作者：范卫锋,石勇新,张文,罗国琼
【摘要】 目的 通过对广西不同地区朱砂根的根和茎中岩白菜素含量的研究,对其药用部位提出建议。方法 采用薄层色谱法对其不同部位的主要成分进行定性分析,采用高效液相色谱法对其不同部位的主要成分岩白菜素进行定量分析。结果 同一株朱砂根中根和茎成分基本一致,而且茎中的岩白菜素含量大于根,叶中的岩白菜素含量最低。结论 朱砂根的茎具有综合利用价值。
【关键词】 朱砂根；岩白菜素；高效液相色谱法；含量测定
abstract：objective to find out the differences of bergenin content in ardisia crenata from different regions and its different parts, and suggest its medicinal parts. methods the bergenin content in different parts of ardisia crenata was identified by tlc and determined by hplc. results the difference of bergenin content in different parts of ardisia crenata was significant, and that in stems was better than in roots, which in the leaves was the lest. conclusion the stem was regarded as the available medicinal resources and is worth exploiting.
key words：ardisia crenata；bergenin；hplc；contant determination
朱砂根为紫金牛科植物朱砂根ardisia crenata sims的干燥根。wWw.11665.cOM主产于广西南宁、百色、桂林地区及广东、江西、浙江等省。别名铁凉伞、铁雨伞、大罗伞、小罗伞,用于咽喉肿痛、风湿痹痛、跌打损伤。本试验采用薄层色谱法对朱砂根不同部位中的岩白菜素进行定性分析,采用高效液相色谱法测定不同地区朱砂根的不同部位中主要成分岩白菜素的含量,为重新确定朱砂根药用部位提供依据。
1 仪器与试药
agilent1200系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱)。朱砂根(广西玉林制药有限责任公司提供,广西玉林制药有限责任公司王诗用高级工程师鉴定)；岩白菜素对照品(批号111532-200202,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 朱砂根的薄层色谱鉴别
取本品粉末0.2 g,加甲醇20 ml,超声处理30 min,放冷,滤过,滤液蒸至约1 ml,作为供试品溶液。另取岩白菜素对照品,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。按照《中华人民共和国药典》薄层色谱法(附录ⅵb)试验,吸取上述两种溶液各3 μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5∶4∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1∶1)的混合溶液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
agilent eclipse xdb-c18柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm)；流动相为甲醇-水(25∶75),流速：1.0 ml/min；检测波长：275 nm；柱温：30 ℃。理论塔板数按岩白菜素峰计算应不低于1 500[1]。见图1。
2.2.2 溶液的制备
精密称取岩白菜素对照品适量,加甲醇制成每1 ml含岩白菜素57.1 μg的溶液,作为对照品溶液。取朱砂根粉末适量,精密称定,置具平底烧瓶中,精密加入甲醇50 ml,称定重量,回流30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。
2.2.3 线性关系考察
分别精密吸取岩白菜素对照品溶液(57.1 μg/ml)1、2、3、4、5、10 ml, 置于10 ml的容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μl,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：y＝1.48×103x＋0.51,r＝0.999 9,在5.71～28.55 μg范围内呈良好的线性关系。
2.2.4 精密度试验
取岩白菜素对照品溶液,各重复进样6次,测定峰面积,结果岩白菜素峰面积rsd＝0.55%。
2.2.5 重复性试验
取同一批样品(6份),按供试品溶液制备方法制备供试品溶液, 测定朱砂根中岩白菜素含量,结果rsd＝0.72%。
2.2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液,分别于配制后0、4、8、12 h依法测定峰面积,结果岩白菜素的rsd＝0.50%,表明样品溶液在12 h内基本稳定。
2.2.7 加样回收率试验
取已知岩白菜素含量的朱砂根(茎)粉末,取约0.05 g,分别精密称定,平行称取6份,各加入一定量的岩白菜素对照品,制备供试品溶液。在所确定的色谱条件下进行测定,并测定峰面积,计算回收率。平均回收率为99.61%,rsd＝0.87%。见表1。表1 加样回收率测定结果（略）
2.2.8 样品测定
取3批朱砂根样品进行含量测定,结果见表2。表2 样品测定结果(略)
3 讨论
从薄层色谱和高效液相色谱中可看出,同一株朱砂根中根、茎、叶中均含岩白菜素成分,而且茎的岩白菜素含量大于根,叶中的岩白菜素含量最低(0.08%),提示朱砂根的茎有良好的药用开发前景,这对于扩大朱砂根的天然资源具有较重要的意义。
本试验考察了广西主产的朱砂根,其中桂林产的朱砂根质量最佳,未对其他产区的朱砂根进行研究。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[s].北京：化学工业出版社,2005.92－93.
