作者：陈立江 段洪云 张 胜  郝爱军 刘 洋 

【摘要】  目的  研究氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺。方法 采用hplc法测定三七总皂苷的含量，考察洗脱剂的浓度、洗脱剂的用量和吸附剂用量对工艺的影响。结果 确定最佳精制工艺为：洗脱剂的浓度为55%乙醇，洗脱剂的用量为10倍吸附剂的用量，吸附剂用量为5倍三七总皂苷的用量。结论 通过氧化铝柱层析精制后，三七总皂苷的收率大于70%，含量大于80%，说明此精制工艺是可行的。
【关键词】  三七总皂苷  氧化铝  高效液相法
        三七为五加科植物三七panax notoginseng(burk.) f.h.chen的干燥根及根茎[1]，三七总皂苷是中药三七的有效部位，主要含有三七皂苷r1，人参皂苷rg1和人参皂苷rb1等达玛烷型三萜皂苷类化合物[2]。www.11665.CoM 现代 药理研究证明：三七总皂苷具有多方面的生物活性，主要表现在扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面[3]。
        目前三七总皂苷的富集与纯化一般采用大孔吸附树脂来完成[4]，纯化后三七总皂苷的含量达到60%以上。为了提高药物的安全性和有效性，提高其成药原料药的纯度。本实验拟采用氧化铝柱层析对三七总皂苷的纯化物进行精制[5]，并对工艺进行了考察，为进一步的制剂学研究打下基础。
        1  仪器与试药
        1.1仪器与设备
        re 52-99旋转蒸器（上海亚荣生化仪器厂）；dk-s22型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；ja-1003型 电子 分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限医疗设备厂）；美国tsp高效液相色谱仪；tsp p-2000泵、tspuv-1000uv-vis检测器；tsppc1000色谱工作站；色谱柱：odsc18柱（250×4.6mm,5μm,大连依利特 科学 仪器有限公司）。
        1.2材料与试剂
        三七总皂苷提取物（云南玉溪天然药物有限公司）；三七总皂苷对照品：三七皂苷r1（0745-200008）、人参皂苷rg1（0703-200015）、人参皂苷rb1（0704-200115）对照品（

        从以上结果可知，随着洗脱剂用量的增加，得到总皂苷的含量逐渐下降，考虑收率，以10倍量55%的乙醇洗脱比较合适。
        2.5.3吸附剂用量考察
        取三七总皂苷原料3份，每份10g。分别用50%乙醇适量溶解，分别转移至氧化铝柱（柱1：中性氧化铝25g，内径2cm；柱2：中性氧化铝50g，内径4cm；柱3：中性氧化铝100g，内径5cm），然后用10倍量55%乙醇洗脱，分别收集洗脱液，减压回收乙醇，真空干燥，按hplc法测定总苷含量和收率。
        从以上结果可知，随着吸附剂氧化铝用量的增加，收率逐渐降低，而含量呈上升趋势，氧化铝用量为5倍与10倍相比较，前者虽然总皂苷含量略低，但已经大于80%，而且收率较高，因此吸附剂氧化铝的用量确定为5倍。
        2.6中试验证结果
        取三七总皂苷原料3份，精密称取质量分别为44.4g，42.8g和47.9g，分别用50%乙醇适量溶解，分别转移至氧化铝柱，中性氧化铝用量为三七总皂苷的5倍，然后用10倍量55%乙醇洗脱，分别收集洗脱液，在60℃以下减压回收乙醇，真空干燥，按hplc测定方法，分别测定三七皂苷r1、人参皂苷rg1和人参皂苷rb1的含量。
        从以上三批中试结果可知，按选定的精制工艺可以制备总皂苷含量大于80%的三七总皂苷原料，且收率大于70%，说明此精制工艺是可行的。
        3  结论
        3.1氧化铝柱层析精制三七总皂苷的最佳工艺为：洗脱剂的浓度为55%乙醇，洗脱剂的用量为10倍量吸附剂的用量，吸附剂用量为5倍三七总皂苷的用量。
        3.2本实验提出了一种新的三七总皂苷的精制方法—氧化铝柱层析，具有分离效果好、工艺简单、投资少、处理量较大等优点。有 文献 报道[6]，大孔吸附树脂法具有选择性好、吸附容量大、安全无毒、再生容易等优点，但由于应用时间相对较短，还存在着一些问题，因此，在纯化中药有效成分的工艺过程中，两种纯化方法可以互相结合，取长补短，共同促进中药制剂的不断 发展 。
参 考 文 献
[1]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典2005年版二部[s].北京：化学 工业 出版社， 2005: 9.
[2]甘烦远.三七的化学成分研究概况[j].