人肾透明细胞癌组织中增殖细胞核抗原表达与肾癌的关系
【关键词】 人肾透明细胞癌;增殖细胞核抗原
【摘要】 目的 通过检测人肾透明细胞癌组织中增殖细胞核抗原(pcna)表达的变化，研究其表达与肾癌的关系。方法 标本离体后分成肾透明细胞癌组、癌旁组织组、正常肾组织组，均用10%的甲醛固定48 h，常规石蜡包埋、切片5 μm，同时应用免疫组织化学方法进行观察研究。结果 pcna免疫组化染色：正常肾组织内的细胞核有弱阳性表达，癌旁阳性表达增加，高于正常肾组织，肾癌组织阳性表达明显增强， 明显高于癌旁组织，两两比较差异均有统计学意义(p<0.01)。肾癌4个期之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论 pcna在正常组、癌旁组、癌组织组的表达呈明显加强趋势，癌组织细胞增殖旺盛，是肿瘤形成的重要机制。
【关键词】 人肾透明细胞癌;增殖细胞核抗原
the expression of proliferating cell nuclear antigen (pcna ) in the human clear cell renal cell carcinoma zhang jianyong*, liang liang, dong xiaoju,et al.*department of urology,the second hospital of shijiazhuang,hebei,shijianzhuang 050051,china
【abstract】 objective to detect the expression of proliferating cell nuclear antigen (pcna ) in the human clear cell renal cell carcinoma(rccc) tissues in order to explore the correlations between the antigen expression and rccc.methods the samples were divided into three groups: rccc group, paracancerous tissue group and normal tissue group. all the samples were fixed in formalin for 48h, embedded in paraffin wax, sectioned to 5μm thick slice, and observed by immunohistochemical method. results pcna immunohistochemical staining showed that the expression of pcna was weakly positive in the nucleus of the normal renal tissue. the expression was slightly higher in paracancerous tissue than that in normal renal tissue. the expression was significantly increased in rccc tissue ,which was significantly higher than that in paracancerous tissue (p<0.01), but there were no significant differences among 4 stages (p>0.05). conclusion the expression of pcna in rccc tissue is higher than that in para-cancerous tissue, which is the lowest in normal renal tissue. it may be one of the important mechanisms in tumor formation.
【key words】 human renal clear cell carcinoma; proliferating cell nuclear antigen
细胞增殖与凋亡是肿瘤形成的重要理论基础，是组织正常生长，行使功能的两个基本要素。WWw.11665.CoM二者互相制约，处于动态平衡之中，组织细胞受损或增殖过度时，通过凋亡清除受损及异常过多的细胞，防止组织进一步损伤，而凋亡或其他原因丢失的死亡细胞则由增殖来补充，以保持正常的细胞数目及体积。这些精细调节的失衡会导致疾病的发生[1]。组织细胞凋亡减少增殖过度就会导致肿瘤的发生，细胞增殖的研究是肿瘤形成探讨的重要方面。
1 材料与方法
1.1 材料 标本均来自2006年1月至2008年1月石家庄市第二医院和解放军260医院泌尿外科，其中肾透明细胞癌30例(ⅰ期7例,ⅱ期10例,ⅲ期8例,ⅳ期5例)、癌旁组织(距肿瘤组织边缘2.0 cm以上[2])30例(ⅰ期7例,ⅱ期10例,ⅲ期8例,ⅳ期5例)、意外伤亡正常肾组织10例(癌旁肾组织，和肾透明细胞癌取自同一患者)。肾透明细胞癌及癌旁组织标本来源的患者60例，男40例，女20例;年龄52～78岁，平均年龄64岁。正常肾组织标本来源的意外伤害者7例，男5例，女2例;年龄19～48岁，平均年龄35岁。
1.2 方法 标本离体后分成肾癌组织组、癌旁组织组、正常肾组织组，每组8例，均用10%的甲醛固定48 h，石蜡包埋5 μm切片，同时应用免疫组织化学(immunohistochemistry)方法观察细胞增殖标记物增殖细胞核抗原(pcna)的表达变化，探讨pcna的表达与肾癌的关系。所有标本均在motic med 6.0数码医学图像分析系统内在相同的放大倍数(400)下，每个组计数30个视野中的总细胞数和阳性细胞数，计算增殖细胞的百分比，作为增殖指数(proliferation indx，pi)。
1.3 肿瘤分期标准 ⅰ期:肿瘤局限在肾包膜内。ⅱ期:肿瘤穿破肾包膜侵犯肾周围脂肪组织，但局限在肾周围筋膜以内。ⅲ期:肿瘤侵及区域淋巴结，或(和)肾静脉、腔静脉。ⅳ期:肿瘤侵犯附近器官或远处转移。
1.4 统计学分析 计量资料以±s表示，采用t检验，p<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
pcna免疫组化染色: 正常肾组织内的细胞核有弱阳性表达，细胞核内有弱棕黄色颗粒颜色，癌旁阳性表达轻度增加，细胞核内的棕黄色颗粒颜色高于正常肾组织，肾癌组织阳性表达明显增多，细胞核内棕黄色颗粒颜色明显加深, 明显高于癌旁组织(图1～3)，正常肾组织组与肾癌组、癌旁组，差异均有统计学意义(p<0.01)。见表1。肾癌4个期之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。 表1 pcna在肾癌组织、癌旁组织和正常肾组织表达比较注：与对照组比较，*p<0.01
3 讨论
pcna是dna聚合酶δ的辅助蛋白，其合成明显与细胞周期有关：静止期细胞内含量很少，g1晚期开始大幅度增加，s期达到高峰，g2m期明显下降，其量的变化与dna合成一致[3]。pcna是反应细胞增殖分数和所处周期的客观指标[4]。目前也是肾癌标记物热点研究之一[5]。
肾癌细胞的生物学行为与癌细胞的增殖活性密切相关，pcna是一种仅在增殖状态细胞内出现的非组蛋白型核蛋白。pcna的表达越高说明dna复制活跃程度增加，它是反映细胞增生的一项重要指标。我们的实验显示：pcna在正常肾组织、癌旁组织和肾癌组织中阳性表达不同，3组两两比较差异有统计学意义，说明pcna在肾透明细胞癌发生过程中起着重要作用，并且可以作为肾透明细胞癌诊断的一种参考指标。另外pcna的活跃程度也反映了肾透明细胞癌的发生状态。
关于pcna在肾透明细胞癌不同分期表达差异性的研究，目前还不完全一致，多数认为pcna表达显著相关于高分期[6]，但少数研究结果认为pcna表达与分期无相关关系[7]，我们的数据显示pcna在正常肾组织、癌旁组织及肾癌组织之间差异有统计学意义(p<0.05)，而在肾癌组织4个分期之间差异无统计学意义(p>0.05)。
实验表明，肾癌组织pcna表达增加，癌旁组织轻度增加，正常肾组织也有一定表达，但明显少于肾癌组织，表明增殖过度可能导致肾癌病变的发生。
【参考文献】
1 王亦兴，朱芳高，王立富.肾癌术前化疗性栓塞疗效评价.河北医药，2008，30：18791880.
2 柯莽，周涛，王天济，等.应用组织片在研究人肾癌中survivin、egfr和pcna的表达与预后的关系.浙江临床医学，2007，9：15901592.
3 陈学军,高剑波,周志刚，等.螺旋ct征象与增殖细胞核抗原表达间关系.医药论坛杂志，2007，28：79.
4 莫蕾，王海林，李勇，等.早期肾癌msct灌注成像与vegf、pcna表达关系的研究.广州医药,2007，38：1315.
5 汤中林，李如昌，陈刚，等.cd44v6和pcna在肾透明细胞癌的表达及其预后价值.现代泌尿外科杂志，2004，9:1214.
6 吴剑平，陈明，孙则禹.肾癌组织中cd40/p53/pcna表达的研究.广西医学，2008，30：12981299.
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