作者：刘元，李星宇，宋志钊，韦焕英
【摘要】 目的观察广西沿海平颏海蛇和青环海蛇（1∶1）提取物的主要药效学作用。方法采用佐剂致大鼠关节炎、巴豆油致小鼠耳肿胀、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高及棉球致大鼠肉芽组织增生、醋酸致小鼠疼痛等模型，观察广西沿海平颏海蛇和青环海蛇（1∶1）提取物的药效学作用。结果广西沿海平颏海蛇和青环海蛇提取物能明显抑制佐剂致大鼠关节炎、亦能明显抑制巴豆油所致的小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高，对棉球致大鼠肉芽组织增生有明显抑制作用，并有显著的镇痛作用。结论广西沿海平颏海蛇和青环海蛇提取物具有抗风湿、抗炎、镇痛作用。
【关键词】 广西沿海平颏海蛇和青环海蛇（1∶1）提取物 佐剂性关节炎 抗炎 镇痛
abstract：objectiveto observe the pharmacological role of lapemis hardwickii and hydrophis cyanocinctus (1∶1)extract from guangxi.methodsthrough the models of the adjuvant-induced arthritis in rats, the croton oil-induced edema in ear ,acetic acid-induced increase of capillary vessel penetration in mice, the cotton_caused granulation tissue hyperplasia in rats, and mouse pain pattern caused by acetic acid, the pharmacological roles of lapemis hardwickii and hydrophis cyanocinctus (1∶1)extract from guangxi were observed.resultslapemis hardwickii and hydrophis cyanocinctus (1∶1)extract could significantly inhibit the adjuvant-induced arthritis in rats, the croton oil-induced edema in mice and acetic acid-induced increase of capillary vessel penetration in mice, and cotton_caused granulation tissue hyperplasia in rats. inaddition, it also had analgesic effect.conclusionthe lapemis hardwickii and hydrophis cyanocinctus extract has the pharmacological effect of anti-rheumatism, anti-inflammation and analgesia.
key words： lapemis hardwickii and hydrophis cyanocinctus (1:1)extract from guangxi; the adjuvant induced arthritis; anti-inflammation; analgesia
海蛇为爬行纲蛇目海蛇科的一类毒蛇，具有祛风除湿、舒筋活络等功效。wWW.11665.coM主要用于风寒湿痹，肢体麻木，腰膝酸痛［1］。我国目前已报道［2］的有9属15种，均可供药用，且功效相似。广西习用的有6种［3］，其中以平颏海蛇lapemis hardwikii（gray）、青环海蛇hydrophis cyanocinctus（daudin）为优势种［4］。虽然目前已投入市场的海蛇药物有复方海蛇酊、海蛇药酒等，日本也将海蛇 治疗 风湿性关节炎列入专例，但迄今未见关于海蛇治疗风湿性关节炎的药理详细研究报道。为了对海蛇药用价值作出评价，我们对广西沿海平颏海蛇和青环海蛇（1∶1）提取物（以下简称海蛇提取物）进行了药效学研究。现报道如下。
1 材料
1.1 动物nih小鼠，wistar大鼠，均由广西中医药研究所动物室提供。
1.2 药品和试剂 取广西沿海平颏海蛇和青环海蛇除去头和内脏的干燥体，按1∶1混合，用50％乙醇渗漉提取，蒸干溶剂即得，每克膏含总药材8g，由广西中医药研究所化学室提供。实验时用蒸馏水配制成所需浓度药液。阿司匹林，0.3g/片，批号：951130，西北第二合成药厂生产。 freund’s完全佐剂，sigma公司产品，批号：p1503。
2 方法与结果
2.1 对大鼠佐剂性关节炎的抑制作用 取体重170～190 g雄性大鼠40只，按体重均匀分为4组，每组10只，如表1。各组大鼠以freund's完全佐剂0.05 ml注射于右后足垫内，注射佐剂当日即开始灌胃给药，1次/d，阿司匹林0.2 g/kg，海蛇提取物4.5，1.5 g总药材/kg，对照组给等容积蒸馏水，连续21 d。停药后继续观察3 d，第24 天杀剖动物，称取胸腺、腺、肾上腺。注射佐剂前及后3 h以及间隔一定日期各测左右足趾周长1次，同侧足趾于给佐剂前后周长之差值为肿胀程度，并观察鼠耳部红斑，尾部结节等出现情况，每隔3 d，测体重1次。结果见表1。表1 海蛇提取物对大鼠佐剂性关节炎的影响(略)与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
结果表明，海蛇提取物大剂量既明显抑制注射局部的早期炎症反应和12 d后的再度肿胀，又明显抑制另侧后肢因迟发型超敏反应引起的足肿胀。无论是阿司匹林或海蛇提取物大鼠的耳部红斑及尾部结节等损害均比对照组明显减轻（实验结果略）。在整个观察期内，未见动物摄食量明显减少，体重增长正常，阿司匹林、海蛇提取物对大鼠的胸腺、脾、肾上腺等脏器系数亦无明显影响。
2.2 海蛇提取物对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响取18～20 g雄性小鼠40只，按体重平均分成4组，每鼠左耳涂2％巴豆油合剂0.05 ml致炎，致炎后分别灌胃给予阿司匹林0.2 g/kg，海蛇提取物4.5，1.5 g总药材/kg，对照组给等体积蒸馏水。给药后4 h，将小鼠拉断颈椎处死，用分析天平精确称取小鼠左右耳重量，以其差值作为炎性肿胀程度，并 计算 肿胀抑制百分率。结果见表2。表2 海蛇提取物对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响(略)与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；n=10
实验结果表明， 4.5，1.5 g总药材/kg海蛇提取物对巴豆油所致鼠耳急性炎症也均有显著抑制作用。
2.3 海蛇提取物对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响 取体重18～22 g小鼠40只，按体重平均分成4组，雌雄各半，分别灌胃给予阿司匹林0.2 g/kg，海蛇提取物4.5，1.5 g总药材/kg，对照组给等体积蒸馏水。药后40 min，各鼠静脉注射0.5％伊文总蓝生理盐水0.1 ml/10g，并立即腹腔注射0.6％的醋酸生理盐水溶液0.2 ml/只，20 min后迅速处死，每鼠腹腔用5 ml生理盐水多次冲洗，收集于试管，用生理盐水加至8 ml，混匀、离心，于590 mm处比色，直接用光密度进行组间t检验。结果见表3。表3 海蛇提取物对醋酸所致小鼠毛细血管透性的影响(略)与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；n=10
结果表明，4.5，1.5 g总药材/kg海蛇提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性增高均有明显的抑制作用。
2.4 海蛇提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响取200～250 g雄性大鼠40只，在乙醚浅麻醉无菌条件下，在大鼠两侧腹股沟皮下各植入20 mg无菌棉球1个，将大鼠按体重均匀分成4组，分别灌胃给予阿司匹林0.2 g/kg，海蛇提取物4.5，1.5 g总药材/kg，对照组给等体积蒸馏水，给药1次/d，连续7 d，第8天将大鼠断头处死，剥离取出棉球肉芽组织，于75℃烘箱内干燥1 h，分析天平称重，减去原棉球重量，即为肉芽组织净重。结果见表4。表4 海蛇提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响(略)与对照组比较，*p＜0.05；n=10
2.5 海蛇提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 取体重18～20 g小鼠40只，按体重均匀分成4组，雌雄各半，分别灌胃给予阿司匹林0.2g/kg，海蛇提取物4.5，1.5g总药材/kg，对照组给等体积蒸馏水，第1天上、下午各给药1次，第2天上午给药1次，共3次。第3次给药后30 min，各鼠分别腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，观察注射后30 min内出现的扭体反应次数，以及 计算 镇痛抑制率。结果见表5。表5 海蛇提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(略)与对照组比较，**p＜0.01；n=10
结果表明，海蛇提取物4.5，1.5 g总药材/kg对醋酸所致小鼠扭体反应均有明显的抑制作用。
3 讨论
大鼠佐剂性关节炎是一免疫性炎症模型，其特点是多发性关节炎，发病机制和病理与人类风湿性关节炎类似，对抗炎、免疫药物敏感，故常用于筛选和研究抗风湿性关节炎新药。但由于炎症过程极为复杂，人与动物对抗药物疗效和毒性反应又不尽相同，况且炎症与免疫是密切相关不可分割的过程。因此本实验首先通过用以血管通透性为主要改变的急性炎症模型，再用以肉芽组织增生为指标的慢性炎症模型及免疫性炎症模型来评定海蛇提取物的抗风湿性关节炎的疗效。实验结果表明，海蛇提取物有效对抗风湿性关节炎所表现的肿胀、疼痛、关节炎症及免疫亢进之功效显示在多环节、多方面作用上，既可明显抑制大鼠佐剂性关节炎的足趾肿胀、耳部红斑及尾部结节，又可明显抑制多种致炎剂所致炎症早期的毛细血管通透性增高、渗出和水肿，也能显著抑制炎症晚期的慢性肉芽肿的形成，并有明显的镇痛作用。因此，海蛇临床用于风湿性关节炎 治疗 有一定的药 理学 依据。
【 参考 文献 】
［1］广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准［s］.北京：
