摘要目的分析hla-ⅱ类基因与狼疮性器官、系统损害的相关性，探讨系统性红斑狼疮(sle)从基因到临床表达的发病机制。方法应用pcr-ssoph技术检测113例确诊sle病人的dr、dqa1、dqb1等位基因。结果浆膜炎与dqb1*0601正相关；神经精神症状与drb1*1501正相关；血肌酐增高与dqb1*0302、dqb1*0401正相关；血尿素氮增高与dqb1*0201负相关；蛋白尿与dqb1*0301、drb3*0202、drb3*0301、drb1*1101负相关；血尿与dqb1*0301、drb3*0301负相关；管型尿与drb1*0302正相关；贫血和白细胞减少分别与dqb10201正相关；血小板减少与drb1*1502和drb1*1202正相关；淋巴细胞减少与drb1*0302正相关；c3降低与dqb1*0303正相关，与dqb1*0301负相关；狼疮细胞阳性与drb1*1501负相关。结论多个hla-ⅱ类等位基因和sle的临床表达有相关性，国人的sle遗传背景与其他人种有所不同。
关键词：红斑狼疮，系统性；hla抗原；多态现象(遗传学)；易感性与特异性；等位基因
系统性红斑狼疮(sle)发病与多种hla等位基因相关。为深入探讨这些基因或其关联的亚型与sle临床表达关系，我们引入pcr-ssoph检测技术，对113例确诊的sle病人进行hla-dr、dq位点等位基因分型，分析基因与狼疮性器官、系统损害的相关性，找出重型sle相关基因。WWW.11665.cOm
1资料与方法
1.1病例选择：入选的113例患者均符合1982年美国风湿病协会(ara)sle诊断标准4条或4条以上［1］。记录患者的性别、发病年龄，以及有无以下sle临床表现：蝶型红斑、盘状损害、光敏、口腔溃疡、关节炎、雷诺现象、狼疮发、神经精神症状、浆膜炎、血细胞减少、狼疮肾炎和c3降低(＜0.8 g/l)等。
标本：外周静脉血5 ml(抗凝)。
1.2实验方法：①基因组dna的提取：盐析法。②dna体外扩增—聚合酶链反应(pcr)。共有6对引物，其中amp-b为dr位点扩增的公用引物。③地高辛(dig)—ddutp3′末端标记寡核苷酸探针杂交。
1.3分型标准：以显著影响生存率的恶性指标作为重型sle分型标准［2］。
1.4统计学处理：χ2相关分析、多因素回归分析和多项比较校正，以p＜0.05为具统计学显著性。
2结果
2.1hla-ⅱ类基因分型
2.1.1等位基因分型结果：用12个dqa1探针检出7个亚型，未检出dqa1*0401；用15个dqb1探针检出12个等位基因，未检出dqb1*0504、*0603和*0604；用4个dr2探针检出4个亚型：用4个dr52组探针检出3个亚型，未检出drb3*0201；用8个dr52相关组探针分出8个亚型。
2.1.2h-w吻合度检测结果：在hla-dqa1和dqb1座位上，基因型的期望值与观察值很好吻合，分别p＞0.1和p＞0.5，说明基因已达到遗传平衡，本组病人可作为可靠的供研究的群体资料。
2.2hla-ⅱ类等位基因与sle器官、系统损害的相关性(见表1)
2.2.1hla-dqa1位点等位基因：dqa1*0101与淋巴细胞减少正相关；dqa1*0102与狼疮细胞阳性负相关；dqa1*0501与蛋白尿负相关，pc(多项比较校正p值)＞0.05。
2.2.2hla-dqb1位点等位基因：hla-dqb1*0201与贫血和白细胞减少正相关，与血尿素氮增高负相关；dqb1*0302与血肌酐增高正相关；dqb1*0303与c3降低正相关；dqb1*0401与血肌酐增高正相关；dqb1*0602与发病年龄正相关，均分别p＜0.05，pc＞0.05。
dqb1*0301分别与蛋白尿和血尿负相关，分别p＜0.001和0.01，分别pc＜0.05和pc＞0.05；与c3降低负相关，分别p＜0.05和pc＞0.05。dqb1*0601与浆膜炎正相关，分别p＜0.01，pc＜0.05。
2.2.3hla-dr2组等位基因：drb1*1501与神经精神症状正相关，与狼疮细胞阳性负相关；drb1*1502与血小板减少正相关，均分别p＜0.05，pc＞0.05。
2.2.4hla-dr52组等位基因：drb3*0202与蛋白尿负相关；drb30301与蛋白尿和血尿均呈负相关，均分别p＜0.05，pc＞0.05。
2.2.5hla-dr52相关组等位基因：drb10302与淋巴细胞减少和管型尿正相关；drb1*1101与蛋白尿负相关；drb1*1202与血小板减少正相关，均p＜0.05，pc＞0.05。
表1hla-dr和dq等位基因与sle临床指标的相关性
等位基因 临床指标 n1/n2 n3/n4 χ2值 p值 pc值
dqa1*0101 淋巴细胞减少 10/64 16/49 4.45 0.03＋ ＞0.05
dqa1*0102 狼疮细胞阳性 15/25 2/11 8.04 0.013－ ＞0.05
dqa1*0501 蛋白尿 19/69 5/44 4.20 0.04－ ＞0.05
dqb1*0201 贫血 5/51 18/62 6.38 0.01＋ ＞0.05
白细胞减少 8/65 15/48 6.11 0.01＋ ＞0.05
尿素氮增高 16/51 1/11 7.00 0.03－ ＞0.05
dqb1*0301 蛋白尿 27/69 3/44 14.39 0.000 1－ ＜0.01
血尿 29/90 1/23 7.30 0.007－ ＞0.05
c3降低 20/51 9/55 7.66 0.02－ ＞0.05
dqb1*0302 血肌酐增高 7/55 4/7 8.84 0.01＋ ＞0.05
dqb1*0303 c3降低 10/51 17/55 8.50 0.01＋ ＞0.05
dqb1*0401 血肌酐增高 1/55 2/7 8.81 0.01＋ ＞0.05
dqb1*0601 浆膜炎 21/99 8/14 8.30 0.03＋ ＜0.05
drb1*1501 cns损害 19/99 5/13 6.03 0.049＋ ＞0.05
狼疮细胞阳性 11/25 0/11 10.96 0.01－ ＞0.05
drb1*1502 血小板减少 0/55 6/58 6.01 0.01＋ ＞0.05
drb3*0202 蛋白尿 19/69 3/44 7.36 0.007－ ＞0.05
drb3*0301 蛋白尿 12/69 2/44 4.08 0.04－ ＞0.05
血尿 14/90 0/23 4.08 0.04－ ＞0.05
drb1*0302
淋巴细胞减少 1/64 5/49 4.12 0.04＋ ＞0.05
管型尿 4/104 2/9 5.56 0.02＋ ＞0.05
drb1*1101 蛋白尿 11/69 1/44 5.29 0.02－ ＞0.05
drb1*1202 血小板减少 0/55 5/58 4.96 0.03＋ ＞0.05
注：n1：等位基因阳性＋临床指标阴性数，n2：临床指标阴性数，n3：等位基因阳性＋临床指标阳性数，n4：临床指标阳性数，－：负相关，＋：正相关
此外，本研究尚发现hla-ⅱ类基因与多种自身抗体显著关联，但与性别、蝶型红斑、盘状损害、光敏、口腔溃疡、关节炎、雷诺现象和狼疮发无显著相关。
2.2.6多因素回归分析：结果表明等位基因相互间存在复杂的交互关系，dqb1*0401和dqb1*0605分别与血肌酐增高和蛋白尿正相关，分别p＜0.05。
3讨论
为探讨基因与sle临床表达关系，找出重型sle相关基因，我们进一步分析了hla-ⅱ类基因与狼疮性器官、系统损害的相关性。
3.1肾脏损害：fronek等［3］报道dr2与狼疮肾炎相关，还发现稀有等位基因dqb1*0605、*0502与白人、黑人和亚洲人狼疮肾炎显著相关，此相关在亚洲人最显著。doherty等［4］报道了对南方
病学教研室)
参考文献
1.tan em,cohen as,fries jf,et al.the 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus.arthritis rheum,1982,25:1271-1277.
2.谢尚葵，冯树芳，傅华.系统性红斑狼疮病人生存率的研究.中华医学杂志，1995，75：617-620.
3.fronek z,timmerman l,alper c,et al.major histocompatibility complex genes and susceptibility to systemic lupus erythematosus.arthritis rheum,1990,33:1542-1553.
4.doherty dg,ireland r,demaine ag,et al.major histocompatibility complex genes and susceptibility to systemic lupus erythematosus in southern chinese.arthritis rheum,1992,35:641-645.
5.王敏，董怡，黄尚志，等.
