作者：余红玲,顾雪英,何行厉
【摘要】 目的 考察注射用加替沙星和维生素b6在5%葡萄糖注射液中的稳定性。方法 采用高效液相色谱法测定注射用加替沙星与维生素b6配伍后在25 ℃下6 h内的含量变化，并观察和检测配伍液的外观及ph变化。结果 配伍液外观性状无变化，ph基本不变，加替沙星与维生素b6的相对百分含量在95%以上。结论 加替沙星和维生素b6在5%葡萄糖注射液中在6 h内配伍稳定。
【关键词】 加替沙星;维生素b6;配伍;稳定性;高效液相色谱法
abstract:objective to study the compatible stability of gatifloxacin for injection with vitamin b6 injection in 5% glucose injection. methods the content of the mixture of gatifloxacin for injection with vitamin b6 injection in 5%glucose injection within 6 hours at 25 ℃ was determined by hplc,and the appearance of the mixture was observed and its ph value was determined. results the appearance of the mixture showed no change,and no significant change in ph value was observed,the relative content of gatifloxacin and vitamin b6 was higher than 95%. conclusion the mixture of gatifloxacin for injection with vitamin b6 injection was stable in 5%glucose injection within 6 hours.
key words:gatifloxacin; vitamin b6; compatible stability; hplc
加替沙星是新一代的氟喹诺酮类药物，具有抗菌谱广、抗菌活性强的特点， 常用于敏感菌或其他病原微生物所致的呼吸道、胃肠道、泌尿道感染，为避免经常出现的胃肠道副作用，临床上习惯与维生素b6配伍。wwW.11665.coM本试验 参考 文献 [1,2]，应用高效液相色谱法考察25 ℃时加替沙星与维生素b6在5%葡萄糖注射液中的配伍稳定性，旨在为临床合理用药提供参考。
1 材料与仪器
hplc仪：waters 510高效液相色谱双泵，waters 2487双通道紫外检测器，英谱hs色谱数据工作站v4.0+for windows(杭州英谱科技开发有限公司);日本岛津uv160紫外分光光度计;phs25型数显酸度计(上海天达仪器有限公司);802型离心沉淀器(上海手术器械厂);tg328分析天平(上海天平仪器厂)。
加替沙星对照品(批号：200809252，南京圣和药业有限公司，质量分数98.9%);注射用加替沙星(规格：0.2 g/瓶，批号：200809261，南京圣和药业有限公司);维生素b6对照品(批号：100116200502， 中国 药品生物制品检定所，质量分数99.9%);维生素b6注射液(规格：0.1 g/支，批号：0812302，郑州羚锐制药股份有限公司);5%葡萄糖注射液(规格：250 ml/袋，批号：s0906024，上海百特医疗用品有限公司);乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取加替沙星对照品、维生素b6对照品各40 mg，用灭菌注射用水分别配制成含加替沙星、维生素b6均为200 μg·ml-1的贮备液。分别精密吸取上述贮备液各0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml置10 ml容量瓶中，用灭菌注射用水定容，混匀，制成不同浓度的混合对照品溶液。
2.2 样品预处理
吸取待测样品溶液10 ml置试管中，高速离心(4 000 r·min-1),取上清液20 μl测定。
2.3 检测波长的选择
精密配制质量浓度分别为32.0 μg·ml-1、16 μg·ml-1的加替沙星溶液与维生素b6溶液，在紫外光下扫描。结果加替沙星的最大吸收波长为292 nm,维生素b6的最大吸收波长为291 nm。由于维生素b6的浓度较低，所以将291 nm作为检测波长。
2.4 色谱条件与系统试用性试验
色谱柱：kromasil c18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：50 mmol·l-1磷酸二氢钠溶液(称取无水磷酸二氢钠6.0 g，加水溶解至1 000 ml，用磷酸调ph至3.5，抽滤后待用)乙腈(体积比75∶25);检测波长：291 nm;流速：1.0 ml·min-1;柱温：25 ℃。
按照注射用加替沙星和维生素b6注射液中处方比例配制除加替沙星和维生素b6以外的其他组分，精密取适量，加适量5%葡萄糖溶液溶解，并直接加入5%葡萄糖注射液250 ml中，混匀，精密吸取此溶液1 ml，置25 ml量瓶中，用灭菌注射用水稀释定容，得空白对照溶液;精密取适量注射用加替沙星和维生素b6注射液，加入5%葡萄糖注射液250 ml中，混匀，按上述方法定容，得供试品溶液。分别精密吸取空白对照溶液、对照品溶液与供试品溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。结果加替沙星、维生素b6的保留时间分别为4.40 min、1.59 min，未见明显干扰峰且分离度好。
2.5 标准曲线的制备
取“2.1”项各系列质量浓度的对照品溶液，按“样品预处理”项下操作进样，记录色谱图及峰面积，以质量浓度(ρ)为横坐标，峰面积(a)为纵坐标进行线性回归，得回归方程a加替沙星=14246.3ρ-29598，r=0.999 8;a维生素b6=4983.8ρ+3481.7，r=0.999 7。表明加替沙星、维生素b6质量浓度在10～50 μg·ml-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 回收率试验
分别精密吸取“2.1”项下贮备液适量，混合，用灭菌注射用水稀释成高、中、低3种浓度溶液，各取20 μl，重复进样3次，记录峰面积，代入回归方程 计算 回收率，结果见表1。
2.7 精密度试验
精密配制质量浓度均为20 μg·ml-1加替沙星、维生素b6的对照品混合溶液，重复进样6次，测定峰面积，结果加替沙星、维生素b6的rsd分别为0.48%、0.50%。按上述方法连续测定5 d，结果加替沙星、维生素b6的rsd分别为0.62%、0.82%。
2.8 稳定性试验
精密配制质量浓度为32 μg·ml-1的加替沙星5%葡萄糖溶液、16 μg·ml-1的维生素b6 5%葡萄糖溶液，避光放置，在0、1、2、4、6、8 h依次进样20 μl，测定峰面积。结果，加替沙星与维生素b6峰面积rsd分别为0.57%、1.43%，表明加替沙星、维生素b6的5%葡萄糖溶液在8 h内稳定。表1 回收率试验结果(n=3)
2.9 加替沙星与维生素b6在5%葡萄糖溶液中的配伍稳定性试验 模拟临床 治疗 用药，取加替沙星样品0.2 g(加适量5%葡萄糖溶液溶解)，维生素b6注射液100 mg依次直接加入5%葡萄糖注射液250 ml中，配制成含加替沙星800 μg·ml-1、维生素b6 400 μg ·ml-1的配伍液。在25 ℃时避光放置，分别在0、1、2、4、6 h取样，观察外观变化，同时测定ph;供试液制备：取上述配伍溶液各1 ml，置25 ml量瓶中，用灭菌注射用水稀释成含加替沙星32 μg·ml-1、维生素b6 16 μg·ml-1的溶液，作为供试液，按“2.2”项下操作进样并记录色谱，结果见图1。以0 h时的含量为100%计算百分含量，加替沙星、维生素b6的含量测定结果见表2。表2 配伍溶液在不同时间的ph及相对含量变化结果
结果表明：注射用加替沙星与维生素b6在5%葡萄糖注射液中配伍后，在25 ℃避光条件下6 h内配伍液外观澄明，微黄色，未见沉淀、气泡产生，ph无明显变化，峰形无变化，其相对百分含量都在95%以上，分解产物的峰面积之和在1%以下。
3 讨 论
本实验目的是考察注射用加替沙星与维生素b6注射液的配伍稳定性，为临床提供用药 参考 。加替沙星与维生素b6遇光易分解，维生素b6在酸性溶液中稳定。为排除加替沙星与维生素b6的自身降解对实验结果的影响，本实验在避光条件下分别对加替沙星、维生素b6在5%葡萄糖注射液中的稳定性进行了考察，结果表明两者在5%葡萄糖注射液中是稳定的。考虑到流动相的ph、紫外光对两者的稳定性影响，本实验流动相磷酸二氢钠用磷酸调ph至3.5，并在避光条件下进行。试验结果表明，在5%葡萄糖注射液中，注射用加替沙星与维生素b6注射液在25 ℃时避光条件下6 h内配伍稳定，建议临床上在避光环境下使用。
【参考 文献 】
[1] 戎筱卿.高效液相色谱法测定溶液中加替沙星含量[j].抗感染药学，2008，6，5(2)：85-88.
[2] 胡蓉梅，郭澄. 庆大维b胶囊中维生素b1、b2、b6和b12的hplc法测定[j].
