分娩时胎膜自然破裂的机理尚不完全清楚，目前" 认为，胎膜中胶原的降解是其发生的重要基础。胶原的降解依赖基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, mmp)的作用［1］。为探讨mmp与胎膜正常破裂及胎膜早破(premature rupture of membrane，prom)发生的关系，我们检测了胎膜正常破裂及prom孕妇羊水中总mmp的活性及其成分，现报道如下。

　　一、资料与方法

　　1.资料来源：收集本院足月剖宫产分娩的孕妇60例，胎膜正常破裂者30例为对照组，prom者30例为prom组，每组中未临产、潜伏期及活跃期各10例，均无妊娠合并症。

　　2.方法：(1)标本采集：于剖宫产时抽取羊水3 ml，立即离心、过滤，-70℃保存。(2)酶活性的测定：羊水消化生物素标记明胶，用酶联免疫吸附(elisa)法测定剩余明胶的含量，换算出酶的活性（以37℃下每1 ml羊水12 h消化的明胶量表示，单位：ng/ml*12 h），用加乙二胺四乙酸(终浓度80 mmol/l) 的羊水作阴性对照。（3）羊水中mmp成分的酶谱分析：参照moll等［2］介绍的方法进行明胶电泳，电泳完毕将凝胶置于培养皿中，经2.5% triton-x 100洗涤后，37℃下孵育18 h，用考马斯亮蓝g-250染色1 h，最后脱色48 h；酶经电泳组分后，将该处的明胶消化，染色后形成不着色的透明带。

　　3.统计学处理：实验结果作t检验。www.11665.cOm

　　二、结果

　　1.对照组羊水总mmp的活性变化：未临产时为(49±15) ng/ml*12 h，潜伏期为(58±15)ng/ml*12 h，活跃期为(102±29)ng/ml*12 h。潜伏期高于未临产期，但差异无显著性，活跃期较潜伏期显著升高，差异有极显著性(p＜0.01)。

　　2.prom组羊水中总mmp的活性变化：prom组未临产时羊水中总mmp活性为(85±10)ng/ml*12h， 潜伏期为(91±7)ng/ml*12h，活跃期为(104±23)ng/ml*12h。潜伏期高于未临产期，但差异无显著性，活跃期较未临产期显著升高，差异有极显著性(p＜0.01)。在未临产期和潜伏期，prom组羊水中总mmp的活性均显著高于对照组，差异有极显著性(p＜0.01)。

　　3.羊水中mmp的酶谱变化：羊水中较明确的mmp带有4条，相对分子质量分别为92 000、83 000、72 000和66 000。对照组未临产期羊水中以92 000和72 000的mmp 条带为主，活跃期则4条条带都有，其中相对分子质量为92 000和83 000的mmp条带所消化的明胶带，较未临产期明显增宽。prom组羊水中mmp的成分与对照组基本相同，但在未临产时羊水中各mmp消化的明胶带较对照组宽。

　　三、讨论

　　1. mmp的特性：mmp是一类结构中含有锌和钙等金属离子的蛋白水解酶，能水解胶原、弹性蛋白、氨基葡聚糖等多种细胞外基质，目前已发现的有十几种，其结构相似，均以酶原的形式从细胞中分泌，活性都能被组织金属蛋白酶抑制因子和乙二胺四乙酸抑制。近年来的研究发现，mmp 可能在胎膜破裂、分娩及产后子宫复旧等过程中发挥重要的生理功能。

　　2. 羊水中mmp的成分：vadillo-ortega等［3］在正常分娩产妇的羊水中，检测出了3条mmp条带，相对分子质量分别为183 000、92 000和83 000，分别是mmp-9的二聚体、酶原和活化形式。但我们发现，羊水中存在4种mmp成分，相对分子质量分别为92 000、83 000、72 000和66 000， 未能发现183 000 的mmp-9二聚体，推测可能是人种的差异，也有可能是方法的差异。根据相对分子质量推测，92 000和66 000的mmp可能分别是mmp-9的酶原和活化形式，而72 000和66 000 为mmp-2的酶原和活化形式。因此，羊水中mmp的主要成分为" mmp-9，包括其酶原和活化形式，究竟是否存在mmp-9二聚体和mmp-2有待进一步的研究证实。

　　3. 羊水中mmp活性变化与胎膜破裂的关系：胎膜完整性的保持依赖宫腔内压与胎膜强度的平衡。正常分娩活跃期宫内压增加和胎膜强度下降导致胎膜破裂。胶原的合成不足和降解增加，引起胎膜强度下降。胎膜中胶原的大量降解可能与mmp活性升高有关。maj等［4］发现，分娩发动后胎膜组织中mmp的活性显著升高，并以mmp-9活性升高更" 明显；我们的研究结果表明，对照组羊水中总mmp的活性在产程的活跃期显著升高，从明胶酶谱来看，以mmp-9的升高更明显。因此活跃期羊水中总mmp，特别是mmp-9 活性的增高，引起胎膜中胶原的大量降解，可能是胎膜破裂发生的重要生理基础。

　　4. 羊水中mmp活性异常与prom的关系：prom患者" 的胎膜中胶原的含量低于正常同孕周妇女，这" 与其胎膜中胶原合成减少和分解异常增加有关。我们发现prom组羊水中总mmp活性异常升高。另有研究表明，prom 患者羊水中基质金属蛋白酶抑制因子的含量则显著低于正常孕妇［5］。因此，羊水中总mmp 活性异常增高和其抑制因子的降低，从而引起胎膜中胶原的过度降解，可能是prom发生的主要原因之一。

　　prom的发生与感染及炎症密切相关［6］，感染或炎症过程中产生的细胞因子如白细胞介素1、8(il-1、il- 8)及细菌产生的脂多糖等都能诱导mmp 的合成和活化。因此我们推测羊水中mmp活性的异常升高，可能是多种因素诱发prom 的共同环节之一。

　　参考文献

　　1，paavola lg, furth ee, delgado v, et al. striking changes in the structure and organization of rat fetal membranes precede parturition. biol reprod， 1995， 53: 321-338.

　　2，moll um, younglerb gl, rosinski kb, et al. tumor promoter-stimulated mr 93,000 gelatinase secreted by normal and malignant human cells: isolation and characterization of the enzyme from ht1080 tumor cells. cancer research， 1990， 50: 6162-6170.

　　3，vadillo-ortega f, gonzalez-avila g, futh ee, et al. 92- kd type iv collagenase (matrix metalloproteinase-9) activity in human amniochorion increases with labor. am j pathol， 1995， 146: 148-156.

　　4，maj jg, kankofer m. activity of 72-kd and 92-kd matrix metalloproteinases in placental tissues of cows with and without retained fetal membranes. placenta， 1997， 18: 683-687.

　　5，vadillo-ortega f, hernanderz a, gonzalez-avila g, et al. increased matrix metalloproteinase activity and reduced tissue inhibitor of metalloprteinase-1 levels in amniotic fluids from pregnancies complicated by premature rupture of membranes. am j obstet gynecol， 1996， 174: 1371-1376.

　　6，baumann p, romero r. intraamniotic infection, cytokines and premature labor. wien klin wochenschr， 1995， 107: 598-607.