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艾滋病检测方法的研讨
        艾滋病即获得性免疫缺陷综合症,由感染“hiv”病毒引起。hiv是一种能攻击人体免疫系统的病毒,它可以侵袭人的免疫体系,并终极损坏人体的免疫功效。随着人体免疫力的下降,人会越来越频繁地感染上各种致病微生物,而且感染的水平也会变得越来越来重,终极会因各种复合感染而导致逝死亡。艾滋病严重威胁人类的身心健康,当我们出现一些异样的症状后,应该选择什么样的检测方法,怎样确诊自己是否患有艾滋病就显得格外重要。按规定的检测程序对艾滋病的检测方法研讨如下。
        1材料和方法
        1.1材料:选取我院临床初筛检测病例72例,其中男性40例,女性32例。年龄28-63岁,平均39岁。
        1.2临床症状:初期的开始症状像伤风、流感、全身疲劳无力、食欲减退、发热、体重减少、随着病情的加重,症状日见增多,如皮肤、粘肤出现白色念球菌感染,单纯疱疹、带状疱疹、紫斑、血肿、血疱、滞血斑、皮肤容易损伤,伤后出血不止等。
        1.3方法:目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗hiv病毒抗体检测、核酸检测和抗原检测。wWW.11665.cOM其中对病毒抗体的检测是艾滋病初筛实验室常规使用的方法
        1.3.1酶联免疫吸附试验(elisa):目前应用的elisa法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。在一些特殊情况下,当抗体检测无法满足hiv感染诊断的需要时,病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用,这包括对非典型血清学反应样品的诊断、hiv感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。
        1.3.2明胶颗粒凝集法(pa):它是快速、简便的一种筛选方法。pa的基本过程是先将样品稀释,然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒,混匀后保温(一般为室温)。当血清中有hiv抗体存在时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。pa操作简便,无需特殊仪器设备,适合对少量标本的检测。是对大量人群初筛实验使用的方法,例公民义务献血的初筛检测。
        1.3.3免疫荧光试验(ifa):基本原理为应用h9或hut78培养细胞作为载体,用hiv感染细胞,该细胞内就会含有hiv抗原,将hiv感染的淋巴细胞涂于玻片上固定,制备为抗原片,加入待检血清,待检血清中的抗 hiv抗体与抗原结合后,再与荧光素标记的抗人ig结合,在荧光显微镜下可见到细胞内有黄绿色荧光。
        1.3.4免疫印迹试验:主要用于确认试验,基本原理是hiv全病毒抗原经过sdspage电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的hiv病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗hiv抗体,就会与膜条上的抗原带相结合并呈现紫褐色。此确认实验室是初筛阳性的标本送检省疾控的hiv确认实验室或市疾控的hiv中心实验室进行的。

      1.3.5病毒核酸检测:是通过检测hiv rna水平来反映病毒载量,具有很高的灵敏度,使用适时荧光聚合酶链反应(pcr)技术,能够在hiv感染的前2周检测到病毒核酸。病毒核酸检测方法可用于hiv的早期诊断,如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。目前常用的测定方法有逆转录pcr实验(rt pcr)、核酸序列扩增实验(nasba)、分支dna杂交实验(bdna)等。使用高灵敏度的适时荧光pcr技术,能够在hiv感染的前2周检测到病毒核酸。此种检测是在hiv感染确诊之后,判定使用抗病毒药物的检测指标,现在可有省疾控中心的艾滋病检测实验室完成。
        2结果
        经过我院的检测和分析后,14例送检经确认实验,未确诊艾滋病感染。
        3讨论
        近年来,hiv检测技术取得了很大进展,但是仍有不足的地方。例如elisa法第四代试剂增加了p24抗原的检测, p24抗原检测能够在病毒开始复制后检测到血液中的可溶性p24抗原,但易出现假阳性。因此,阳性结果必须经中和试验确认,该结果才可作为hiv感染的辅助诊断依据。还有病毒核酸检测方法具有很高的灵敏度,对疾病进展的监测、抗病毒疗效观察和耐药性监测非常重要。但是,由于hiv基因的多样性,没有一套引物可以覆盖所有的hiv序列,使检测的敏感性又受到限制。
        hiv感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。总结以上讨论的检测方法,我们得出的结论是,既要提高检测的敏感性、特异性,缩短窗口期,又要简便、快速和降低成本已成为hiv检测技术发展的要求和方向,很多的研究正致力于寻找病毒检测的替代技术。
参考文献
[1]曹韵贞         我国艾滋病的现状         中国抗感染化疗杂志 2002,2(2):65 66
[2]沈霞          艾滋病的实验室诊断        中华检验医学杂志 2003,26(5):327 328
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  •  作者:宫殿军 [标签: 艾滋病 检测 方法 ]
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