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气相色谱质谱联用法测定走马胎挥发油成分

               作者:李群芳,娄方明,段兴丽,华德洪,陈桂花

【摘要】  目的研究走马胎挥发油的化学成分,为走马胎的开发利用提供理论依据。方法运用水蒸气蒸馏法提取挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术( gc- ms) 对挥发油成分进行分离鉴定,并采用面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果共鉴定出22个化学成分, 占挥发油总量的99.769%,其中黄樟素的相对含量高达94.070%,是其主要成分。结论该法简便、快速、灵敏度高,分离度好,是分析走马胎挥发油成分的有效手段。

【关键词】  走马胎; 挥发油; 气相色谱-质谱

走马胎又名走马藤、大叶紫金牛,为紫金牛科紫金牛属植物走马胎a rdisia  gigantif olia stapf 的干燥根茎,是我国西南地区较为常见的草药, 主要分布于广西、广东、江西、福建等地[1],贵州有产。本品味辛,性温,具有祛风湿、壮筋骨、活血祛瘀的功效,用于风湿筋骨疼痛、跌打损伤、产后血瘀、痈疽溃疡等症,为民间常用的跌打伤科药[2];对半身不遂、小儿麻痹后遗症有良效[3];治疗风湿类关节炎也取得较好效果[4]。紫金牛属植物具有皂苷、苯酚、苯醌、香豆素等多种成分[5],杨竹等[6]从走马胎中分离得到多个三萜皂苷类及岩白菜素衍生物类, 但对其挥发性成分的组成研究还未见报道。www.11665.CoM走马胎味辛,香气浓厚,挥发油含量很高,是治疗疾病的重要成分之一,本工作对贵州产走马胎的挥发油成分进行了gc-ms 分离和鉴定,为更好地利用走马胎这一特色植物资源提供科学依据。

  1  器材

  1.1  仪器agilent 6890-5973n气相色谱-质谱联用仪(美国安捷仑公司); 挥发油提取器(根据《中国药典》规定制造)。

  1.2  试剂无水硫酸钠(na2 so4 )、乙醚、正己烷均为分析纯。

  1.3  材料走马胎于2009 04购自贵州遵义万里路中药材市场,经遵义医学院杨建文副主任药师鉴定为走马胎a rdisia gigantifolia stapf。

  2  方法

  2.1  挥发油提取取走马胎根茎部分,在阴凉处风干,粉碎。取100 g粉碎后的样品于500 ml 圆底烧瓶中,加入300 ml 去离子水,参照2005版《中国药典》ⅰ部附录xd对挥发油进行提取,提取时间4 h,收集到淡黄色挥发油1.2 ml。挥发油经10 ml无水乙醚萃取、无水na2 so4干燥,然后置于表面皿中在常温下将乙醚挥干,20 ml正己烷溶解样品,转入具塞试剂瓶中,待测。样品进样前采用0.45 μm微孔滤膜过滤。

  2.2  gc-ms 分析条件

  2.2.1  色谱条件hp-5m s(5%苯取代甲基硅酮)色谱柱( 30 m×0.25 mm ×0. 25 μm);程序升温:40℃保持5 min ,以5℃·min - 1升至60℃,然后以3℃·min - 1 升至230℃保持10 min;气化室温度260℃;载气:高纯 he,流速1 ml ·min-1;进样量1 μl;分流比20∶1。

  2.2.2  质谱条件接口温度230℃;四极杆温度150℃;电离方式:ei,电子能量70 ev;溶剂延迟4 min;质量扫描范围m/ z 30~500。

  3  结果
    
  用气相色谱法分离并经质谱扫描后共检出32个色谱峰及对应的质谱, 得到的总离子流图见图1。利用美国wiley7nist05、nist05两种质谱数据库的质谱数据进行计算机检索, 用色谱峰面积归一化法计算各组分的相对百分含量,结果共鉴定22个成分,结果见表1。表1  走马胎挥发油成分的gc-ms 分析结果(略)

  4  讨论
    
  从检定的结果看,可检出的化合物含量占挥发油总量的99.769%。其中, 黄樟脑的相对含量高达94.070%,是其主要成分,其他含量相对较高的成分有:萜烷(1.225%)、β-葑醇(1.055%)、甲基丁香酚(0.898%)。未检出的化合物中未见含量较高成分。从检出化合物的结构分析,主要为单萜、倍半萜类化合物。萜类化合物是很多中药的活性成分之一,在走马胎挥发油中,主要成分黄樟素(94.070%)是常用香料, 但有研究表明, 黄樟素易诱发基因突变和肝损伤, 甚至肝癌[7],因此被禁止作为食品添加剂。通过对走马胎挥发油有效成分的分析鉴定及含量测定, 对综合开发、合理利用走马胎药用资源提供了科学的依据。

【参考文献】
   [1]江苏新医学院. 中药大辞典[m].上海:上海科学技术出版社,2001:2213.

  [2]卢文杰,王雪芬,陈家源,等.大叶紫金牛化学成分的研究[j].华西药学杂志, 1990 ,5 (3) :136.

  [3]杜泽乡. 走马胎及其两种混伪品饮片的鉴别[j].中药材,1995,18 (4) :183.

  [4]唐亚平.中药走马胎治疗类风湿关节炎的临床观察[j].四川中医,2007,25(1) :54.

  [5]靳志娟.紫金牛属植物化学成分和药理作用的研究进展[j].实用医技杂志,2008,15(25):3432.

  [6]杨竹,黄敬辉,王乃利.走马胎中新的岩白菜素衍生物的提取分离及体外抗氧化活性测定[j].沈阳药科大学学报,2008,25 (1 ):30.

  [7]章瑜, 陈跃进.黄樟油的毒性研究[j].苏州医学院学报,1995,15( 2):241.

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