【摘要】 目的：探讨慢性阻塞性肺疾病(copd)患者临床特征和雾化吸入激素治疗与白介素13(il13)变化的相关性。方法:采用elias分别检测64例copd急性加重期患者(其中30例患者吸入舒利迭1个月，50/250 μg剂型)、42例稳定期(其中20例患者吸入舒利迭1个月)和36健康正常人血浆il13浓度。结果:106例copd患者和36例健康人血浆il13(pg/ml)(58.35±3.28)和(25.03±3.22) 比较，差异有显著性(p<0.05)。急性加重期(64例)和稳定期(42例)copd患者血浆il13浓度(pg/ml)(67.13±3.12 )和( 39.27±4.02)比较，差异有显著性(p<0.05)。在64例急性加重期copd患者中，轻、中、重度、极重度者其血浆il13浓度(pg/ml)(51.25±2.38)、( 61.03±2.36)、(69.37±2.16)和(75.67±2.15)相互间比较，差异均有显著性(p<0.05)。copd急性加重期患者30例和稳定期20例，分别吸入舒利迭干粉激素治疗1月后，血浆il13浓度均较治疗前明显下降(66.33±3.22)和(29.35±3.24)，(38.97±1.02)和(26.08±1.25)，差异均有显著性(p<0.05)。结论：血浆il13参与copd的病理生理过程， 并可作为判断copd患者病变严重程度和观察治疗效果的指标。
【关键词】 肺疾病，阻塞性;白细胞介素13;激素类;投药，吸入
[abstract] objective: to discuss the relationship of clinical feature, hormone inhalation and plasma level of interleukin 13(il13) of chronic obstructive pulmonary disease (codp) patients. methods: selected 64 copd cases at acute exacerbation, including 30 cases treated with inhalation of salmeterol fluticasone propionate at 50/250 μg for a month, 42 cases at stable stage including 20 cases treated with inhalation of salmeterol fluticasone propionate, and 36 healthy cases. tested the concentration of il13 in plasm. results: the il13 concentration in plasma of 106 copd cases (58.35±3.28) (pg/ml) had significant difference from 36 healthy cases(25.03±3.22) (pg/ml) (p<0.05). the concentration of 64 copd cases at acute exacerbation (67.13±3.12) (pg/ml) had significant difference from 42 cases at stable stage (39.27±4.02 pg/ml) (p<0.05). the concentrations of light patients (51.25±2.38 pg/ml), of middle patients (61.03±2.36 pg/ml), severe patients (69.37±2.16 pg/ml) extreme severe patients (75.67±2.15 pg/ml) were significantly different (p<0.05). with 1 month therapy with inhalation of salmeterol fluticasone propionate, il13 concentration significantly decreased compared with the level before treatment in both acute exacerbation group[(66.33±3.22pg/ml) vs (29.35±3.24 pg/ml)] and stable group[(38.97±1.02pg/ml) vs (26.08±1.25 pg/ml)] conclusion: il13 participates in pathological and physiological process of copd, and is valuable index for judging severity of disease and therapeutic effect.
[key words] lung disease, obstructive; interleukin 13; hormone; administration; inhalation
慢性阻塞肺疾病(copd)以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征。WwW.11665.com许多研究发现，copd与多种炎症介质和细胞因子有关。il13与copd的关系已有大量报道，但il13对copd患者临床分期、分度和吸入激素疗效的影响，未见报道。本研究旨在了解copd患者血浆il13浓度变化，并探讨血浆il13浓度与copd患者的临床分期、分度和吸入激素治疗的关系，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择与分组
依据2002年8月中华医学会呼吸分会慢性阻塞性肺疾病诊治指南，确定选择copd的病例[1]。copd组：共106例copd患者，男性66例，女性40例，年龄34～82岁，平均(57.35±6.2)岁，病程平均(12.4±6.8)年。再分为：(1)copd急性加重期(64例)：咳嗽、咳痰和/或喘息在短期内加重，胸片见出现肺部感染者44例(69%)，伴发热者18例(28%);男性36例，女性28例，年龄38～82岁，平均(58.85±7.2)岁，病程平均(12.3±4.8)年;轻度10例，中度14例，重度10例，极重度10例。随机选取急性加重期患者30例给予舒利迭准纳器(沙美特罗50 μg+丙酸氟替卡松250 μg复方干粉吸入剂)12 h吸入1次，每次1吸(共计沙美特罗100 μg+丙酸氟替卡松500 μg/d)。(2)copd稳定期(42例)：咳嗽、咳痰、气促症状稳定或症状较轻，无发热，胸片未见感染灶;男性30例，女性12例，年龄34～80岁，平均(56.25±8.22)岁，病程平均(12.4±5.7)年。随机选取稳定期患者20例给予舒利迭准纳器(沙美特罗50μg+丙酸氟替卡松250μg复方干粉吸入剂)12 h吸入1次，每次1吸(共计沙美特罗100μg+丙酸氟替卡松500μg/d)。正常对照组(36例)：为健康体检者，其中男性22例，女性14例，平均年龄(56.43±6.88)岁。均经病史调查、胸部x线摄片、肺功能测定排除患有肺部疾病可能，无过敏性及变态反应性疾病，近1周内未使用过任何药物。两组研究对象在年龄、性别等方面无统计学差异。
1.2 标本采集
收集研究对象清晨外周血3 ml，以2%edta抗凝，1 500 rpm离心，留取血浆，并于70 ℃贮存使用。copd急性加重期患者30例患者在用舒利迭治疗前和治疗1个月后分别采血。
1.3 血浆il13的测定
血浆il13采用elis法检测，试剂盒购于amershan life science公司。检测过程按照试剂盒说明书操作。主要步骤：(1)酶标的生物素抗体;(2)加入酶的底物发生显色反应;(3)酶标仪450 nm读取吸光度;(4)通过标准品曲线计算样品的il13的含量。
1.4 统计学处理
两样本比较用t检验，多样本比较用f检验。均用spss11统计软件在计算机上完成。
2 结果
2.1 copd组与对照组血浆il13浓度的比较
106例copd患者和36例健康人血浆il13浓度(pg/ml)分别为(58.35±3.28)、(25.03±3.22)，两者比较，差异有显著性(p<0.05)。见表1。
2.2 copd患者分期、分度与血浆il13浓度的关系
64例copd急性加重期和42例copd稳定期患者血浆il13浓度比较，差异有显著性(p<0.05)。在64例急性加重期copd患者中，轻、中、重度、极重度者其血浆il13浓度相互间比较，差异有显著意义(p<0.05)。表1 copd患者分期、分度与血浆il13浓度的比较
2.3 copd患者吸入激素治疗前、后血浆il13浓度比较
copd患者经吸入舒利迭治疗1月后，加重期或稳定期copd患者血浆il13浓度较治疗前均明显下降，差异有显著性(p<0.05)。见表2。表2 copd患者吸入舒利迭干粉激素治疗前、后血浆il13浓度比较
3 讨论
在copd的发病过程中，炎症介质、气道高反应性,肺部的蛋白酶和抗蛋白酶失衡在copd发病中起重要作用[1]。白细胞介素13(il13)作为th2型细胞因子，与机体的炎症反应和免疫调节等过程有关，可能参与多种肺部疾病的发生发展过程。il13是一种抑炎性细胞因子，主要由活化t细胞、肥大细胞、嗜碱粒细胞和单核细胞产生，是重要的b细胞刺激因子，可诱导b细胞活化、分化，产生ig类别转换，合成ige参与1型超敏反应，促进嗜酸细胞与气道上皮黏附，导致慢性过敏性炎症反应[24]。zhu等应用il13基因过表达小鼠模型进行研究，发现大、小气道及肺实质周围炎性反应明显，大量嗜酸性粒细胞聚集和单核细胞浸润，黏膜上皮细胞、杯状细胞肥大、增生，黏液过度分泌，气道上皮下层纤维化、结晶沉积，气道阻塞，对乙酰甲胆碱激发试验呈气道高反应性[2]。动物实验也发现il13与copd有关，研究il13转基因成年鼠时发现，il13过表达可使鼠肺容积增大，黏液腺化生，黏液分泌增多，大小气道管壁及周围炎症反应，肺气肿形成，用mmp或半胱氨酸蛋白酶拮抗剂治疗后，肺气肿、炎症反应可显著减轻[5]。动物实验中il13不依赖il4而单独诱发气道高反应性，能直接作用于呼吸道结构细胞导致气道高反应性[6]。bowles等发现，在马的气道阻塞模型中，外周血il13水平升高[7]。本研究也发现，对比正常人，copd患者血浆中il13水平显著升高，尤其是copd加重期患者血浆il13水平更明显。说明il13在copd的发生发展中起重要作用，参与copd的病理生理过程。
目前认为il13参与copd发病的机理仍未十分清楚，可能与下列因素有关：(1)影响气道纤毛作用和分泌细胞的分泌。il13能改变气道纤毛细胞分化和增加分泌细胞的比例，下调肌动蛋白的结合蛋白和其他细胞骨架成分，使气道损伤和阻塞[4]。(2)刺激肺成纤维细胞增殖，参与气道重建。il13活性增高刺激肺成纤维细胞不同亚群，使其增生，数量增多，造成平滑肌基底膜增厚及玻璃样变,由此导致气道不可逆阻塞[2,8]。(3)刺激炎症细胞聚集和炎症介质的产生。il13可刺激支气管黏膜嗜酸性粒细胞的选择性募集，上调白三烯mrna和蛋白的产生，刺激气道上皮细胞细胞产生粒细胞集落刺激因子，使气道黏膜产生炎症反应[2,8,9]。
copd患者血浆il13浓度可能反映copd病情的严重程度。本资料显示，极重度copd与轻度copd比较，血浆il13浓度显著增高;加重期copd比稳定期copd血浆il13浓度也明显增高，差异有显著性，说明il13参与copd的炎症进展过程，检测血浆il13可作为临床判断copd患者病变严重程度和活动性指标之一。
舒利迭是糖皮质激素丙酸氟替卡松和长效β2受体激动剂沙美特罗的混合干粉吸入剂。氟替卡松通过与细胞内糖皮质激素的受体结合形成有活性的激素受体复合物，调控靶细胞基因的表达，抑制炎性细胞的活化及炎性因子的生成，具有很强的抗炎活性。而沙美特罗选择性地作用于气道内的β2肾上腺素能受体，而起扩张气道的作用，另有阻止平滑肌细胞增生，改善气管黏液纤毛功能，抑制炎性介质释放，抑制炎性细胞的聚集与活化的功能。本组资料显示，copd患者经舒利迭干粉激素吸入治疗后血浆il13浓度下降，与对照组比较，差异有显著性，说明糖皮质激素治疗copd可能与其减弱il13作用有关，吸入激素能抑制炎性细胞的活化及炎性因子的生成，从而抑制了il13的生成，导致血浆il13的浓度减少。il13也可能通过引起nfκb、活化蛋白1的过度表达，使糖皮质激素受体结合活性降低，因而造成细胞对激素产生的免疫抑制作用不敏感[10]。通过抑制il13的作用，可提高糖皮质激素受体的结合活性，增强激素治疗copd的作用。因此，临床上检测吸入舒利迭干粉激素前、后血浆il13的浓度，可进一步评价其治疗的效果。
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