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肺腺癌耐药细胞系A549/cDDP的建立及基因表达的检测

【摘要】    背景与目的 现有研究表明,肺癌细胞多药耐药造成的化疗失败是影响患者生存率的主要原因。本研究旨在建立人肺癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性和机制。方法 应用人肺腺癌细胞株a549,采用顺铂(cddp)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系a549/cddp。相差显微镜观察细胞形态和结构差异,绘制两种细胞的体外生长曲线。用mtt法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多耐药基因(mdr )的表达产物p糖蛋白(p-gp)、多药耐药相关蛋白(mrp)及谷胱甘肽硫转移系统(gsh/gst)的表达情况,应用rt-pcr检测mdr、mrp 基因表达水平。结果 a549/cddp对多种抗癌药物耐药,各种抗癌药物ic50显著提高:(70.5±4.9)%的a549/ddp细胞表面p-gp表达阳性,而对照细胞a549表达仅为(42.4±5.6)%;(29.4±2.9)%的a549/ddp细胞表面mrp表达阳性,而对照细胞a549表达仅为(21.4±3.5)%,二者有差异(t =11.94;t =5.56,p 均<0.01);a549/cddp和a549细胞的gsh/gst表达无明显变化(p >0.05)。rt-pcr检测发现a549/cddp中的mdr mrna及mrp mrna高表达。结论 建立的a549/cddp具有明确的多药耐药性,其多药耐药基因mdr mrna 及mrp mrna 表达升高。

【关键词】  肺肿瘤;多药耐药;基因表达

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  •  作者:11665 [标签: 腺癌 细胞系 的建立 基因表达 检测 ]
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