作者：张国华，赵健雄，李妍怡，乔成栋，于妍，袁毫

【摘要】  　　目的观察中药定眩合剂（dingxuanheji)对兔椎基底动脉供血不足（vbi）脑组织去甲肾上腺素（ne），5-羟色胺（5-ht）含量及血液流变学的影响。方法选健康青紫兰兔40只,随机分为空白组，模型组，西比灵组，定眩合剂高、低剂量组，每组8只，除空白组外其余各组高脂饲料喂养并注射硬化剂，7 d重复1次，6周后造模成功，再连续给相应药物4周后处死，进行指标测定。结果定眩合剂能使椎基底动脉供血不足动物脑组织ne，5-ht的含量增加，并使血液流变学主要指标降低, 减少了血栓形成的可能。结论定眩合剂可提高ne，5-ht的含量，通过改善通气状况对vbi脑组织具有保护作用，并能有效改善血液流变学,血液流变学水平的高低可反映椎基底动脉供血不足病变的程度及治疗效果。

【关键词】  定眩合剂； 椎-基底动脉供血不足； 去甲肾上腺素； 5-羟色胺

　　abstract：objectiveto study effects of dxhj on the ne,5-ht contents of brain tissue and blood rheology in vertebro-basilar artery insufficiency model rabbits. methods40 rabbits were randomly divided into 5 groups，normal group, model group, flunarizine group and dxhj high, low dose groups．except normal group, the rest were fed by high fat diet, and injected yinghuaji once a week for six weeks. ten weeks later, the rabbits were sacrificed and the chose targets were tested. resultsthe dxhj could raise the cortents of monoamine neurotransmitters, and decrease blood viscosity.conclusiondxhj can elevate the contents of monoanine renrotarsinitters, protect vbi brain from damage, and improve hemorheology.

　　key words： dingxuanheji；  vertebrobasilar insufficiency；   ne；  5-ht；
   
　　椎基底动脉供血不足（vbi）是由于短暂性血液供应不足导致脑干、小脑或枕叶皮层缺血的一组临床综合征，是神经系统的常见病、多发病，其特点为反复发作,缠绵难愈,每年有10%的病人发生完全性脑卒中, 急性基底动脉闭塞或急性双侧椎动脉闭塞的死亡率则高达80% 以上。wWW.11665.Com因此对vbi 进行积极的治疗, 无论在临床上, 还是在预防医学上均有很大的意义。脑内单胺类神经递质是一类具有广泛生物学活性的物质,在中枢神经系统参与许多生理反应。这些物质在组织中的含量是反映神经递质生物合成、释放、摄取、失活等过程的生化指标，在研究神经元功能状态或研究药物对神经组织作用的影响时,常用这些生化指标。近年来发现,病理情况下它与脑血管病关系密切［1］，本研究主要观察定眩合剂(dxhj) 对椎基底动脉供血不足脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(ne) 、5-羟色胺(5-ht) 含量的影响及其血液流变学的改变，探讨dxhj的作用机制。

　　1  材料与仪器

　　1.1  动物健康青紫兰兔40 只 , 雌雄各半, 体质量( 2.0±0.3) kg, 兔龄3～4 月, 合格证号：医动字号14-004,由兰州生物制品研究所实验动物室提供，附合一级实验动物质量标准。室温18～20℃,湿度65%～70%,实验前适应性喂养3 d后随机分为5组, 即空白组、模型组，西比灵组，定眩合剂高、低剂量组,每组8只。

　　1.2  药物及试剂定眩合剂由甘肃省中医院制剂室配制 (药物组方：岷当归，川芎，半夏，天麻，白术，茯苓，陈皮，钩藤，甘草) ； 西比灵由西安杨森制药有限公司生产，批号：20080109；消痔灵注射液由吉林省集安益盛药业股份有限公司生产，批号：080321；利多卡因，批号：0708022；胆固醇购自北京双旋生物培养基制品厂，批号：20070606。猪油，鸡蛋，白糖，市售，自备。ne，5-ht试剂盒购自美国adl公司。

　　1.3  仪器经颅多普勒血流检测仪为美国卜ledasoraics tcd仪，探头频率2hziz；日立高速低温冷冻离心机；722 s分光光度计，上海紧密科学仪器有限公司产品。

　　2  方法

　　2.1  造模方法参照成都中医药大学郑重等［2］的造模方法，用硬化剂（消痔灵与利多卡因按1∶1混合）10 ml，于家兔左侧c3～c5颈椎横突侧面，进针以感觉到横突边缘为准，回抽针栓无血、无气、无脑脊液，然后推注硬化剂，于7 d后重复注射一次。同时除空白组外其余各组高脂饲料喂养（高脂饲料由2%胆固醇、5%鲜蛋黄、3%白糖、10%猪油、80%基础饲料配制而成）［3］。6周内造模成功，以tcd检验造模成功。

　　2.2  给药方式将40只青紫兰兔随机分为5组，即空白组，模型组，西比灵组，定眩合剂高、低剂量组。西比灵组以西比灵1.2 mg/(kg·d)，并以每千克体重10 ml蒸馏水稀释,制成混悬液灌胃；治疗组分别予定眩合剂低、高剂量［3.6 ，7.2 ml/(kg·d)］灌胃（本品每毫升含天麻以天麻素计，不得少于0.19 mg）；模型组同时灌胃以相应体积的生理盐水；空白组不予任何处理。此后，每周秤一次体重,根据体重调整给药量。

　　2.3  指标测定

　　2.3.1  脑组织单胺类神经递质的测定脑组织匀浆的制备：实验用家兔断头处死，迅速打开颅腔，在冰浴中迅速分离大脑脑干，放于硫酸纸上称重，将脑组织放入装有3 ml预冷生理盐水中，退去纸重求得脑组织的净量，按1∶30的比例补充生理盐水量制成组织匀浆，将组织匀浆倒入带塞离心管中，振荡5 min，然后4℃在3 000 r·min-1离心15 min，取上清液，2～8℃冰柜保存酶联免疫吸附法测定脑组织ne，5-ht含量。

　　2.3.2  血液流变学测定每组兔子在清醒状态下，心脏穿刺取血, 肝素抗凝。将5 ml 血液放入毛管式自动显示流变仪中操作, 观察5组动物全血粘度、血浆粘度与红细胞压积的变化。

　　2.4  统计学处理应用spss 10.0软件，实验所得数据均以±s表示,各组间两两比较采用f检验。

　　3  结果与分析

　　3.1  各组ne， 5-ht含量的比较  结果见表1。 表1  定眩合剂对模型家兔ne，5-ht的影响（略）

　　3.2  各组血液流变学的比较结果见表2。表2  定眩合剂对模型家兔血液流变学全血黏度的影响（略）

　　表1结果表明，模型组脑组织内ne、5-ht含量与空白组比较明显降低（p<0.01）。应用定眩合剂后，低剂量治疗组兔脑组织内ne、5-ht含量无明显变化（p>0.05），高剂量组与模型组比较差异有显著性( p<0. 05， p<0.01)，随着定眩合剂治疗量的增加，高剂量组与小剂量组之间有差异（p<0.05），实验动物脑内ne，5-ht含量增高。
   
　　表2资料经统计学处理表明：模型组与空白组比较差异有显著统计学意义(p<0.01) ，提示模型组血黏度明显高于正常组；西比灵组与模型组比较差异无统计学意义(p>0.05) ，提示西比灵无降低血黏度作用；定眩合剂高剂量组与空白组比较差异无统计学意义(p>0.05) ，提示定眩合剂低、高剂量干预模型家兔后血黏度基本恢复至正常水平。

　　4  讨论

　　4.1  定眩合剂对ne、5-ht含量的影响椎-基底动脉的供血是脑部血液供应的重要系统。本实验结果显示了实验动物脑组织单胺类神经递质与vbi之间病理生理上的密切关系。脑内单胺类神经递质ne、5-ht 是由神经细胞合成后储存于囊泡内,当动作电位到达神经末梢时,在ca2+ 的参与下通过酶解或再摄取被迅速清除。　birthelmer等［4～6］ 认为中枢神经系统缺血期间可刺激脑内单胺类递质如5-ht、ne等的大量释放，这些递质又是ca2+的激动剂，可开启ca2+通道闸门，使ca2+大量流入胞内，神经元内钙超载；另一方面，缺血前已合成的神经递质大量释放进入细胞间隙, 细胞间隙蓄积的单胺类神经递质在脑缺血过程中发挥更多的损伤作用，使神经元破坏加剧，最后这些递质一部分被降解,一部分被带入脑脊液及血液中,终使脑组织中递质含量下降。另有研究表明［7，8］ , 某些神经元有单胺类介质与肽类物质共存, 在脑缺血后, 这两类物质的水平都发生了改变,β内啡肽控制5-ht的含量, β内啡肽减少时, 5-ht水平就增高, β内啡肽增高时, 5-ht水平就减少, 5-ht含量下降促使β内啡肽释放增加，从而引起通气抑制，缺氧状态下脑5-ht含量升高有助于改善通气状况。定眩合剂中含有当归内酯，川芎嗪，天麻素，钩藤碱等有效成分。当归内酯对缺血脑组织有保护作用［9］ ；川芎的有效成分为川芎嗪和阿魏酸,川芎嗪可迅速透过血脑屏障,在脑部发挥扩血管、改善微循环和抑制血小板聚集作用，对脑缺氧有明显的对抗作用［10］ ；钩藤碱降低细胞内ca2+超载，还具有改善低氧性脑代谢紊乱作用［11］ 。天麻制剂具有抑制能量代谢障碍的作用［12］ ，本实验发现，定眩合剂高剂量干预的vbi，单胺类胺神经递质含量明显高于非干预组。提示定眩合剂有助于提高ne、5-ht含量，通过改善通气状况对缺血、缺氧性脑组织具有保护作用。以上资料表明, 脑组织中ne和5-ht 含量的下降对缺血脑组织产生不利影响。本实验结果证明椎基底动脉供血不足模型ne、5-ht含量显著降低, 服用定眩合剂后改善明显。

　　4.2  定眩合剂对血夜流变学的影响椎基底动脉供血不足的发病主要是血流动力学改变所致,少数可能由微栓子引起,血液流变学与中医血瘀的关系密切,血流流变学指标反映血液的黏滞性、浓稠性、聚集性和凝固性，是血瘀证病理变化的重要参数。全血黏度主要由红细胞和变性能力所决定,家兔的红细胞与人相同，均为无核红细胞,其聚集性与人相对接近, 当血液黏滞度增高、显著的高黏状态,这势必影响微循环的灌注; 全血黏度增高则血液流动性差, 最终导致微循环障碍。当归及其水溶性成分阿魏酸能抑制血小板释放5-ht ,后者是血小板聚集的促进剂;阿魏酸也能提高血小板中环磷酸腺苷(camp) 浓度,抑制血栓素a2 ( txa2 ) 的合成［13］；天麻的有效成分天麻素能抑制血小板粘附,阻止血栓形成。本实验较全面地反映了不同切变率下的全血黏度变化。与正常组比较,造模后模型组低、高切变率明显增高,说明本法造模可增加家兔血液的黏滞性。定眩合剂对低、高切变率下的全血黏度有显著降低作用,从一个侧面证明了定眩合剂确有化瘀作用。根据本研究结果，定眩合剂可有效降低vbi家兔明显升高的全血粘度，增加该模型家兔的脑血流量，降低血黏度。从本文资料分析,椎基底动脉供血不足家兔,血液流变学存在明显异常,这与文献报道一致［14］ 。
   
　　本病在祖国医学属眩晕范畴。《素问·至真要大论篇》云“诸风掉眩,皆属肝木” 。肝为风木之脏,肝肾阴虚,不足于下,阳亢化风,挟痰上扰,清空失养,是眩晕发生的基本病机,属本虚标实证。dxhj就是根据这一理论进行组方。方中当归、川芎活血，祛瘀，通络，调节血管张力,天麻、钩藤平肝熄风定眩；半夏燥湿化痰、降逆止呕；橘红理气化痰。诸药合用共奏补虚固本、祛痰通络、益气活血定眩之功。故dxhj主要以上述4种药物成分为主有效调整中枢神经递质的合成,恢复脑干内单胺类神经递质的平衡,增加大脑供血供氧，降低血液黏度，血流动力学改变可使脑干内血流减少至功能阈值以下时即可出现vbi发作［15］ 。

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