上皮性卵巢癌病人血清upa、upar和ca125含量检测及其临床意义
【关键词】 卵巢肿瘤;尿纤溶酶原激活物;upar;ca125抗原
【摘要】 目的 探讨上皮性卵巢癌病人血清中尿激酶型纤溶酶原激活物(upa)及其受体(upar)和糖蛋白抗原125 (ca125)含量的变化及其临床意义。方法 采集 44例上皮性卵巢癌（卵巢癌组）、35例卵巢良性上皮性肿瘤（良性肿瘤组）和30例正常卵巢（对照组）病人血清标本，用elisa方法检测血清中upa、upar 含量，化学发光法检测血清ca125含量。结果 卵巢癌组upa、upar和ca125的分泌水平较良性肿瘤组及对照组明显升高,差异有显著性(f=9.49～4 824.97,q=5.183～119.350,p<0.01)；良性肿瘤组与对照组各指标比较差异无统计学意义(p>0.05)。卵巢癌组upa、upar和ca125的分泌水平随着手术病理分期的增高及组织分化程度的降低而增高，差异有显著性（f=15.00～649.46,q=4.467～56.536,p<0.01）。卵巢癌组有淋巴结和（或）大网膜转移者中upa和upar含量较无转移者明显增高，差异有极显著性（t=8.445～18.608,p<0.01）。卵巢癌病人血清upa、upar和ca125联合检测的阳性率和敏感度较血清ca125单一检测升高，差异有显著意义(χ2=3.123,p<0.05)。WWw.11665.Com结论 联合检测血清中upa、upar和ca125的含量，对判断卵巢癌的发生发展、浸润和转移有重要意义。
【关键词】 卵巢肿瘤;尿纤溶酶原激活物;upar;ca125抗原
detection of serum upa, upar and ca125 in patients with epithelial ovarian cancer
lin hui, shan feng, wang xiangyu, et al
(department of gynecology, the affiliated hospital of qingdao university medical college, qingdao 266003, china);
［abstract］ objective to explore the clinical significance of the changes of serum levels of urokinasetype plasminegen activator (upa), upa receptor (upar) and ca125 in patients with epithelial ovarian cancer (eoc). methods serum samples were collected from 44 patients with eoc, 35 with benign ovarian epithelial tumors (boet) and 30 normal controls. elisa was used to detect the upa and upar, and biochemical colorimetric method to detect ca125. results the levels of upa, upar and ca125 in the cancer patients were significantly higher than those of benign and normal controls (f=9.49-4 824.97,q=5.183-119.350,p<0.01). but the differences between benign tumor and normal controls were not statistically significant (p>0.05). the levels of upa, upar and ca125 in the cancer increased with the elevation of pathology staging and degrading of histology differentiation (f=15.00-649.46,q=4.467-56.536,p<0.01), the levels of upa, upar and ca125 were dramatically elevated in those with lymph node and/or omentum metastasis (t=8.445-18.608,p<0.01). the positive rate and sensitivity were higher by combined detection of upa, upar and ca125 than by detection of ca125 alone (χ2=3.123,p<0.05). conclusiona simultaneous determination of serum levels of upa, upar and ca125 is of great significance in the judgement of the occurrence, development, infiltration and metastasis of ovarian cancer.
［key words］ overian neoplasms; urine plasminogen activator; upar; ca125 antigen
卵巢癌是女性生殖器三大恶性肿瘤之一，由于缺乏早期诊断方法以及理想的检测指标， 卵巢癌病人初诊时多数已为晚期, 5 年生存率仅为15%～20%，发病率逐年上升并有年轻化趋势，已成为严重威胁我国妇女生命的疾病。早发现、早诊断是提高卵巢恶性肿瘤病人生存率的有效手段，而肿瘤标志物的升高可先于影像学改变和临床症状数个月出现,有助于早期发现卵巢癌并对其进行分期[1],因此寻找一种对卵巢癌敏感特异的肿瘤标志物是必要的。至今尚无一种存在于血清、对卵巢癌特异并且在病灶局限时即可检出的肿瘤标记物。临床上倾向于几种肿瘤标记物联合检测。近年来研究发现，尿激酶型纤溶酶原激活物（upa）及其受体（upar）与卵巢癌的发生发展、浸润转移密切相关。同时，糖蛋白抗原125（ca125） 水平的升降与卵巢癌的发展及预后有关。本研究联合检测卵巢癌病人血清中upa、upar、ca125含量，分析其与肿瘤分期、分化、转移的关系，探讨其对卵巢癌早期诊断、病情监测及预后判断的临床应用价值。
1 对象和方法
1.1 研究对象
所有研究对象均为2007年9月—2009年8月在我院妇科行手术治疗的病人, 术后均经病理证实。其中卵巢癌组病人44例，年龄51～69岁,平均55.3岁,均未接受放、化疗。根据国际妇产科联盟(figo, 2000)手术病理标准分期：ⅰ期10例(ⅰa期4例, ⅰb期2例, ⅰc期4例), ⅱ期10例(ⅱa期4例, ⅱc期6例), ⅲ期15例(ⅲa期5例, ⅲb期4例，ⅲc期6例), ⅳ期9例。低分化者24例，中分化者10例，高分化者10例。有淋巴结转移者16例，有大网膜转移者24例。浆液性囊腺癌26例，黏液性囊腺癌18例。良性肿瘤组病人35例，年龄20～57岁，平均37.8岁。对照组30例取自于因子宫肌瘤和子宫脱垂行手术治疗的正常卵巢病人，年龄18～60岁，平均35.9岁。所有研究对象均无其他并发症，排除服用避孕药及性激素类药物者, 2周内均未接受抗凝及溶栓治疗。
1.2 检测指标及方法
1.2.1 标本采集
采集清晨空腹静脉血4 ml,注入干试管内,以3 000 r/min离心10 min,取上清液分装eppendorf管中,-70 ℃保存待测。
1.2.2 血清upa、upar和ca125检测 upa与upar的检测采用酶联免疫吸附（elisa）法，试剂盒分别购自武汉博士德生物工程有限公司和上海锐聪科技发展有限公司，按试剂盒说明书操作,并根据各自的标准曲线计算血清中upa和upar的含量。血清ca125浓度采用美国beckman coulter化学发光仪测定。
1.2.3 结果判定
upa与upar的上限临界值分别为2.074 μg/l和0.539 μg/l，ca125正常参考值为0～35 ku/l。血清ca125与upa和（或）upar联合检测阳性判定方法:二者联合检测中1项阳性定为阳性,2项均阴性定为阴性;三者联合检测中≥1项阳性定为阳性,三者均阴性定为阴性。
1.3 统计学处理
应用spss 13.0及ppms 1.5[2]统计学软件进行数据处理，计量资料以±s表示，组间比较用f及t检验,计数资料比较用χ2检验，以p<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组upa、upar和ca125水平比较
卵巢癌组upa、upar和ca125的血清含量明显高于良性肿瘤组及对照组，差异有显著意义(f=9.49～4 824.97,q=5.183～119.350,p<0.01)；而良性肿瘤组与对照组3指标血清含量差异无显著性(q=0.185～1.338,p>0.05)。见表1。表1 各组病人血清upa、upar和ca125含量比较(略)
2.2 卵巢癌病人upa、upar和ca125的分泌水平与其病理特征的关系
卵巢癌病人血清中upa、upar和ca125含量随着手术病理分期的增高、组织分化程度的降低而增高，差异均有显著意义（f=15.00～649.46,q=4.467～56.536,p<0.01）。upa和upar含量与卵巢癌的淋巴结转移及大网膜转移显著相关（t=8.445～18.608,p<0.01），与肿瘤的病理类型无明显相关性(t=0.507、0.781,p>0.05)。ca125含量与肿瘤的病理类型密切相关（t=193.570,p<0.01），与淋巴结及大网膜转移无明显相关性(t=1.564、0.790，p>0.05)。见表2。表2 卵巢癌病人upa、upar和ca125的分泌水平与其病理特征的关系(略)
2.3 血清upa、upar和ca125单独及联合检测卵巢癌的阳性率和灵敏度比较
upa与ca125联合检测、 upar与ca125联合检测、 upa、upar和ca125 三者联合检测卵巢癌的阳性率和灵敏度均高于ca125单独检测,差异有统计学意义(χ2=3.123,p<0.05)。见表3。表3 upa、upar和ca125单独及联合检测卵巢癌的阳性率和灵敏度比较（略）
3 讨论
卵巢肿瘤细胞分泌的无活性的upa前体（proupa）在血浆中被激活为双链有活性的upa, 后者与upar 结合, 激活纤溶酶原(plg)转化为纤溶酶(plm), 降解细胞外基质及基底膜的主要结构成分，调控肿瘤细胞的迁移，在细胞分化及侵袭转移中具有重要作用[3]。ca125是卵巢癌相关抗原,是一种相对分子质量较高的糖蛋白,于胚胎期由上皮细胞分泌,目前许多研究证实ca125是卵巢上皮性癌临床诊断、疗效观察和预后评估较理想的肿瘤标志物,但灵敏度及特异度不强[4]。
本文研究结果显示，upa和upar在卵巢癌病人血清中的含量较正常对照组及良性肿瘤组升高，差异有显著性，并且随着figo分期的增加、组织分化程度的降低而增高，特别是在淋巴结及大网膜转移组upa和upar含量升高明显，差异有显著性，提示upa和upar在促进肿瘤浸润转移的过程中表现为协同作用，两者血清含量的升高可为判断卵巢肿瘤的良恶性、临床分期、组织分化、有无淋巴结和大网膜转移提供依据。此结果与王翔宇等[5]和borgfeldt等[6]关于upa和upar在卵巢癌组织中基因转录水平上调及蛋白表达增高的研究结果一致。
本文结果表明，ca125水平随着肿瘤恶性程度的增加逐渐升高，与upa、upar在卵巢癌发展浸润过程中血清含量的变化一致，提示ca125与upa、upar 有一定的相关性。体外细胞系研究显示，表达ca125较高的肿瘤细胞特异性抗肿瘤免疫应答的能力降低,更易于逃避宿主的免疫监视和杀伤作用[7],肿瘤负荷加大,恶性程度增高，癌细胞释放更多的ca125、upa和upar入血,造成血清ca125、upa和upar水平升高。本文的研究结果显示,血清ca125值与卵巢癌组织类型密切相关,浆液性囊腺癌的阳性率明显高于黏液性囊腺癌,而upa和upar含量与肿瘤的病理类型无明显相关性，提示ca125、upa和upar联合检测在卵巢非浆液性囊腺癌的诊断中有一定参考价值。
ca125在卵巢癌早期诊断方面灵敏度欠佳,为了弥补单一肿瘤标志物的不足,增加肿瘤检测的灵敏度，本文联合检测upa、upar和ca125，结果显示，upa+ca125、 upar+ca125、 upa+upar+ca125 联合检测卵巢癌的阳性率和灵敏度均高于单一检测ca125的阳性率和敏感度,差异有显著性，提示联合检测upa、upar和ca125优于单一检测ca125,对卵巢癌的鉴别诊断、早期诊断及治疗、恶性程度的评价、降低病死率均具有重要价值。
综上所述，卵巢癌病人upa、upar和ca125水平与卵巢癌的发生发展及病理特征密切相关；联合检测卵巢癌病人血清中upa、upar、ca125的水平，阳性率和灵敏度均优于单一检测血清ca125水平，因此可考虑将upa、upar和ca125的血清学检测推广应用于临床卵巢癌的诊断。
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