【摘要】  目的对芩连术苓散进行小鼠灌胃的急性毒性实验，观察其安全性，为临床研究提供依据。方法以芩连术苓散最大浓度、最大体积对小鼠灌胃，测定其一日最大给药量。结果小鼠一日最大给药量为2.08g，相当于成人临床日用量的130倍。结论芩连术苓散较为安全，可供临床研究试用。

【关键词】  芩连术苓散; 急性毒性; 小鼠; 实验研究

　乳婴腹泻是一种常见的慢性病症，若不及时控制，则可能导致患儿发育障碍，卫生部已将其列为儿科重要“四防病”之一。其中湿热型最为常见，且病程绵长迁延，治疗困难。本课题组根据临床经验，提出“婴病调母法”，以黄芩、黄连等为主药组成“芩连术苓散”治疗本病，取得满意疗效[1]。本实验通过对小鼠灌胃给药，观察芩连术苓散的急性毒性，评价其安全性，为临床研究提供依据。

　　1 材料

　　1.1 药物芩连术苓散(批号20051022)由张仲景国医学院中药研究所提供，20 g/袋，每日临床推荐用量为40 g。实验前将本品配制成可供小鼠灌胃的最大浓度混悬液，每毫升相当于1.3 g生药。

　　1.2 动物km小鼠，一级，7周龄，体质量18～22 g，♀♂各半。南阳实验动物养殖场提供。

　　2 方法和结果

　　2.1 预实验[2] 在进行正式实验之前，我们首先做了预实验，以便为正式实验提供依据。wWw.11665.cOM

　　小鼠12只，随机分为2组，♀♂各半。

　　给药组：以本品可供灌胃的最大浓度(1.3 g生药/ml)、小鼠灌胃可承受的最大体积(0.8 ml/20 g体重)，做一次灌胃给药。灌胃前禁食不禁水14 h，给药后常规饲养，观察3 d。

　　对照组：灌胃等量饮用水，余同给药组。

　　结果：小鼠全部存活，灌胃给药无法测出本品的半数致死量(ld50)，提示该药是安全的。

　　2.2 正式实验一日最大给药量测定[3]。

　　小鼠40只，随机分为2组，♀♂各半。

　　给药组：以本品可供小鼠灌胃的最大浓度(1.3 g生药/ml)，一次灌胃0.8 ml/20 g体重，连续2次，间隔6 h。灌胃前禁食不禁水14 h，间隔期间不供食，给药后常规饲养，观察7 d。

　　对照组：灌胃等量饮用水，余同给药组。

　　结果：① 给药前和给药后的第1，3，5，7天，分别测小鼠食量和体质量，数据以 ±s表示，进行paired-samples t test，用miscrosoft excel 2003和spss 10.0处理，结果见表1～2;② 观察给药后小鼠的外表行动，反射活动，饮水量，大、小便情况，结果见表3。

　　3 结论和讨论

　　实验结果表明，芩连术苓散急性毒性很小，通过灌胃给药无法测出ld50。其一日最大给药量为2.08 g生药，折合成人(50 kg)推荐临床日用量为130倍。一般认为[4]，按体重计算，小鼠1d最大给药量相当于临床日用量的100倍以上则较为安全，可以提供临床研究试用。

　　根据国家药品监督管理局1999年《中药新药药理毒理研究的技术要求》的有关规定，以及毒理学研究的一般原则[4]，单次给药量大于20 g生药/kg体重而实验动物不出现死亡者，可以认为该药是安全的。本次进行的实验证实，该制剂的最大耐受量大于104 g生药/kg体重，从而证明该制剂属于较安全的制剂。表1 芩连术苓散急性毒性实验小鼠体重变化(±s)表2 芩连术苓散急性毒性实验小鼠摄食量变化(±s)表3 芩连术苓散1d最大给药量实验小鼠反应情况

　　“- ”表示正常;“* ”表示在灌胃后的2 d内，精神萎靡，活动减少;“△”表示在灌胃后的2 d内，粪便褐色溏薄不成形

　　实验观察发现，小鼠灌胃后在食量、增重、粪便及精神状态方面，给药组与对照组相比，有一定的异常。灌胃后，给药组体重增加比对照组略少，但不明显(p>0.05)。3 d内，给药组食量明显减少(p<0.01);至第5天，食量渐趋正常(p<0.05);7 d后，食量恢复正常。我们分析原因，除满负荷灌胃操作刺激外，药物本身也会在短时间内影响小鼠食欲。

【参考文献】
  　[1] 李书香.婴病调母法治疗乳婴慢性消化性腹泻疗效观察[j].辽宁中医杂志，2006，33(8):979 .

　　[2] 王北婴，李仪奎.中药新药研制开发技术与方法，第1版[m].上海：上海科学技术出版社，2001:788.

　　[3] 国家药品监督管理局.中药新药研究的技术要求[s].1999：16.

　　[4] 谢秀琼.中药新制剂开发与应用，第2版[m].北京：人民卫生出版社，2000:540.