【摘要】 目的：观察原发性肝癌根治术前后，igfii、vegf和il2、ifnγ的改变情况及其临床意义。方法：原发性肝癌患者67例，均进行了肝癌的根治术。于入院后1 d和手术后第7天抽血检测血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ，同时抽取正常人群血液标本20例进行对照。比较肝癌患者与正常人群以上指标的差异，并比较根治术对它们的影响。结果：( 1)肝癌组血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显增加，il2、ifnγ含量明显下降，与对照组比较有统计学意义(p<0.05)。(2)随肝癌患者临床分期增高，血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显增加，而il2、ifnγ含量明显下降，iia期组与iii期组比较有统计学意义(p<0.05)。(3)肝癌患者手术后血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显下降，il2、ifnγ含量明显上升，与对照组比较有统计学意义。结论：igfⅱ可直接或通过增加vegf的合成促进肿瘤血管形成，可作为原发性肝癌的诊断、判断愈后与跟踪随访的重要指标。监测与细胞免疫相关细胞因子的变化，可帮助有针对性地选择抗肿瘤和免疫调节药物，有利于肿瘤的治疗。
【关键词】 肝;癌;外科手术;细胞因子;血清胰岛素样生长因子ii;血管内皮细胞生长因子
[abstract] objective: to observe the changes of the insulinlike growth factorii(igfii), vascular endothelial cell growth factor (vegf), interleukin2 (il2) and immunoreactive fibronectin (ifnγ) and the clinical value in the the primary hepatic carcinoma patients with radical correction. methods: the serum levels of igfⅱ、vegf、il2、alpha fetoprotein(afp ) and ifnγ were detected in the 67 patients with primary hepatic carcinoma treated by radical correction.meanwhile, the same serum factors were detected in 20 health adults as control. compared the difference of the level between the patients with primary hepatic carcinoma and the health adults,and observed the influence of the radical correction on the serum factors above.results:the serum levels of igfⅱ,vegf and afp increased significantly in the patients with primary hepatic carcinoma group compared with the control group(p<0.05).while the serum levels of il2 and ifnγ decreased significantly in the patients with primary hepatic carcinoma group (p<0.05). the serum levels of igfⅱ,vegf and afp increased significantly in the late clinical stage patients with primary hepatic carcinoma compared with that in the early clinical stage,while the serum il2 and ifnγ level decreased significantly on the contrast.the difference between the iia and iii stage patient group was significant.after the liver radical correction,the serum levels of igfⅱ,vegf and afp decreased significantly,meanwhile,the serum levels of il2 and ifnγ increased significantly in the patients compared with that before operation(p<0.05).conclusion: igfⅱmight promot the neovascularization directly or increase the synthesis of vegf and can be the important factor of the diagnosis, prognosis and followup for the patient with primary hepatic carcinoma.monitoring the changes of the cell immunity related cell factors can help choosing the treatment and immunomodulating drugs for the tumor therapy.
[key words] liver; carcinoma; cytokin; insulinlikegrowth factorii(igfii); pascular endothelial cell growth factor (vegf); surgery
血清胰岛素样生长因子ii(insulinlikegrowth factorii，igfii) 是一种细胞增殖调控因子，它与人体正常胚胎发育、组织修复、细胞增殖分化等生理活动有关，而且是肿瘤自分泌生长因子，对肿瘤细胞的增殖分化起着重要作用，在肝细胞癌变过程中发挥重要作用[1]。WwW.11665.comvegf(血管内皮细胞生长因子)可促使实质肿瘤血管新生，在肝癌的生长及转移过程中扮演了重要的角色[2]。本研究观察两者在原发性肝癌患者中的改变，并比较根治术前、后的变化，结合与细胞免疫密切相关的il2(白介素2)和ifnγ(干扰素γ)，探讨igfii、vegf及细胞因子在原发性肝癌患者作用。
1 资料与方法
1.1 研究对象
原发性肝癌患者67例，其中男性45例，女性22例，年龄24.5～75.6岁，诊断符合2001年9月广州第八届全国肝癌会议修订诊断标准，其中ii a 19例，ii b 23例，iii 25例，均进行了肝癌的根治术。所有病例采血前无免疫制剂应用史，2周内无细菌和/或其他病毒感染史。同时抽取正常人群血液标本20例进行对照。
1.2 研究方法与观察指标
根据临床分期、患者的肝功能情况及病灶所在的部位进行肝癌根治术。所有患者均于入院后1 d和手术后第7天抽取清晨空腹不抗凝静脉血10 ml，分离血清，置80 ℃低温冰箱冻存集中检测;对照组取清晨空腹不抗凝静脉血10 ml集中检测。使用bachmark酶标仪，aurius紫外可见分光光度计;血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ检测：采用酶联免疫法(elisa)，试剂盒购自美国rb公司(rapidbio lab)和深圳晶美生物工程公司。同时接受肝功、甲胎蛋白(afp)的检测。实验操作严格按说明书由专人负责操作。
1.3 统计学处理
数据以均数±标准差(±s)表示。采用graphpad prism 4软件包行统计学处理，组间均数比较t检验。
2 结果
2.1 对照组与肝癌组血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ的比较
肝癌组血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显增加，il2、ifnγ含量明显下降，与对照组比较有统计学意义(p<0.05)。见表1。
2.2 肝癌患者血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ水平与肿瘤分期关系
根据肝癌患者临床分期研究其与血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ水平的关系，表明随肝癌患者临床分期增高，血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显增加，而il2、ifnγ含量明显下降，iia期组与iii期组比较有统计学意义(p<0.05)。见表2。
2.3 肝癌患者手术前、后血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ的比较
肝癌患者手术后血清igfⅱ、vegf、和afp含量明显下降，il2、ifnγ含量明显上升，与对照组比较有统计学意义(p<0.05)。见表3。表1 对照组与肝癌组血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ的比较注：对照组与肝癌组各项比较，均p<0.05表2 肝癌患者血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ水平与肿瘤分期的关系注：iia期与iii期各项比较，均p<0.05。表3 肝癌患者手术前、后血清igfⅱ、vegf、il2、afp和ifnγ的比较注：手术前、后各项比较，均p<0.05。
3 讨论
igfii主要由肝脏合成和分泌，肝细胞为其靶细胞之一，当肝细胞出现肿瘤性增殖时，igfii表达增高[1]。本研究发现，肝癌组血清igfii水平明显高于对照组(p<0.05)，并随着肿瘤分期与afp的增高其血清浓度明显升高。经手术根治性切除肿瘤后，血清igfii水平下降明显，说明肿瘤的存在是其增高的原因，并随肿瘤的治愈而下降，本研究还表明，igfii、afp与vegf的血清水平有一致性，以往研究表明，vegf是目前发现诱导肿瘤血管形成作用最强和最特异的生长因子，它可促使血管内皮细胞分裂增殖、增加血管的通透性，促进血管新生[3]，肝癌作为一种恶性实体肿瘤，vegf在其生长及转移过程中扮演了重要的角色。在肝硬化及肝细胞癌的发展过程中，由于门脉高压和肿瘤快速生长引起血供相对不足而导致的局部缺氧以及乙肝病毒感染等因素均可刺激vegf、igfⅱ大量表达，过量的igfⅱ可进一步刺激vegf合成，从而加速或扩大了肿瘤新生血管的形成。同时igfⅱ通过促进p38 有丝分裂原激活的蛋白激酶和p125局部黏附激酶的磷酸化激活以及基质金属蛋白酶2活性上调[4]，刺激内皮细胞移行和形态分化直接诱导肿瘤血管形成，igfⅱ可直接或通过增加vegf的合成促进肿瘤血管形成，是肿瘤进展的主要原因之一。据此我们认为，血清igfii可作为原发性肝癌的诊断、判断愈后与跟踪随访的重要指标。
il2、ifn γ是由免疫活性细胞分泌的细胞因子，具有正向调控细胞免疫功能，促进t细胞由th0向th1分化，抑制肿瘤生长的作用[5]。本研究发现，原发性肝癌患者血清il2，ifn γ水平较正常对照明显降低，而且随着病情进展血清水平降低更趋明显。经根治性切除肿瘤后，血清il2，ifn γ水平升高明显，说明肿瘤的存在是抑制其分泌的原因。原发性肝癌患者血清il2的降低，使由免疫细胞和细胞因子构成的免疫调节网络失衡，形成病理性恶性循环，有利于肿瘤的发生和发展。ifn γ产生不足，使ifn γ介导的抗肿瘤免疫功能受到损伤，有利于肿瘤细胞的免疫逃逸[6]。我们认为，原发性肝癌患者存在多种细胞因子异常，抗肿瘤免疫功能受到严重抑制，监测这些指标的变化，有针对性地选择抗肿瘤和免疫调节药物，对控制肿瘤的发展是非常有帮助的。
【参考文献】
1 范子荣,杨东华,覃汉荣.肝癌和癌旁组织中igfii的表达及突变分析[j].世界华人消化杂志,2000,8(6):704.
2 朱小生,马倩,操乐杰.肺癌患者血管内皮生长因子和内皮抑素水平变化及意义[j].实用临床医药杂志,2008,12(11):148.
3 takahashi r, tanaka s, kitadai y, et al. expression vascular endothelial growth factor and angiogenesis in gastrointestinal stromal tumor of the stomach[j]. oncology, 2003, 64(3): 266274.
4 lee 0h, bac sk, bae mh, et al. identification of angiogenic properties of insulinlike growth factor ii in in vitro angiogenesis models[j].br j cancer，2000，82(2):385391.
5 李杰,时昌文,曹莉莉,等. 原发性肝癌手术前后t细胞亚群及细胞因子测定的临床意义[j].山东医药,2007,47(3):4648.
6 周光炎.免疫学原理[m].上海:上海科学技术文献出版社,2000. 281285.
