原文作者：赵岩，卢晓东

　　摘要：分别采用三种不同的方法处理对照样，根据gb/t 20944.3—2008中的试验方法对试验结果的影响进行了研究。结果表明采用不同方法处理的对照样会对试验结果产生较大影响。
 　　关键词：纺织品；抗菌性能检测；对照样
　　随着科学技术的发展以及人们对健康的关注，抗菌纺织品因其具备抗菌功能逐渐走入人们的生活，并越来越受到人们的重视。目前关于抗菌纺织品的研究和生产也发展迅速，因此，准确地检测和正确评价这些产品的抗菌效果，对于抗菌纺织品市场的长远发展显得尤为重要。
 　　抑菌率是衡量纺织品抗菌性能的重要指标。目前我国针对该项指标的检测方法有以下标准可以参照执行：ft/t 73023—2006《抗菌针织品》、gb 15979—2002《一次性卫生用品卫生标准》、gb/t 20944—2008《纺织品 抗菌性能的评价》等。其中gb/t 20944.3—2008 《纺织品抗菌性能的评价 第3部分 振荡法》适用于羽绒、纤维、纱线、织物以及特殊形状的制品等各类纺织产品，成为纺织品抗菌检测中常用的国家标准。该标准中指明对照样用于验证试验微生物生长条件的，为不经任何处理的100%棉织物[1]，但在实际操作中，实验室之间却采取不同的方式对对照样进行处理，从而影响试验结果。因此，有必要对对照样前处理过程与试验结果的关系进行讨论。本试验中采用棉标准贴衬织物为对照样，分别采取不同的方式进行前处理，以考察对照样处理方式对试验结果的影响。wwW.11665.coM
 　　1 试验部分
　　本文测试方法按照国家标准gb/t 20944.3—2008执行。
　　1.1 试验菌种与菌液的制备
　　革兰氏阳性菌：金黄色葡萄球菌atcc6538；革兰氏阴性菌：大肠杆菌8099；真菌：白色念珠菌atcc10231。按照gb/t 20944.3—2008标准中9.1的方法进行接种菌液制备。
 　　1.2 对照样的处理
　　对照样选择棉标准贴衬织物，分别进行以下三种处理。
　　a——未经任何处理的棉标准贴衬织物。
　　b——将棉标准贴衬织物三级水煮沸60 min后晾干。
　　c——用酒精浸泡棉标准贴衬织物60 min后三级水煮沸60 min，晾干备用。
　　将以上三种不同方式处理的对照样剪成5 mm×5 mm大小的碎片，称取（0.75±0.05）g作为一份试样，包好后放入高压灭菌锅（121℃，15min）进行灭菌处理后备用。
 　　1.3 试验步骤
　　1.3.1 试样及试剂装瓶
　　准备若干 250 ml三角烧瓶，其中每3个烧瓶中分别加入对照样a、b、c，以及抗菌织物试样，然后在每个烧瓶中各加入（70±0.1）ml（0.03 mol/l）的pbs缓冲液。
 　　1.3.2 “0”接触时间取样
　　用吸管往3个对照样烧瓶中各加入5 ml接种菌液，盖好瓶塞，放在恒温振荡器上，以250 r/min～300 r/min振荡1 min。用吸管在“0”接触时间制样的烧瓶中吸取1 ml溶液，移入装有9 ml pbs缓冲液的试管中，并依此进行梯度稀释，每个稀释倍数的试管分别制作两个平板做平行样，按规定时间和温度进行培养计数。
 　　1.3.3 定时振荡接触
　　用吸管往3个抗菌织物试样烧瓶中各加入5 ml接种菌液，盖好瓶塞。与已完成“0”接触时间取样的对照样烧瓶，置于24℃恒温振荡器上，以150 r/min振荡18 h。
 　　1.3.4 稀释培养及菌落数的测定
　　到达规定时间后，从每个烧瓶中吸取1 ml试液，移入9 ml pbs缓冲液中，充分混匀后进行10倍梯度稀释计数，每个稀释倍数的试管制作两个平板做平行样。按规定时间和温度进行培养计数。
 　　2 试验结果
　　对照样采用不同的处理方式后对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及白色念珠菌试验结果的影响如表1、表2和表3所示。 [论文网]
　　从表1中可以看出，“0”时刻的菌液浓度为2.30×104cfu/ml，满足标准中关于菌液初始浓度的要求。振荡18h后，a、b、c三种对照样的菌液浓度依次增加，生长值分别为1.5、1.8和2.1，均达到了标准中关于大肠杆菌生长值≥1.5的要求，针对同一样品，不同处理方式的对照样计算出的抑菌率分别为70%、86%和92%。图1为不同处理方式的对照样振荡培养18 h后菌液浓度的计数平板，从图中可以更加直观地看出随着对照样处理步骤的增加菌液浓度也随之增加。
 　　类似的情况同样存在于对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抗菌试验中。在金黄色葡萄球菌的抗菌试验中，“0”时刻的菌液浓度为2.47×104 cfu/ml，满足标准中关于菌液初始浓度的要求。振荡18 h后，a、b、c三种对照样的菌液浓度依次增加，但a方式处理的对照样生长值没能达到标准中关于金黄色葡萄球菌生长值≥1.5的要求，说明直接经高压灭菌锅处理的棉标准贴衬织物不能满足试验要求。b、c两种方式处理的对照样抑菌率分别为87%和91%。
 　　图2为不同处理方式的对照样振荡培养18h后菌液浓度的计数平板，从图中可以看出随着对照样处理步骤的增加菌液浓度也随之增加。
　　在白色念珠菌的抗菌试验中，“0”时刻的菌液浓度为1.5×104cfu/ml，满足标准中关于菌液初始浓度的要求。振荡18h后，a、b、c三种对照样的菌液浓度依次增加，生长值以及抑菌率也有所增加。图3为不同处理方式的对照样振荡培养18h后菌液浓度的计数平板，同样可以看出随着对照样处理步骤的增加菌液浓度也随之增加。
 　　3 讨论
　　从试验结果中可以看出，采用不同处理方式处理的对照样对试验结果均有影响。这是由于在抗菌性能检测过程中，影响微生物生长的因素很多，除了生长所必需的碳源、氮源、维生素等营养因素之外，许多环境因素如ph值、无机盐、环境渗透压和水活度等理化指标都会影响微生物的生长[2]。在生产运输过程中，纺织品难免会残留少量影响微生物生长的物质，从而对试验抑菌率的结果产生影响。随着对照样处理步骤增多，尤其是增加在酒精中的浸泡过程，能有效去除对照样上面残留的有机物质，从而使菌液中抑制细菌生长的因素减少，菌液浓度也随之增大。希望各检测机构能对对照样的前处理过程有更加详细统一的要求，以促进对抗菌织物的抗菌性能的正确评价。
 　　参考文献：
　　[1] gb/t 20944.3—2008 纺织品抗菌性能的评价，第3部分振荡法[s].
　　[2] 周德庆. 微生物学教程[m].北京：高等教育出版社， 2002： 82-86.
　　（作者单位：山东省纤维检验局）