原文作者：王慧娇

　　摘 要：以筛选生地黄总抗氧化物质超声提取最佳工艺为目的，以frap法测定总抗氧化物质的抗氧化能力，并以其为评价指标。通过正交设计方法，优化超声提取工艺。结果表明，提取因素的影响程度为乙醇浓度>提取时间>提取温度>料液比，最佳提取工艺是在提取温度为40 ℃的条件下，用20倍量的80%乙醇超声提取40 min。生地黄总抗氧化物质的抗氧化能力值为0.896 mmol·g-1。
 　　关键词：生地黄；总抗氧化物质；超声提取
　　中图分类号：r284 文献标识码：a doi编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.06.003
　　生地黄，为玄参科植物地黄（rehmannia glutinosa libosch.）的块根，有提高免疫系统、降糖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种药理作用 [1-2]。研究表明，生地黄具有多种抗氧化成分（酚类、黄酮类、萜类、甾体等化合物），且提取这些成分时宜选择乙醇做为提取溶剂[3]。有关生地黄抗氧化物提取工艺研究的文献报道[4-6]仅是针对某单一或一类成分，这样做忽略了其它的抗氧化成分而浪费了资源；仅是以化学方法作为评价指标，这样做不能体现多类成分综合的抗氧化活性。鉴于用超声法[7]提取生地黄总抗氧化物质未见文献报道，本试验采用frap法测定熟地黄提取液体外总抗氧化活性，并以其为评价指标，在单因素试验的基础上，采用正交试验设计，对影响生地黄抗氧化物质提取效果的多个因素进行了考察，以期优选出超声法提取生地黄总抗氧化物质的最佳工艺，为生地黄总抗氧化物质的开发利用提供依据。wwW.11665.cOM
 　　1 材料和方法
　　1.1 材料与试剂
　　生地黄药材（产地河南，购于河南省郑州市药材公司），低温烘干，粉碎0.425 mm备用。抗氧化试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司）；去离子水。 [论文网]
　　1.2 仪 器
　　ab204-n电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司），kq-700db型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），r206d旋转蒸发仪（上海大颜仪器有限公司），shb-ⅲ循环水式真空泵（上海豫康科教仪器设备），uv-9200型紫外分光光度计（北京瑞利分析仪器设备有限公司） ，加样枪（德国普兰德公司）。
 　　1.3 方 法
　　1.3.2 样品溶液的制备和总抗氧化物抗氧化能力值的计算 准确称取生地黄粉末 5.00 g置于100 ml具塞锥形瓶中，分别于不同的工艺条件下超声提取，将提取液减压浓缩，并定容至 100 ml容量瓶中，即为待测液。取各工艺条件下的待测液溶液10 ml，加入180 μl的frap工作液混匀，在37 ℃孵化3～5 min，于593 nm处测定吸光度。根据吸光度值和标准曲线，计算结果表示其抗氧化能力值（mmol·g-1）。
 　　2 结果与分析
　　2.1 单因素试验结果
　　2.2 正交试验结果
　　2.3 验证性试验结果
　　为考察上述结果的准确性，以保证提取工艺的合理可行，取生地黄按最佳提取工艺条件重复6次试验。结果见表3。验证性结果表明：该工艺合理可行，稳定可靠，具有可操作性和重现性，生地黄总抗氧化物质的总抗氧化能力值为0.896 mmol·g-1。
 　　3 小 结
　　以总抗氧化物的抗氧化能力值为评价指标的正交试验结果表明，最优超声提取最佳方案为a2b2c2d2，即用样品20倍量的80%的乙醇在温度40 ℃条件下超声提取40 min。在3个因素中， 影响生地黄中总抗氧化物提取率最重要的因素是乙醇浓度，即80%乙醇。
 　　参考文献：
　　[1] 刘卫欣，卢兖伟，杜海涛，等.地黄及其活性成分药理作用研究进展[j].国际药学研究杂志，2009（4）：277-280.
　　[2] 曲运琴，任东植，仪蕙兰，等.环境条件对地黄杂交种子活力的影响[j].山西农业科学，2006，34（4）：49-51.
　　[3] 袁保刚.生地黄提取物抗氧化活性研究[d].杨凌：西北农林科技大学，2011.
　　[4] 李文波.酶-超声提取地黄多糖及其抗氧化性研究[j].德州学院学报，2009（4）：46-50.
　　[5] 田春莲，丁文.湖北地黄梓醇超声波提取及含量测定[j].安徽农业科学，2009，37（28）：3788-3789，3792.
　　[6] 宋子荣，谭梓骏，陈西松，等.地黄提取工艺的优化[j].中国实验方剂学杂志，2006（1）：8-9.
　　[7] 钟玲，尹蓉莉，张仲林.超声提取技术在中药提取中的研究进展[j].西南军医，2007（6）：84-87.