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儿童HLADRB1、DQB1位点基因多态性分析

【关键词】  白族

  主要组织相容性复合体(mhc)是染色体上的一群紧密连锁的基因群,可作为一个遗传单位/单倍型而遗传,属共显性等位基因[1]。人类的mhc称人类白细胞抗原(hla)系统,位于人的第6对染色体短臂上。hladr、dq抗原是异基因移植免疫反应中最重要的抗原之一,决定其特异性的主要编码基因drb1、dqb1具有高度多态性,其对hla与疾病相关性及人类遗传学等研究均具有重要意义[2]。近年来,国外已经对不同人种和民族的hla分布情况作了大量的调查研究,我国对不同地区汉族群体hla遗传学的研究也在不断地深入,同时对少数民族的hla dna多态性的研究报道也逐渐增多,但尚未见昆明地区白族hladrb1、dqb1等位基因多态性研究报道[312]。本研究应用pcrssp技术对昆明地区70名白族儿童hladrb1、dqb1等位基因进行检测分析,旨在探讨昆明白族人群hladrb1、dqb1等位基因频率分布,从而提供遗传学方面的数据。

  1  材料与方法

  1.1  样本来源 

  2003年7月于昆明市某民族小学,抽取无血缘关系的70名年龄在6~12岁的白族儿童为研究对象,每人抽取静脉血2 ml,edta抗凝初步处理后置于-70℃冰箱保存,男女比为1∶1。

  1.2  实验方法

  1.2.1  基因组dna制备 

  采用血液基因组dna提取试剂盒(美国promega公司生产,批号:204337)在常温下快速提取儿童血液基因组dna。Www.11665.com

  1.2.2  hladrb1、dqb1位点基因分型 

  采用dna分型试剂盒(美国pelfreeze clinical systems公司) (pcrssp)扩增hladrb1、dqb1 dna片段,pcr反应体系、循环条件、操作方法及结果读判均按所附说明,读板纸为该试剂盒所附。

  1.3  统计分析 

  用直接计算法统计hladrb1、dqb1各等位基因的基因频率,样本分布经hardyweinberg平衡检验。

  2  结果

    在本研究中,70名昆明白族儿童hladrb1位点上共检出等位基因15个,见表1,其中drb1*0801及*0401、*1201基因频率最高,分别为20.7%、16.4%,而drb1*0101、*0103、*0307、*1001基因频率最低,各自仅占0.7%。表1  昆明白族儿童 hladrb1等位基因的频率分布(略)

    dqb1位点共检出等位基因7个,见表2,其等位基因频率由高到低依次为dqb1*0301、dqb1*06、dqb1*05、dqb1*04、dqb1*0303、dqb1*0302、dqb1*0201,其中dqb1*0301、*0601基因频率最高,分别为23%、21%,而*0201/02、*0302基因频率最低,各自占4%、6.4%。表2  昆明白族儿童hladqb1等位基因的频率分布(略)

  3  讨论

    白族是56个民族中历史较悠久的少数民族之一, 历史上白族经历了复杂的民族融合、变迁,它源于古代的氐羌族群的一支分支,在唐宋时期白族才逐渐形成。它有自己的语言,属汉藏语系藏缅语族白语支。汉晋时期的棘人是白族的直接祖源,唐宋时期的白蛮是其前身。唐宋是白族形成的重要时期,这个期间白族与中原地区互通有无,交往密切,在许多方面受到了汉族的影响,促进了本民族的发展,还同化了一部分迁移来的汉族。

  3.1  昆明白族儿童hladrb1基因频率与其它少数民族的比较 

  首次对昆明白族儿童hladrb1等位基因分型,观察到昆明白族人群在hladrb1位点上共检出15种等位基因,最常见的等位基因是*0801,高频等位基因是*0401、*1201、*0901,这几种等位基因共占可检出等位基因的62.8%,而*0101、*0103、*1001等位基因较少见;与其它民族比较,壮族中最常见的等位基因为*1501,高频等位基因是*1601、*1401、*0901,低频等位基因是*0701、*1306、*0801,这几种等位基因共占可检出等位基因的59.5%[11];纳西族中最常见的等位基因为*1201,高频等位基因是*0803、*0901、*1404,低频等位基因是*0305、*0438、*1123,这几种等位基因共占可检出等位基因的50.3%[7]。可以看出各少数民族hladrb1基因位点分布存在一定的共同点,但也存在一定的差异性,表现各自独特的hla遗传特征。

  3.2  昆明白族儿童hladqb1基因频率与其它少数民族的比较 

  昆明白族hladqb1基因位点上共检出7种等位基因,白族最常见的等位基因是*0301,高频等位基因是*0601、*0501的基因频率较高,而*0201、*0302、*0401等位基因较少见;纳西族中最常见的等位基因为*0301,高频等位基因是*0502、*0503、*1404[7];京族中最常见的等位基因为*0301,高频等位基因是*0502、*0201、*0501[12]。可以看出*0301是各少数民族的最常见的等位基因,其它基因上分布顺序也存在差异性。

【参考文献】
    1 章晓鹰,陈建杰,张 珏. hla基因多态性与临床疾病易感性的研究 [j]. 国外医学.临床生物化学与检验学分册,2004;25(4):313315.

  2 桂 姣,尚英彬,耿 龙 et al.沈阳地区汉族人群hladrb1的pcrsbt分型研究 [j].中华微生物学和免疫学杂志,2004;24(2):111.

  3 pimtanothai n, hurley c k, leke r et al. hladr and dq polymorphism in cameroon [j]. tissue antigens,2001;58(1):18.

  4 lee k w, oh d h, lee c et al. allelic and haplotypic diversity of hlaa, b, c, drb1, and dqb1 genes in the korean population [j].tissue antigens, 2005;65(5):437447.

  5 shanmugalakshmi s,balakrishnan k, manoharan k et al.hladrb1*,dqb1* in piramalai kallars and yadhavas, two dravidianspeaking castes of tamil nadu, south india [j]. tissue antigens, 2003; 61(6):451464.

  6 samaha h, rahal e a, aboujaoude m et al. hla class ⅱ allele frequencies in the lebanese population [j]. mol immunol,2003;39(1718):10791081.

  7 fu y, liu z, lin j et al. hladrb1, dqb1 and dpb1 polymorphism in the naxi ethnic group of southwestern china [j] .tissue antigens, 2003;61(2):179183.

  8 velickovic z m, delahunt b, carter j m. hladrb1 and hladqb1 polymorphisms in pacific islands populations [j]. tissue antigens, 2002; 59(5):397406.

  9 贾宗剑,付永贵,潘德京 et al.云南澜沧拉枯族hladrb1基因多态性研究 [j].遗传,2002;24(2):131136.

  10 文革生,黄永坤,郝 萍 et al.昆明彝族人群hladrb1、dqb1基因多态性 [j].中华医学遗传学杂志,2004;21(5):522523.

  11 潘尚领,刘承武,龙桂芳 et al.广西壮族hla drb1基因的多态性及其与主要周边民族的比较 [j].中华微生物学和免疫学杂志,2005;25(1):4851.

  12 lin j h,liu z h, lü f j et al. molecular analyses of hladrb1,dpb1, and dqb1 in jing ethnic minority of southwest china [j]. hum immunol, 2003; 64(8):830834.

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  •  作者:11665 [标签: 位点 基因 多态性 ]
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