[摘要]　目的　了解注射用苦参碱对小鼠的半数致死量（ld50）。　方法　60只昆明种小鼠随机分为6组进行毒性试验，每组10只，雌雄各半，腹腔注射给药，剂量为150.0、120.0、90.0、60.0、30.0、0　mg/kg，记录小鼠出现的毒性反应症状与死亡时间，计算苦参碱对小鼠的ld50。解剖小鼠，取心、脾、肝、肺、肾等内脏，观察病理改变情况。　结果　分析小鼠的死亡数得回归方程probit　=　5.968　4-13.451　8x，苦参碱对小鼠的ld50为92.56　mg/kg，其95%置信区间为（79.53～106.38）mg/kg。　结论　苦参碱的毒性主要是作用于神经系统，高剂量苦参碱属于神经性毒剂，肺是苦参碱的主要毒性靶器官。
　　[关键词]　苦参碱；小鼠；半数致死量；毒性
　　[中图分类号]　r99 [文献标识码]　a [文章编号]　1674-4721（2012）12（c）-0064-02
　　苦参碱（matrine）是一种活性生物碱类化合物，是从苦参、广豆根、苦豆子等豆科植物中提取分离出的主要有效成分。研究显示，苦参碱具有多种药理活性，如抗肝纤维化、抗病毒、镇痛、解痉、抗心律失常、抗肿瘤、抗高血压、抗过敏、抗炎与免疫抑制等[1-3]。然而，中药有效成分的毒副作用不容忽视，文献报道高剂量苦参碱具有毒性作用[4]。为了了解苦参碱的毒性作用，为进一步考察苦参碱的毒效关系和研发苦参碱新型制剂提供实验数据，本文通过实验动物进行急性毒性试验，测定该药对小鼠的半数致死量（ld50）。WWw.11665.coM
　　1　材料与方法
　　1.1　实验动物
　　昆明种小鼠60只，清洁级，雌雄各半，由扬州大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：scxk（苏）2007-0001，体质量18.3～23.1　g，平均体质量（21.4±0.5）　g。饲养条件：室温，相对湿度为40%～70%，定时进食普通饲料，自由饮水。所有小鼠均经过预饲养7　d，均健康、活动自如、营养状况良好。
　　1.2　药物
　　注射用苦参碱（150　mg/支，湖北午时药业股份有限公司，批号：070623）。
　　1.3　苦参碱对小鼠ld50的测定方法
　　采用点斜法测定苦参碱对小鼠的ld50[5]。根据初步试验结果确定苦参碱的剂量范围，采用的最大剂量为150.0　mg/kg，其余剂量为120.0、90.0、60.0、30.0　mg/kg，用适量注射用水充分溶解后用10%葡萄糖注射液稀释。将小鼠随机分为5个不同药物剂量的实验组，每组10只，雌雄各半；另外10只作为对照组，仅给予0.9%氯化钠溶液。小鼠禁食6　h后（不禁水）进行逐一称重，并按照体重确定计量后一次性腹腔注射给药。在试验当天观察给药后小鼠出现的毒性症状次数，第2日起每日观察症状2次以上，记录小鼠出现的症状与死亡时间。死亡的小鼠立即进行解剖，未死亡的小鼠连续观察7　d后处死并进行解剖，取心、脾、肝、肺、肾等内脏，观察病理改变情况。
　　1.4　统计学方法
　　计量资料用x±s表示，采用spss　19.0统计学软件处理数据，采用probit回归法拟合回归方程和计算苦参碱对小鼠的ld50与置信区间，采用χ2检验法检验回归方程拟合优度。
　　2　结果
　　2.1　小鼠的观察结果
　　对照组小鼠正常生长，活动自如，体质量增加。60.0、30.0　mg/kg剂量组给药后，大多数小鼠活动自如，状态正常，体质量增加；少数出现前肢稍震颤、轻度不安。150.0、120.0、90.0　mg/kg剂量组给药后，一部分小鼠出现行动迟缓、活动减少、身体蜷缩、双眼紧闭、肌肉震颤等症状；一部分小鼠给药数分钟后出现精神兴奋、身体发抖，甚至是强直性痉挛；一部分小鼠出现上述症状后数小时内死亡。死亡小鼠的尸体解剖可见肺部充血性水肿，而心、脾、肝、肾脏无显著改变。出现毒性症状而未死亡的小鼠症状逐渐消失，体质量增加，活动逐渐恢复正常。
　　2.2　回归方程与ld50结果
　　采用probit法分析6组小鼠的死亡数，得回归方程为probit　=　5.968　4-13.451　8x，拟合优度检验χ2　=　0.318，p　=　0.986。由回归方程可计算出：当prob　=　0.50时，注射用苦参碱对小鼠的ld50值为92.56　mg/kg，其95%置信区间为（79.53～106.38）　mg/kg。
　　3　讨论
　　苦参碱的化学名为苦参啶-15-酮，化学分子式为c15h24n2o。注射用苦参碱是目前苦参碱的主要临床制剂，为白色疏松块状物或粉末，具有吸湿性，用适量注射用水充分溶解后加入10%葡萄糖注射液中缓慢静脉滴注[6]。注射用苦参碱有利尿退黄、

毒、清热利湿、退黄、改善病理性肝炎症状和体征、降酶等功效，目前在临床上主要用于活动性慢性迁延性肝炎的治疗[7]，因为苦参碱具有显著的抗肝纤维化作用。苦参碱还具有抑制机体肿瘤细胞的增殖、转移作用，可有效诱导肿瘤细胞凋亡，因而可以用于多种癌症的治疗[8-9]。有关苦参碱的毒性研究不多，且不同给药途径计算出的苦参碱对小鼠的ld50值有一定的差异。王晓燕等[10]报道苦参碱通过腹腔注射途径给药的ld50值为107.31　mg/kg，小鼠的毒性器官解剖结果发现苦参碱的毒性作用主要为神经系统损伤。张宏利等[11]报道苦参碱通过灌胃途径给药，显示对小鼠的ld50值为64　mg/kg。因此可以认为苦参碱通过腹腔注射途径对小鼠的毒性作用较低，而小鼠对腹腔注射的耐受性相对较强。
　　本文中高剂量组小鼠出现的毒性反应主要有肌肉震颤、精神兴奋、身体发抖、强直性痉挛等，可见苦参碱的毒性主要是作用于神经系统，可认为高剂量苦参碱属于神经性毒剂。因此，在苦参碱的临床应用中应当充分考虑到该药的临床有效剂量，避免药物过量所产生的神经毒性反应。过量的苦参碱可导致对人体神经系统的过度刺激，严重中毒可能会影响脑干的功能，导致自主神经功能出现异常，甚至导致脑水肿症状。临床中一旦出现药物中毒反应，应及时停药，对患者进行监护与观察，并给予神经毒性常规疗法治疗。这种毒性作用可加以合理利用，苦参碱也可作为杀虫剂，主要用于防治森林食叶害虫、菜青虫等害虫。由于苦参碱对小鼠具有毒性作用，且适口性良好，可作为杀鼠剂使用。尸体解剖显示死亡小鼠肺部出现充血性水肿，表明肺部损害是小鼠死亡的直接原因，因而认为肺是苦参碱对小鼠的主要毒性靶器官。本文通过小鼠急性毒性试验计算出苦参碱对小鼠的ld50值为92.56　mg/kg，为进一步考察苦参碱的治疗指数、毒效关系、抑瘤实验等提供了实验依据。而在进一步研究中，可对苦参碱的分子结构进行合理的修饰，或制备新型苦参碱剂型，以期获得高疗效、低毒性的临床药物，提高苦参碱的临床用药安全性。
　　[参考文献]
　　[1] 马玲娣，张彦，文世宏，等.　苦参碱抗肿瘤作用及其机制的初步研究[j].　中国免疫学杂志，2007，23（5）：434-437.
　　[2] 王晓燕，李伟忠，梁磊，等.　苦参碱对小鼠免疫器官的影响[j].　时珍国医国药，2010，21（10）：2545-2546.
　　[3] 戴五好，钱利武，王丽丽，等.　苦参碱、氧化苦参碱对小鼠的毒性研究[j].　安徽医药，2012，16（7）：904-905.
　　[4] 陈立波，郝六平，王宏，等.　注射用盐酸苦参碱对卡介苗加脂多糖致小鼠免疫性肝损伤的保护作用[j].　现代预防医学，2008，35（21）：4305-4306.
　　[5] 李军，司维柯，赵宸，等.　苦参碱与氧化苦参碱影响荷瘤小鼠肿瘤生长及其免疫调节作用的研究[j].　重庆医学，2011，40（27）：2719-2721.
　　[6] 高志星，尤龙，李蕾，等.　氧化苦参碱对肝纤维化大鼠保护机制的研究[j].　中国医学创新，2009，6（26）：20-22.
　　[7] 吴迪炯，周郁鸿，朱俊，等.　苦参碱对急性早幼粒细胞白血病细胞维甲酸耐药的逆转作用研究[j].　中华血液学杂志，2011，32（5）：317-321.
　　[8] 罗娜，何松，汤为学，等.　二硫代氨基甲酸吡咯烷联合苦参碱对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用[j].　中华肝脏病杂志，2011，19（4）：275-280.
　　[9] 张丽华，陈邦恩，潘明佳.　苦参碱药理作用研究进展[j].　中草药，2009，40（6）：1000-1003.
　　[10] 王晓燕，梁磊，常建兰，等.　苦参碱对小鼠的毒性研究[j].　南方医科大学学报，2010，30（9）：2154-2155.
　　[11] 张宏利，杨清娥，杨学军，等.　苦参碱的提取分离工艺及对小鼠的毒性研究[j].　西北植物学报，2005，25（8）：1649-1652.
　　（收稿日期：2012-11-12 本文编辑：陈 俊）