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单胺氧化酶的研究进展

【摘 要】近年来,关于单胺氧化酶在临床上的应用研究越来越受到人们的关注,本文将对其理化性质、检测方法及临床应用作一综述。
【关键词】单胺氧化酶;研究进展


    1 mao理化性质单胺氧化酶(monoamine oxidase,mao)的分类名为单胺:氧氧化还原酶,是含fe2+、cu2+和磷脂的结合酶,主要作用-ch2nh2基团催化各种单胺类脱胺生成相应的醛,然后进一步氧化成酸;或使醛转化为醇再进一步代谢。mao是一种上具多个结合部位的单一分子酶,故对底物的特异性不高,可使多种胺类氧化脱氨。mao广布于体内各组织器官,尤以肝、肾、胃和小肠含量最多,主要位于线粒体膜外表面,并与膜紧密结合,以黄素腺嘌呤二核苷酸为辅酶;另一类存在于结缔组织,不含fad,以磷酸吡哆醛为辅酶。

    脑组织中的mao随年龄增加、神经胶质细胞的增多其活性增强。mao能分解儿茶酚胺类激素,可间接反映心脏交感神经结功能。现已证实,不同来源的mao的相对分子质量相差很大,小者约100,000,大者可达1,000,000以上,是由于同一亚基的聚合程度不同所致。

    2 mao实验室检测方法

最早检测mao是用荧光测定法[1]和醛偶氮萘酚法[2],目前常用方法包括以下几种。

    2.1 醛苯腙比色法 该方法通过mao氧化苄胺,再与2,4二硝基苯肼作用生成的醛苯腙在碱性条件下产生棕红色,于470nm比色测定,计算mao的浓度。WWW.11665.CoM

    2.2 mcdp比色法 该法是通过mao氧化苄胺产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶存在下与mcdp作用生成有色的甲烯蓝,于660nm处比色测定,计算mao的浓度。此法需要加入终止液后测定,不宜于大批量标本的检测,而且mcdp见光易分解。

    2.3 连速监测法 该方法是通过mao催化苄胺生成氨,氨在α-酮戊二酸、nadph和gldh的存在下生成谷氨酸,同时nadph还原成nadp+,引起340nm处吸光度的下降,通过监测其下降的速率即可得出样本中mao的活性。此方法快捷、操作简单、适合自动化分析,可减少人为误差,具有良好的准确度与精密度,适合大多数临床实验室应用。

     3 mao测定的临床应用

3.1 血清单胺氧化酶活性高低能反映肝纤维化的程度,是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化病人mao活性升高的阳性率在80%以上,最高值可达对照值的3.5倍(n=30)。酶活性与腹腔镜所见肝表面的结节变化,以及与活组织镜检所见的纤维化程度相平行。纤维变仅限于汇管区或小叶中心者,其mao活性大致正常;纤维变侵入肝实质内时,mao升高率为30%;汇管和汇管区之间有架桥性纤维化时,则有83%升高;如在假小叶周围有广泛纤维化形成时,则几乎全部均升高,且升高幅度最大。国内报道阳性率均在85%(天津公安医院:17例,88%,高玑山等:32例,85.7%;薛德义等:71例,87.05%;黄泽伦:20例,85%;刘览等:30例,86.7%),其升高幅度及阳性率均超过急性或慢性肝炎。同工酶分离证实,慢性肝病smao-iii有增高趋势;肝硬化代偿组mao-iii占总活性的(23.9+3.0)%,其阳性率为72.2%(13/18);肝硬化失代偿组mao-iii占总活性的(34.6+4.0)%,其阳性率为92.3%,故检测mao同工酶有助于肝硬化的早期诊断(陈道宏等)。

    虽然肝硬化时,结缔组织纤维释放mao增多,但在纤维化甚为明显的血吸虫肝病,患者smao并不一定升高,故纤维化并非mao活性升高的唯一原因。现已知大动脉和肺组织内mao的浓度比血清高100-150倍,血中mao可能部分来自血管内皮细胞。肝硬化时,病人体内的水分增加,末梢扩张和高动力型循环等有可能促使血管壁内mao释放人血。由于胃肠组织也含有丰富的mao,因此门-体静脉短路时,肠内mao可经短路进入体循环。

    3.2 各型肝炎:各型肝炎急性期患者的mao活性多数不升高,但在暴发型重症肝炎时,因肝细胞坏死,线粒体释放大量的mao,可致mao活性升高,阳性率可达73.3%,其升高幅度与病情轻重程度成正相关;急性肝炎经久不愈,病程超过3个月者,mao活性亦可升高;活动型慢性肝炎有半数左右病例mao活性升高。肝炎与肝硬化病人mao活性差别显著,而各型肝炎之间的mao活性无显著差异。

    3.3 糖尿病可因合并脂肪肝,充血性心力衰竭可因肝郁而继发肝纤维化,以至人mao活性增高;甲状腺功能亢进可因纤维组织分解与合成旺盛,肢端肥大症可因纤维过度合成等原因,从而引起mao活性不同程度的升高。有些无纤维增生的结缔组织疾病的病人mao活性不升高。原发性肝癌、继发性肝癌、畸胎瘤、胆汁性肝硬化、血吸虫性肝硬化、慢性胆汁郁积型肝炎等患者的smao活性不变。

    测定血小板mao活性发现,正常对照组女性大于男性。

    慢性精神分裂症患者血小板mao活性明显低于正常组,而急性精神分裂症与对照组无明显差别,但抗精神病药物能引起mao活性升高。双向情感性障碍患者,血小板mao活性显著低于对照组,且男性低于女性;躁狂型患者显著低于抑郁型患者患者,单相抑郁症患者显著公共开支对照组。但美国学者最近研究认为,血小板mao活性与精神病学检查结果没有明显关系。酒精中毒者男性血小板mao与女性有明显差异。

    此外,测定肿瘤组织匀浆mao和二胺氧化酶的活性,有助于区别前肠和中肠的类癌瘤肿瘤,前肠类癌肿组织中mao活性[(1850+342)mol/mg.min,n=16]明显高于中肠类癌肿瘤[(407+43)mol/mg.min]。

    参考文献

[1]王坤,等.实用诊断酶学[m].重庆:科技文献出版社重庆分社,1989:259-267.

[2]叶应妩,等.全国临床检验操作规程式[m].北京:人民卫生出版社,1997:229-231.

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  •  作者:曾广冰 [标签: 胺氧化酶 单胺氧化酶 氧化酶 二胺氧化酶 ]
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