作者：陈超君 尹小红，杜金子，李雁群 李良活，黄荣韶 

【摘要】  目的对广西不同产地石韦的总黄酮、总皂苷、多糖和蒽醌含量进行测定并进行聚类分析，为广西石韦资源的合理开发利用提供科学依据。方法总黄酮含量的测定采用nano2-al(no3)3-naoh体系吸光光度法;总皂苷含量的测定采用香草醛-高氯酸比色法;多糖含量的测定采用苯酚-硫酸比色法;蒽醌含量的测定采用醋酸镁-甲醇分光光度法。结果广西不同产地石韦的总黄酮、总皂苷、多糖和蒽醌含量有较大差异;聚类结果分为4类：ⅰ类包括大明山、富川县;ⅱ类包括藤县;ⅲ类包括桂平市、金秀县、资源县、那坡县;ⅳ类包括环江县。结论这8个地点石韦的活性成分存在较大差异。

【关键词】  石韦; 总黄酮; 总皂苷; 多糖; 蒽醌

石韦pyrrosia lingua (thumb.) farwell为水龙骨科(polypodiaceae)石韦属(pyrrosia)的多年生草本植物，叶为其主要药用部位，是我国常用中药，具有清肺泄热、解毒、利水通淋之功效[1]，用于治疗尿道炎、肾炎水肿、泌尿系统结石、肾盂肾炎、支气管炎、无名肿毒、颈淋巴结核、功能性子宫出血及白血球下降等[2]病症。其主要活性成分为黄酮类、总皂苷、多糖、蒽醌等化合物[3]。wWW.11665.coM广西石韦资源丰富，是石韦的重要分布区域。植物的次生代谢物的合成既受遗传因素的制约，同时也会受到环境条件的影响[4]，药材的质量与地域、生境等密切相关[5]。为考察广西不同产地石韦质量的差异，笔者对广西大明山、藤县、富川县、金秀县、环江县、资源县、桂平市、那坡县等8个产地的石韦总黄酮、总皂苷、多糖、蒽醌等活性成分的含量进行测定和对比分析，以期为石韦药材评价和该资源的合理开发利用提供科学依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 植物材料供试材料为石韦野生资源，于2008-04-15～05-26采自广西大明山、藤县、富川县、金秀县、环江县、资源县、桂平市、那坡县，经广西大学农学院植物与植物生理生化教研室鉴定为水龙骨科石韦属植物石韦，分别取其地上部分，置于恒温干燥箱中，105℃杀青30 min，60℃下烘干，取出粉碎，备用。

　　1.2 测定项目与方法测定不同产地石韦的总黄酮、总皂苷、多糖和蒽醌的含量。其中，总黄酮含量的测定采用nano2-al(no3)3-naoh体系吸光光度法[6];总皂苷含量的测定采用香草醛-高氯酸比色法[7];多糖含量的测定采用苯酚-硫酸比色法[8];蒽醌含量的测定采用醋酸镁-甲醇分光光度法[9]。

　　1.3 数据处理与分析数据的整理采用excel软件，差异的显著性分析采用spss软件中的duncan's新复极差测验法，聚类分析采用dps软件中的欧式距离和离差平方和法。

　　2 结果

　　2.1 不同产地石韦活性成分含量的比较及差异分析不同产地的石韦的总黄酮、总皂苷、多糖和蒽醌的含量并不相同(见表1)。其中不同地点总黄酮含量的高低顺序为藤县>富川县>大明山>金秀县>桂平市>资源县>那坡县>环江县，经检验可知各地石韦总黄酮含量的差异都达到了极显著水平;总皂苷含量的高低顺序为大明山>藤县>金秀县>富川县>桂平市>环江县>那坡县>资源县，除富川县和金秀县之间以及资源县和那坡县之间的总皂苷含量没有差异外，其它各地点总皂苷的含量差异都达到了极显著水平;多糖含量的高低顺序为环江县>大明山>桂平市>金秀县>资源县>富川县>藤县>那坡县，其中环江县和大明山之间的多糖含量没有差异，其它几个地点多糖含量差异都达到了极显著水平;蒽醌含量高低顺序为：资源县>桂平市=环江县>那坡县>富川县>大明山>金秀县>藤县，桂平市和环江县之间与富川县和那坡县之间没有差异，其它各点的蒽醌含量达到了极显著水平。表1 不同产地石韦总黄酮、总皂苷、多糖、蒽醌的含量　同一列数据后不同的小写字母表示差异达0.05显著水平，不同大写字母表示差异达0.01极显著水平;n=3

　　2.2 基于各活性成分含量不同产地石韦聚类分析由图1可以看出，在2.28距离水平上，可被聚为四大类，ⅰ类包括大明山、富川县，这一类的总皂苷含量最高，总黄酮含量居中，多糖含量居中，蒽醌的含量也是居中;ⅱ类包括藤县，这一类的总黄酮含量最高，总皂苷含量居中，多糖含量也是居中，蒽醌含量最低;ⅲ类包括桂平市、金秀县、资源县、那坡县，这一类的蒽醌含量最高，总皂苷含量居中，多糖含量居中，总黄酮含量居中;ⅳ类包括环江县，这一类的多糖含量最高，总皂苷含量最低，总黄酮含量最低，蒽醌含量居中。

　　图1 4种活性成分的不同产地石韦聚类图

　　3 讨论

　　黄酮、总皂苷、多糖[10]以及蒽醌是四类应用广泛的植物生物活性物质。黄酮类化合物具有降血脂抗血栓抗氧化降糖等多种生理活性[11]。据报道，黄酮类化合物中的苷类物质是石韦植物的特性成分[12];总皂苷类化合物对脑血管系统、神经系统、免疫功能、物质代谢、止血作用和抗凝血及造血系统有药理作用[13];多糖具有增强机体免疫力和抑制肿瘤作用[14];蒽醌类化合物具有消炎、降血压、影响消化道括约肌张力、抗菌抗病毒、镇咳及抗肿瘤等多种活性[15]。

　　上述测定结果表明，不同产地石韦的总黄酮、总皂苷、多糖以及蒽醌的含量存在较大差异，总黄酮的含量范围在1.080%～5.553%，其中藤县含量最高，环江县含量最低;总皂苷含量范围在0.090%～0.400%，其中大明山的含量最高，资源县的含量最低;多糖含量范围在1.550%～3.843%，其中环江县的含量最高，那坡县含量最低;蒽醌含量范围在0.231%～0.621%，其中资源县的最高，藤县的最低。没有同一产地的石韦同时含有较高的多种活性成分;不同产地同一活性成分含量差异较大，这可能与海拔、气候、土壤等生长环境有关,但是从东到西石韦的各种活性成分含量没有什么规律，可能是因为经纬度跨越较小，对其影响不大。石韦生长的小环境可能对其各种活性成分含量的影响更大。

　　本研究结果对于正确认识和评价广西石韦药材质量的优劣，明确优质产区，对今后开展规范、规模种植，深入地开发利用广西石韦资源具有一定的指导意义。但是被聚到一类的是否还与气候、土壤等环境因素有关，有待于更广泛细致的研究。

【参考文献】
  　　[1] 中国药典委员会. 中国药典，ⅰ部[s]. 北京: 化学化工出版社，2005：61.

　　[2] 中国医科院药物研究所. 中药志，第4册[m]. 北京: 人民卫生出版社, 1993.

　　[3] 江苏新医学院. 中药大辞典[m]. 上海：上海人民出版社, 1985.

　　[4] ma m,hong ch l,an sh q,et al. seasonal, spatial, and interspecific variation in quercetin in apocynum venetum and poacynum hendersonii, chinese traditional herbal teas[j].j agri food chem. 2003,51:2390.

　　[5] 刑俊波, 李 萍, 胡世林，等. 道地药材品质评价研究[j]. 中国野生植物资源,1999,18(6):44.

　　[6] 王自军, 杨红兵, 齐 誉，等.正交设计研究石韦总黄酮和鞣质提取工艺[j].时珍国医国药,2007，18(2):463.

　　[7] 黄荣韶, 罗永明, 胡 彦，等.毛鸡骨草总皂苷含量测定及其动态变化研究[j].广东农业科学, 2006，6: 28.

　　[8] 杨林莎, 李玉贤, 李明丽，等.苯酚-硫酸比色法测定百合多糖的含量[j].中国中医药信息杂志, 2004,11(8): 704.

　　[9] 周红燕, 陈建伟.紫外分光光度法测定炒决明子中总蒽醌含量[j]. 天津中医药,2007,24(2):156.

　　[10] 韩 慧, 张平平, 吴兆亮，等. 植物总皂苷、多糖和类黄酮的应用与开发[j].天津农学院学报, 2005, 12(3): 58.

　　[11] 韩公羽, 沈企华.植物药有效成分的研究与开发[m].杭州：杭州大学出版社,1991:94.

　　[12] 肖培根. 新编中药志[m].北京: 化学工业出版社, 2006.

　　[13] 浦湘瑜, 张荣平, 邹 澄，等. 不同产地三七总皂苷的含量研究[j].云南中医中药杂志, 2001,22(4):36.

　　[14] 王爱武, 袁久荣, 吴丽敏，等. 不同产地猫爪草中多糖含量的比较[j]. 中国中医药信息杂志,2005,12(1):51.

　　[15] 林瑞民, 李 磊, 陈华山，等. 不同品种不同产地大黄中五种蒽醌类化合物的hplc测定[j]. 中药材,2004,28(3):197.