作者：霍仕霞，闫明，张兰兰，刘晓东
【摘要】 目的通过测定驱白巴布期中与白癜风相关的微量元素含量，分析该药中微量元素分布与组方原理之间的关系。方法采用hno3-h2o2高压消解罐法消化处理样品，用电感耦合等离子体发射光谱法（icp-aes）同时测定cu，zn，fe，ca，mg，mn，sr，co等8种微量元素，原子荧光法（afs）测定se元素。结果两种方法的rsd(n=5)在0.65%～3.18%内，元素回收率在90.52%～103.56%之间，测定结果较理想。结论icp-aes法和afs法测定微量元素方法简便，快速准确，适于分析测定药材中的微量元素，结果发现驱白巴布期中的微量元素含量与其组方原理有很大相关性，为今后进行基础研究及进一步开发提供信息。
【关键词】 驱白巴布期； 微量元素； 组方原理
abstract：objectiveto determine the relationship between the distribution of trace elements in qubaibabuqi and the principle of composition by analyzing the contents of trace elements in qubaibabuqi which is concerned with vitiligo.methodscu,zn,fe,ca,mg,mn,sr,co were determined by inductively coupled plasm atomic emission spectrum(icp-aes) simultaneously after hno3-h2o2 digestion, se was determined by atomic fluorescence(afs).resultsthe rsd (n=9) was 0.65%～3.18% ,while the recovery of the method for every trace element were 90.52%～103.56%,the result was satisfactory.conclusionthe two methods are brief, rapid and accurate and can be used to analyze and measure the trace elements of medical material.the trace element content in five medical materials has concerned with the principle of composition extrordinary，this provid foundation and information for elementary investigation and penetrating exploitation in the future.
key words：qubaibabuqi; trace elements; principle of composition
维药驱白巴布期片［1］，由补骨脂、驱虫斑鸠菊、高良姜、白花丹、盒果藤5味药材组成，维吾尔医认为此方主要为清除异常粘液质，促进皮肤着色之剂，可用于治疗异常粘液质所引起的白癜风，方中补骨脂、驱虫斑鸠菊为主药，二者清除皮肤过盛或淤滞的异常粘液质，促进色素沉着，恢复皮肤颜色；高良姜、盒果藤燥湿祛寒，温胃消食，开通阻滞，作为辅助药；白花丹赤肤发泡，增加色素，散气止痛，祛风止痒，除腐生辉，作为调节药。www.11665.Com目前，现代医药学理论未见对此药组方原理进行解释。本文采用icp-aes法和afs法分别对组成驱白巴布期的5味药材中微量元素进行测定［2］，从微量元素角度阐述组方原理。
1 仪器与试药
1.1 仪器icpq-1000型电感耦合等离子体发射光谱仪（日本岛津公司），af-640型原子荧光分光光度计（北京瑞利公司），高压消解罐(上海冶金研究院)，ae163型电子天平（梅特勒公司），eg35a型电热板（北京永光明）。
1.2 试药补骨脂、驱虫斑鸠菊、高良姜、白花丹、盒果藤，购于新疆维吾尔医医院药房，经新疆维吾尔自治区张彦福研究员鉴定均为正品；茶叶标准物质（gbw07605）、标准储备液：cu，zn，fe，ca，mg，mn，sr，co的标准液为1 000 μg·ml-1 ,se标准液100 μg·ml-1，均购自国家标准物质研究中心。nabh4，k3fe（cn）4 均为分析纯；hcl,hno3,naoh,h2o2均为优级纯，实验用水为二次去离子水。
2 方法与结果［3～5］
2.1 仪器工作条件icpq-1000型电感耦合等离子体发射光谱仪，入射功率1.2 kw，反射功率< 5 kw，辅助气流量1.2 l·min-1，冷却气流量11 l·min-1，光栅刻线1920 条·mm-1，观察高度负载线圈上15 cm，积分时间20 s；af-640型原子荧光分光光度计，pmt电压270 v，采样泵速100 r·min-1，载气流量600 ml·min-1，辅助气流量200 ml·min-1，原子化器温度200 ℃，原子化方式火焰法，采样时间8 s，注入泵速100 r·min-1，注入时间22 s，读数时间17.0 s，延时时间2.0 s。
2.2 标准溶液的制备
2.2.1 icp-aes法混合标准液icpq-aes法中采用仪器设定的混合标准系列溶液， mn,sr为10 μg·ml-1； cu,zn为10 μg·ml-1, ca，mg为200 μg·ml-1,20 μg·ml-1,fe元素浓度为100 μg·ml-1。
2.2.2 se单标系列溶液配制将se标准溶液（100 μg·ml-1）用10%盐酸溶液分别稀释成1.0，2.0，4.0，8.0，16.0，20.0 μg·ml-1的标准工作液，在选定的仪器操作条件下进行测试，得线性方程为y= 0.016x+0.247 4;相关系数r=0.999 1，表明se元素浓度范围在1.0～20.0 μg·ml-1内，线性关系良好。
2.3 样品处理
2.3.1 icp-aes法测定样品处理将补骨脂等5味药材，自来水洗净，再用去离子水冲洗3遍，置于100 ℃烘箱中干燥，粉碎过80目筛，分别精密称定各药材样品0.5 g，置于高压消解罐中，加消解液8.00 ml(hno3∶h2o2 = 3∶1),置于烘箱中150 ℃加热消化，1 h后取出消化罐冷却，将消化罐中的溶液全部转移至25ml比色管中，去离子水定容至刻度，平行3份，同时做空白试验。
2.3.2 原子荧光法测定样品处理精密称定补骨脂等5味药材粉末（过80目筛）0.5 g，置于高脚烧杯中，加10.0 ml混合酸（硝酸∶高氯酸=1∶1），盖上表面皿，冷浸过夜，次日于电热板上，200 ℃下加热处理，并及时补加混酸，当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积2 ml左右，切不可蒸干。冷却，再加6 mol·l-1盐酸5 ml，继续加热至溶液变为无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。冷却，转移定容至50 ml容量瓶中，平行3份同时做空白试验。
2.4 分析波长选择及检测限实验中，通过icp光谱仪的同步校正功能对每个测定元素选取3条谱线进行测定，综合分析强度、干扰情况及稳定性，选择谱线干扰少，精密度好的分析线作为最佳分析波长，在最佳分析波长下，对空白溶液连续测定11次，取3倍标准偏差所对应的浓度为各元素的检出限，结果cu，zn，fe，ca，mg，mn，sr，se各元素的检测波长及检测限分别为324.8 nm，0.006 0 μg·l-1；213.8 nm，0.006 0 μg·l-1；248.3 nm，0.004 0 μg·l-1；422.7 nm，0.001 2μg·l-1；285.2 nm，0.008 1 μg·l-1；280.1 nm，0.002 4 μg·l-1；460.7 nm，0.002 0 μg·l-1；196.026 nm，0.046 5 μg·l-1。
2.5 测定结果根据“2.1”项中确定的最佳仪器工作条件，icp-aes法同时测定样品中cu，zn，fe，ca，mg，mn，sr，co元素，afs法测定se元素。结果见表1。表1 各药材中微量元素的测定结果（略）
2.6 加标回收实验根据测得的各元素含量数据结果，对方法进行回收率考察，以白花丹药材为例，精密称定9份白花丹粉末0.5 g，每3份1组，分别加入高、中、低3个浓度的标准液，按“2.3”项下处理样品，采用最佳实验条件，进行回收率实验。结果见表2。表2 回收率实验结果（略）
2.7 质量控制为了进一步考察实验方法的准确度，本实验采用国家标准物质茶叶（gbw07605）样品进行测定，平行测定3次。结果见表3。表3 测定值与标准值（略）
3 结论
本研究采用高压消解罐处理样品，hno3-h2o2消化液体系，通过高温加压能快速有效地将样品消化，既节省时间，又避免使用高氯酸消解样品可能带来的危险，同时克服了传统的湿法消解和干灰化法造成的空白值增高及待测元素损失的缺点，是植物样品前处理的理想方法。
采用icp-aes法对白花丹中的cu，zn，fe，ca，mg，mn，sr，co 8种元素同时进行测定，精密度及回收率都很好，且质控样品的测定结果均在规定范围内，满足微量分析的要求，icp-1000型电感耦合等离子发射光谱仪线性范围较宽，避免了样品稀释所带来的误差，适用于常量及微量元素的同时测定。
目前测定硒元素大多采用2,3-二氨基萘荧光法及紫外分光光度法，不仅操作繁琐，而且引入很多有机试剂及毒性物质，本文采用原子荧光法，简便快速，灵敏度高，其中样品处理是关键，试验中样品处理方法参考国标食品中硒元素的测定（gb/t5009.93-2003），其原理是样品经酸加热消化后，在6 mol·l-1盐酸介质中将样品中的六价硒还原成四价硒，用硼氰化钾作还原剂，将四价硒还原成硒化氢，由载气代入原子化器中进行原子化，进行测定；测定时，因其他金属离子的存在会对测定结果有干扰，故加入铁氰化钾溶液可掩蔽金属离子，消除干扰，增强荧光的强度，提高测定结果的准确性。
本实验结合文献报道，主要针对与白癜风相关的9种微量元素进行测定，建立了各元素在5种药材中的分布图，由元素测定结果，可以看出cu，zn，fe元素主要分布在补骨脂、驱虫斑鸠菊两位药材中，ca，mg主要分布在驱虫斑鸠菊中，mn元素分布在高良姜中，sr元素主要分布在盒果藤中，驱虫斑鸠菊次之，而白花丹中则含有非常丰富的se元素，5味药材中co元素均未被检出，不做讨论。长期以来，对中药药效的物质基础研究主要偏重于对其有机成分的分析，忽视了微量元素在中药药效中的作用，近年来国内外学者提出中药发挥作用的物质基础有可能是有机成分，也有可能是其中的微量元素，还有可能是有机成分和微量元素组成的配位化合物，故在研究复方药物组方原理时，不能单从有机成分考虑，与疾病相关微量元素也值得我们研究，本实验以驱白巴布期为研究对象，由结果可以看出与白癜风相关的几种微量元素在每个药材中均有不同程度的分布，处方中重用补骨脂、驱虫斑鸠菊，二者均含有大量cu，zn元素，cu，zn元素直接参与酪氨酸酶合成，与白癜风发病相关性最大，se元素参与谷胱甘肽过氧化酶（gsh-px）的组成，它可分解体内脂质过氧化物及过氧化氢，清除自由基，间接与白癜风发病有关，故起到调节作用，mn元素为公认的抗癌元素，由较强的清除自由基的作用，而sr元素能促进骨骼发育生长, 维持正常生理功能, 防止心血管疾病, 可使白发转黑，考虑锶元素可能参与黑素的合成与转运，二者分别大量分布于高良姜与盒果藤中起到辅助治疗的作用，fe，ca，mg均为人体内的常量元素，在人体内具有重要的生理生化功能，参与酶的构成，构成体内重要的载体及电子传递，参与激素和维生素的合成及相关细胞的分化和基因表达，影响内分泌系统调控水平, 维持机体正常的生理功能［6］；通过以上分析，可以发现该药组方原理与微量元素的分布有很大相关性，关于微量元素在体内的作用形态及作用原理还有待于进一步研究，本实验中未对驱白巴布期中有机成分进行测定，在今后的研究中有望将微量元素与有机成分结合共同探讨该药治疗白癜风的作用机理及组方原理，也希望借鉴此方法应用于其他中药维药古方验方的研究开发，推动中药、维药现代化、科技化，使之最终走向世界。
【参考文献】
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