0602281。fa2004型电子天平，上海良平仪器仪表有限公司。722光栅分光光度计，上海第三仪器厂。n-1001型eyela旋转蒸发仪、sb-2000型eyela水浴锅，上海爱郎仪器有限公司。fj-2021型γ-放射免疫计数器，西安二六二厂。
2 方法
大鼠随机分为5组：假手术组、模型对照组、卡托普利组、恬心汤干预组（小、大剂量组），每组10只，按照下列方法复制压力负荷性心肌肥厚模型：用20 g/l戊巴比妥40 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，打开腹腔，在肾动脉分支以上，钝性分离暴露腹主动脉。用5号医用丝线将直径约0.6 mm的6号去尖注射针头与腹主动脉一起平行结扎，抽出针头，即可形成腹主动脉狭窄。假手术组同样分离腹主动脉，但不结扎。手术后第6周起，假手术组、模型对照组每天生理盐水腹腔注射1 ml/100 g；卡托普利组给予卡托普利灌胃30 mg/kg；恬心汤小、大剂量组分别灌胃给药（1，3 g/kg），1次/d。第8周时用25%乌拉坦4 ml/kg麻醉后称重，股动脉取血，测定血管紧张素ⅱ（angⅱ）、内皮素（et)、醛固酮（ald）、心房钠尿肽（anp) 、一氧化氮（no）、一氧化氮合酶（nos）、超氧化物歧化酶（sod）；取其心脏，称心脏重量及心室重量，计算心脏重量指数（心脏重/体质量）、心室重量指数（心室重/体质量）。
3 结果
3.1 实验动物数量分析参加实验50只大鼠，在实验期间模型对照组大鼠因急性心衰死亡2只，卡托普利组因急性心衰死亡1只；恬心汤小剂量组因急性心衰死亡1只，恬心汤大剂量组和假手术组大鼠没有死亡。在实验观察终点时，存活大鼠共46只。
3.2 各组大鼠体质量、心脏重量指数、心室重量指数比较各组大鼠体质量比较，差异无显著意义（p>0.05)，模型组心脏重量指数、心室重量指数较假手术组明显增加（p<0.01)，说明模型组大鼠心肌明显肥厚。卡托普利组与恬心汤组心脏重量指数、心室重量指数较模型组明显降低（p<0.01）。见表1。表1 各组大鼠的体质量、心脏重量指数、心室重量指数比较(略)
3.3 各组大鼠血液生化指标比较模型对照组与假手术组比较，angⅱ，ald，et，anp显著升高，而nos、no、sod显著降低。卡托普利组、恬心汤干预组分别与模型对照组比较，angⅱ、ald、et、anp显著降低，而nos、no、sod显著升高。结果见表2。表2 各组大鼠血液生化指标比较(略)
3.4 统计学处理实验数据以±s表示，使用spss13.0统计软件进行数据处理和统计分析，组间比较采用单因素方差分析。
4 讨论
本实验结果显示，模型组心脏重量指数较假手术组明显增加，说明模型组大鼠心肌明显肥厚，复制模型成功。而经卡托普利、恬心汤干预后心肌肥厚明显减轻。
传统中医理论认为，充血性心力衰竭病机特点为本虚标实，本虚为气虚、阳虚，标实为血瘀水停，心气虚是心衰早期的主要病理特征，而血瘀是心衰晚期由于气虚阳虚帅血无力所引起的，故心衰的基本病机是“心阳不振、肺失清肃”。治疗心衰时需心肺兼治，扶正祛邪并举。我们在长期临床实践和理论探索的基础上，研制出治疗心衰行之有效的益气活血复方中药恬心汤，应用于各类心脏病所导致的心衰，取得了良好疗效。其现代药理研究诸药可达到强心、扩血管、抗血小板、利尿及保护心肌的效果。对于压力负荷导致心肌肥厚的作用机制有两种观点［1］：直接作用和间接作用。循环压力负荷直接导致心肌肥厚的观点认为压力负荷（机械信号）本身就足以刺激心肌细胞内部的肥厚反应；间接作用则认为还有一些自分泌、旁分泌和内分泌因子介入了这一过程，一方面直接刺激细胞生长，另一方面作为次级信号分子调节细胞对压力负荷的适应性反应，且这些分泌因子在心肌肥厚发生中的作用多年来一直是研究的热点，包括肾素-血管紧张素-醛固酮系统（raas）、儿茶酚胺类、no合成系统等。研究证实其中许多成分直接诱导或是介入了心肌肥厚的发生和发展过程，同时各系统之间并非孤立而是紧密相关的。如raas和no合成系统之间通过血管紧张素转化酶（ace）和缓激肽相互影响。ace不仅决定着angⅱ的最终产生，同时通过失活缓激肽来调节no的产生，因为活化的缓激肽可以刺激nos的活性。angⅱ与no的作用正好相反，显然它们之间的作用平衡将决定心肌细胞的收缩功能和能量消耗，这也是心肌肥厚发生的决定因素［2］。本次实验结果显示，压力负荷后angⅱ、ald显著升高，表明raas被激活，引起心肌肥厚。卡托普利属于血管紧张素转换酶抑制剂（acei），可明显抑制angⅱ、ald的上升，进而改善心肌肥厚。恬心汤也具有类似的作用，说明抑制raas的活性可能是其抗心肌肥厚的机制之一。anp为胚胎期表达的基因，出生后在正常心肌组织中表达量很低。如果检测到anp含量明显增加，则属于胚胎期基因重演，为病理性心肌肥大的可靠指标［3］。本实验结果显示，伴随心肌肥厚的发生，anp显著升高，而经药物干预后anp含量下降，说明恬心汤在抑制raas并改善心肌肥厚的同时也影响着anp的表达。
et是一种21个氨基酸组成的缩血管活性肽，具有多种生物学活性，包括促血管平滑肌增殖、纤维化、炎症等，是一种潜在的心肌细胞生长因子和肥厚因子。no是一种极强的舒张血管的物质，心脏中的no除引起冠状血管舒张，调节冠脉供血等一系列效用外，可通过自分泌和（或)旁分泌的途径抑制细胞增生和胶原合成改善心肌纤维化，故no是一种重要的抗心肌纤维化因子。no在心肌肥厚中发挥拮抗et等缩血管物质的作用［1～5］。本实验结果显示伴随心肌肥厚的产生，et升高显著，而no、nos显著降低。我们的实验结果提示，在心肌肥厚发生后的病理状态下，舒缩血管活性物质之间的平衡状态被打破，发生调节紊乱。而经卡托普利、恬心汤干预后，这一平衡状态有所恢复，这可能是恬心汤抗心肌肥厚的又一机制。
sod是体内清除氧自由基最主要的酶，能够有效地清除并终止o2-·引发的连锁反应，对机体的氧化和抗氧化平衡起着关键作用，其含量的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力［6］。本次实验中，恬心汤干预组大鼠sod明显高于模型组，说明恬心汤可阻止氧自由基对细胞膜的攻击，减轻脂质过氧化损伤，从而改善心肌肥厚。
综上所述，恬心汤可通过多途径、多环节发挥抗心肌肥厚的作用，其中以raas、no系统最为重要，其详细机制还有待于系统全面地研究。
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