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雷公藤和昆明山海棠植物根中卫茅醇的提取方法及鉴别研究

             作者:黄耀峰,陈森洲,黄林,李寿芬,欧阳韦伟

【摘要】  目的从雷公藤和昆明山海棠植物根中提取卫茅醇并鉴别比较,寻找雷公藤和昆明山海棠植物在临床疗效上具有相似性的原因。方法采用95%乙醇为溶剂,对雷公藤和昆明山海棠植物根中进行热提取。其提取液经浓缩后的相对应部位进行薄层层析检查对照、化学成分的预测、熔点的测定及红外吸收光谱的测定来判别两种植物的差异。结果 两种植物均含有相同的卫茅醇。结论雷公藤和昆明山海棠在临床疗效上具有相似性,主要原因是这两种植物具有相同的化学成分。

【关键词】  雷公藤; 昆明山海棠; 卫茅醇; 薄层层析

 chinaabstract:objectiveto extract dulcitol from plant roots of triptergium wilfordii hook. f. and t. hypoglaucum(levi.) hutch and conduct identifications and comparisons on the extracts. to search for the causes of the similarities in clinical curative effects of the plants of triptergium wilfordii hook. f. and t. hypoglaucum(levi.) hutch.methodsconduct heat extraction on the plant roots of triptergiumwilfordiihook. f. and t. hypoglaucum(levi.) hutch by adopting 95% ethanol as solvent. conduct thin layer chromatographic comparisons, forecasts of chemical ingredients, measuration of melting points and measuration of infrared spectrum on the relevant parts of the condensed extract. resultsboth plants contained dulcitol. conclusionthe two plants of triptergium wilfordii hook.f..and t. hypoglaucum (levi.) hutch. have similarities in clinical effect. the main cause is that the two plants have many the same chemical compositions.

  key words:triptergium wilfordii hook. f. ; t. hypoglaucum (levi.) hutch;  dulcitol  thin layer chromatography

    雷公藤triptergiumwilfordii hook.f.和昆明山海棠t.hypoglaucum (levi.) hutch.均属于卫茅科雷公藤属植物,药用部位为根,临床用于治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮、多型肾炎及麻疯病等[1~3],均有一定疗效,且两者在临床上疗效有许多相似点。WWW.11665.COM从植物形态上看,两者也十分相似,雷公藤被面为绿色,而昆明山海棠被面为粉白色[4,5]。据文献报道,雷公藤根中主要含有生物碱,卫茅醇,二萜内酯,三萜类化合物等[6,7]。两者目前国内取得重大进展的是抗生育及抗癌研究方面[8~11]。
   
  本课题的研究目的是从雷公藤和昆明山海棠植物根中提取卫茅醇并鉴别比较,寻找雷公藤和昆明山海棠植物在临床疗效上具有相似性的原因,供临床研究参考。

  1  器材

  1.1  药物与试剂

  雷公藤根购自桂林市药材站;昆明山海棠根及合成卫茅醇由桂林市药检所提供。乙醇为分析纯(成都科龙化工试剂厂),硅胶g(中国青岛海洋化工集团公司),其它试剂均为分析纯。

  1.2  仪器

  sf-170型高速粉碎机(上海中药机械厂);bsz-2型自动双重蒸馏水器(上海博通);td-ii全自动薄层制板器(上海科哲);dhg101-7a电热鼓风式干燥箱(巩义市英峪予华仪器厂);wfh-201b紫外透射反射仪(上海精科)。

  2  方法及结果

  2.1  薄层层析板的制备

  取e.meick硅胶27.5 g,加0.5%(w/v)羧甲基纤维素钠的上清液80 ml,充分拌匀,加数滴乙醇,倒入清洁的两块3 mm厚的玻璃中间,另取一块边缘光滑的玻片,从一端刮向另一端而成,室温空气干燥后,置105℃烘箱活化30 min,然后放入干燥器中备用。

  2.2  实验样品的制备

  取雷公藤根粉(或昆明山海棠根粉)分别置于连续提取器中,用95%乙醇[12]连续提取,提取液过滤,浓缩至小体积,冰箱放冷析出沉淀,过滤得桔黄色结晶(a),母液加水使沉淀物析出完全,过滤,滤并水洗至洗脱液无色止,抽干滤并干燥,得粉红色粉状沉淀物(b),过滤母液浓缩至小体积,使醇基本除尽,加入5%明胶溶液与鞣质沉淀,加至明胶鞣质复合物使之不再析出,加入95%乙醇使溶液含乙醇量达75%,放置冰箱过夜,过滤,滤液浓缩至干得样品(c),然后对各部a、b、c进行鉴别分析。

  2.3  a样品的鉴别

  对照a样品为桔黄色结晶,熔点188~189℃,加入70%乙醇加热下使全溶,加入少量活性炭脱色过滤,滤液放置冰箱过夜,析出白色结晶,过滤,洗涤,干燥得白色结晶熔点187~189℃,再重结晶1次,熔点188~189℃,与文献报道的卫茅醇熔点一致。

    雷公藤和昆明山海棠提取卫茅醇和合成卫茅醇的对照:①分别称取合成卫茅醇,提取卫茅醇5 mg溶解放1 ml的蒸馏水中,分别用微量层析点样管点样1.5 μl,置于丁醇:丙酮:水=40:50:10的展开缸中展开,展距14 cm,展完除去展开剂,先喷上0.1%高碘酸钠水溶液5 min后再喷联苯胺溶液,得一组蓝底白斑点层析谱。rf值为0.46。(见图1)。②雷公藤、合成卫茅醇、山海棠红外吸收光谱测定吸收峰一致。(见图2~4)。③测得混合熔点188~189℃。

  2.4  b 样品的鉴别

  对照雷公滕根和昆明山海棠根的95%乙醇提取液b样品,熔点>295℃以上,均能溶于乙醇、丙酮、氢氧化钠、碳酸氢钠中,微溶于氯仿,对三氯化铁-铁氰化钾试液呈蓝色,4氨基安替比林-铁氰化钾呈桃红色,香草醛-盐酸呈粉红色,提示本样品为多元酚类化合物。

  2.5  c样品的鉴别

  对照c样品为水溶物,经预测对费林试剂,氨性硝酸银试剂,a-萘酚试验呈阳性,提示含糖类化合物,继而把样品放入蒸发皿中,在水浴锅上蒸干,分别称取50 mg溶于5 ml蒸馏水中,分别用微量层析点样管点样2 μl,昆明山海棠样品3 μl,置于丁醇∶丙酮∶水-(40∶50∶10)的展开缸中展开,展距14 cm,展完除去展开剂,喷0.1%高碘酸钠水溶液5 min后再喷联苯胺试液,得一组蓝底白点图谱图。见图5。

  3  讨论

    从图1可以看出,95%乙醇提取液中的a样品为卫茅醇,经二次重结晶,得到熔点为188~189℃的结晶与文献报道一致。从薄层层析的rf值为0.46及图2~4红外吸收光谱图的对照可知,该物与已知的卫茅醇一致。
   
  从图5可以看出,95%乙醇提取液中的c样品有3个显色斑点,其中一个rf值(0.46)与卫茅醇的rf值一致,提示此物为卫茅醇(其余两个成分将另行研究报告)。
   
  卫茅醇从雷公藤中提取得到国外文献已有报道,到目前为止,还没有看到有关从昆明山海棠中取得卫茅醇的报道,我们的实验取得了并证实昆明山海棠中存在卫茅醇。
   
  通过实验可以看出,雷公滕根和昆明山海棠根在各相对应的分离过程中均能取得相对应的化学成分,这可从薄层层析预试、熔点的对照、红外吸收光谱测定对照上反映出来,我们认为雷公滕根和昆明山海棠根中所含的成分基本是一致的。因此,雷公藤和昆明山海棠在临床上的用途以及产生的副作用显然有相似之处。
   
  实验结果对进一步研究雷公藤及昆明山海棠在临床上的应用以及对进一步分离、提纯雷公藤及昆明山海棠所含的化学成分及研究各化学成分的结构将起到一定的参考作用。

【参考文献】
  1]苗抗立,张晓康,董 颖,等.雷公藤属植物化学成分的药理研究[j].中国现代临床医学,2005,4(4):35.

  [2]周激文,周争立,李文琦,等.昆明山海棠提取物的活性研究及其成分分析[j].中国中医药信息杂志,2002,9(5):44.

  [3]张航行,耿会玲,杨维霞,等. 昆明山海棠的化学成分及药理活性研究进展[j] . 动物医学进展,2002,23(6) :42.

  [4]孙卓然,刘 园.民族药昆明山海棠的生药学鉴定[j].华西药学杂志,2008,23(2):174.

  [5]王玉玺,李汉保,舒旭生,等.雷公藤叶的生药鉴定[j]. 中药材,1993,16(2):17.

  [6]阙慧卿, 耿莹莹.雷公藤化学成分的研究[j].中草药,2005,36(11) :52.

  [7]夏焱,高文远.雷公藤属药用植物的研究进展[j].中草药,2005,36(7):39.

  [8]尹新芹,张东升.雷公藤的临床作用进展[j].医学综述,2001,7(7):438.

  [9]王瑶瑶,于俊生. 中药拮抗雷公藤多甙抗生育活性的研究[j].吉林中医药,2008,28(2):143.

  [10]李贤光.昆明山海棠与雷公藤药理学对照研究①[j].昆明医学院学报,2006,27(2):107.

  [11]王诗鸿.雷公藤抗雄性生育作用研究进展[j].时珍国医国药,2005,16(11):1165.

  [12]刘保珍,禹小平.昆明山海棠浸膏提取工艺[j].中草药,2001,32(9):805.

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