【摘要】　目的　探讨dna倍体分析系统联合阴道镜检查在筛查宫颈病变的价值。方法　对我院2012年3月至9月妇科门诊参加宫颈癌前病变筛查妇女222　例，采用宫颈上皮细胞dna倍体分析方法，对其中30例结果异常者皆进一步在阴道镜下作多点宫颈活体组织病理检查。结果　共检出宫颈上皮细胞dna倍体异常者30例，占1351　%，其中异倍体细胞（0＜n＜3﹚19例；异倍体细胞（3≤n＜5﹚4例；异倍体细胞（5≤n＜15﹚4例；大量异倍体细胞（n≥15﹚3　例。活检病理中18例为慢性炎症，发现宫颈上皮瘤样病变（cin）12例，其中cinⅰ6，cinⅱ3例，cinⅲ3例，cin中8例均为dna倍体分析发现3个或3个以上大于5　c细胞。结论　采用dna倍体分析系统，可早期发现宫颈病变，对筛查阳性及临床可疑者进一步行阴道镜检查及活检病理诊断，可尽早发现癌前病变，防治宫颈癌的发生。
　　【关键词】
　　dna倍体分析；阴道镜；筛查；宫颈癌前病变
　　当前发病率位居我国妇科恶性肿瘤之首的宫颈癌，是一种目前唯一可通过医学干预能使发病率及死亡率皆可下降的人类肿瘤。而预防和控制宫颈癌的关键措施之一是早期诊断和治疗宫颈癌前病变。本研究通过对我院妇科门诊行癌前病变筛查222例妇女，采用细胞dna倍体分析方法，对其结果异常者皆进一步行阴道镜检及活检病理诊断，对其结果进行分析、比较，以探讨dna倍体分析系统在宫颈癌前病变筛查的应用价值。
　　1　资料与方法
　　11　一般资料
　　我院妇科门诊2012年3月至2012年9月参加宫颈癌前病变筛查妇女222例，采用dna倍体分析检测方法，对结果异常的妇女，皆进行阴道镜检查，并同时多点取宫颈组织送病检。wWw.11665.coM患者年龄22～52岁，　平均4003岁。
　　12　方法
　　121　材料　普查试剂盒由武汉兰丁肿瘤早期诊断检测中心提供，其中包括：宫颈刷、盛有固定液的标本管、标签、申请单。
　　122　取材　受检者在受检前3　d无同房史，受检前48　h不得作阴道冲洗及任何阴道治疗，用特制宫颈刷，将刷头中央较长刷丝从宫颈外口插入宫颈管内，两边较短刷丝抵住宫颈黏膜面，始终朝一个方向（顺时针或逆时针）旋转3～5圈，取出宫颈刷，拔下刷头，浸泡在样本收集管中，　拧紧瓶盖，用力振摇数次，送dna试验室制片，用feulgen染色作dna定量测定。
　　123　阴道镜检查
　　受检者取截石位，窥阴器暴露宫颈后，用生理盐水棉球擦拭宫颈分泌物，作初步观察。然后以3%冰醋酸及25%碘酒涂布宫颈，仔细观察阴道镜图像，并拍摄存档。所有病例均在阴道镜下定位取组织数块，分点分瓶用1%福尔马林液固定后送病理检查。
　　13　结果判断标准
　　131　dna倍体分析
　　采用武汉兰丁医学高科技有限公司所提供的全自动细胞图像分析系统（automatic　imaging　cytometry，aicm）对染色片中的每一个细胞核进行扫描分析，根据每个细胞核的123个核特征参数值，自动进行分类和计数，自动打印dna倍体分析直方图和细胞点阵图。以测定细胞核iod（intergrated　optical　density）来判断dna含量。以dna指数（dna　index）来表示dna的含量。　dna定量细胞学常用c（content）作为单位来衡量dna含量。在静止期（g0期）和dna合成前期（g1期）的细胞，　核染色体对数为23对，称为dna二倍体细胞（diploidy或2　c细胞）。在dna合成期（s期）的细胞，染色体对数在23对至46对之间，可出现非整倍体细胞，如3　c细胞。dna合成后期（g2期）的细胞，染色体为46对，为dna四倍体细胞（tetraploidy，或4　c细胞）。出现dna指数＞25的判断为dna倍体异常细胞（5　c细胞）。
　　根据accell系统诊断软件所做的细胞dna倍体分析结果和建议如表1所示：
　　132　阴道镜及病理学检查
　　检查异常图像包括：白色上皮；点状血管；镶嵌；异型血管；真性糜烂；浸润癌。病理诊断报告分别为正常、宫颈炎、cinⅰ、cinⅱ、cinⅲ或浸润癌。
　　2　结果
　　21　宫颈细胞dna异常结果的检出率
　　宫颈细胞dna检测结果222份样本中，正常2　c细胞为主192例，占8649%；dna指数大于25细胞30例，占1351%。其中宫颈上皮细胞dna倍体分析为5　c细胞＜3个有19例，占633%；5　c细胞3～5个有5例，占167%；5　c细胞5～15个有3例，占100%；5　c细胞≥15个有3例，占10%。
　　22　accell系统诊断软件所作的宫颈细胞dna倍

分析异常结果与阴道镜下活检病理结果对比
　　发现dna倍体异常的30例，皆进一步行阴道镜检及活检，其病理诊断为宫颈上皮内瘤变（cin）12例，占400%。其中cinⅰ6例，占20%；cinⅱ3例，占10%；cinⅲ　3例，占10%；宫颈炎18例，占600%。
　　宫颈上皮细胞dna倍体分析为5　c细胞＜3个有19例，其中检出cinⅰ4例，阳性检出率为211%。5　c细胞3～5个有5例，其中　cinⅰ2例，　cinⅱ1例，阳性检出率为60%。5　c细胞5～15个有3例，其中cinⅱ1例，cinⅲ1例，阳性检出率为667%。5　c细胞≥15个有3例，　cinⅱ1例，cinⅲ2例，阳性检出率为100%。
　　23　阴道镜图像与病理诊断的关系
　　正常阴道镜图像10例，检出cin1例，占100%。异常阴道镜图像20例，检出cin　11例，占550%。异常阴道镜图像中白色上皮14例，占700%；血管异型1例，占50%；点状血管1例，占50%；镶嵌4例，占20%。 　　3　讨论
　　31　宫颈细胞dna检测在宫颈病变筛查中的诊断价值
　　肿瘤病理学研究显示，细胞癌变发病时都需要经过5个阶段：基因突变，增生，非典型增生，原位癌，浸润癌。前4个阶段为癌前病变，而癌前病变早期是很难被传统的诊断方法发现。但细胞核内dna含量、dna在细胞核内的分布和排列形式、细胞核大小的改变则是细胞癌变过程中最早期的变化。兰丁dna倍体分析系统即通过对细胞核内dna含量或倍体的测定和分析来判定细胞的生理状态和病理改变，是近十年来在恶性肿瘤诊断中发展的一种新方法［1］。相对传统的细胞学的主观、经验诊断，其采用自动细胞扫描、诊断系统及质控系统，保证了结果的客观准确，消除了人为因素误差。实现了由经验细胞学向循证细胞学的跨越。国外有文献报道对一组宫颈病变的妇女进行dna倍体分析，所有慢性宫颈炎者宫颈上皮细胞均为二倍体，而cin者可见不同比例的异倍体细胞，cinⅲ病例中的异倍体细胞更可高达952%［2］。本研究中dna倍体异常的30例中，在阴道镜指导下活检病理诊断cin12例，阳性检出率为40%（12/30）。其中5　c细胞＜3个有19例，检出cinⅰ4例，阳性检出率为211%。5　c细胞3～5个有5例，检出　cinⅰ2例，　cinⅱ1例，阳性检出率为60%。5　c细胞5～15个有3例，检出cinⅱ1例，cinⅲ1例，阳性检出率为667%。5　c细胞≥15个有3例，　cinⅱ1例，cinⅲ2例，阳性检出率为100%。其结果证实了dna异倍体细胞与cin发生密切相关，且其数量与cin病变程度相关，异常细胞越多，病变程度越重。本研究中在高级别中阳性检出率更高，可能与本研究样本数较小有关。
　　32　宫颈细胞dna筛查异常或临床可疑患者应做阴道镜检
　　对宫颈细胞dna筛查异常及临床可疑患者，均应行阴道镜检查及取活组织病理检查。阴道镜检查是利用阴道镜放大技术，全面观察鳞柱细胞交界处及移行带肉眼看不到的微小的病变，评定其病变，确定并取活体组织，做出组织学诊断。对筛查、诊断女性宫颈病变有重要价值。特别对宫颈转化区完全看不见或不满意的阴道镜检查而宫颈细胞dna异常患者一定要行宫颈管骚刮及宫颈活检病理检查。在本组dna倍体异常的30例中，我们发现阴道镜图像异常20例，其中cin11例，阳性检出率为550%。阴道镜图像异常中以白色上皮最常见，占70%。但在阴道镜图像正常者中，仍发现1例为cin，有100%　的漏诊率。故dna倍体分析系统与阴道镜联合应用可使宫颈病变阳性检出率有所提高。
　　综上，dna倍体分析系统可作为宫颈癌前病变筛查的一种新的方法，结合阴道镜检查和病理活检可以早期诊断宫颈癌前病变，对降低宫颈癌的死亡率具有明显意义。
　　参　考　文　献
　　［1］　孙小蓉，　汪键.　alfred　boecking　dna倍体分析系统用于宫颈癌及上皮内瘤变的诊断及检测.　中华病理学杂志，　2005，4（7）：435437.
　　［2］　rihet　s，　lorenzato　m，　clavel　c　oncogenic　human　papillomaviruses　and　ploidy　in　cervical　lesions.　j　clin　pathol，1996，49：892896.