作者：郭美仙， 刘明， 施贵荣， 何正春， 刘晓波
【摘要】 目的研究苦石莲对d-半乳糖胺(d-galn)、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响。方法苦石莲总提取物灌胃给药7 d后，用d-galn、酒精导致小鼠急性实验性肝损伤，检测小鼠血清谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)活性和肝脏系数。结果苦石莲对小鼠急性实验性肝损伤血清alt、ast活性和肝脏系数均有明显抑制作用(p<0.01，p<0.05)。结论苦石莲对d- galn、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤具有一定的保护作用。
【关键词】 苦石莲； 实验性肝损伤
abstract：objectiveto study the protective effect of caesalpinia minax hance against acute liver injury in mice made by d-galnactosamine and alcohol.methodsthe acute hepatic injury model made by d-galnactosamine and alcohol after i.g. mice the caesalpinia minax hance for 7 days, then the activities of alanine aminotransferase(alt) and aspartate aminotransferase(ast) in serum were examined. resultscaesalpinia minax hance could decrease the liver index(p<0.01，p<0.05) and the activities of alt and ast(p<0.01，p<0.05) in serum.conclusioncaesalpinia minax hance has protective effect against acute liver injury in mice.
key words：caesalpinia minax hance； acute liver injury
苦石莲为豆科植物喙荚云实属(南蛇簕)caesalpinia minax hance的干燥成熟种子。Www.11665.Com苦石莲性寒味苦,入心、脾、肾三经,具有散瘀止痛、清热、祛湿的功效,可用于治疗哕逆、痢疾、淋浊、尿血、跌打损伤［1］。在大理白族民间苦石莲种子入药有着悠久的历史,有很好的用药基础，常用于治疗胃肠道疾病、扁桃体炎、鼻炎、无名肿痛等，疗效显著。还用于治疗肝炎、腮腺炎、痢疾、风湿性关节痛、痧症、病毒性感冒发热、淋浊、尿血等［2］。本实验研究苦石莲对d-半乳糖胺(d-galn)、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响。
1 材料与仪器
1.1 药物苦石莲总提取物由大理学院药学院天然药物化学实验室提供（苦石莲购买于大理地区，经大理学院药学院马晓匡教授鉴定为云实属南蛇簕的干燥成熟种子）。
1.2 动物昆明种小鼠（普通级），雌雄各半，体质量18～22 g，由云南生物制药有限公司提供，合格证号：scxk（滇）2005-0007。
1.3 试剂联苯双酯滴丸（浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号：061003）；d-半乳糖胺（上海楷洋生物技术有限公司，批号：g0500）；酒精（天津市化学试剂三厂）；谷丙转氨酶(alt)测定试剂盒（四川省成都市迈克科技有限责任公司提供，批号：0907061）；谷草转氨酶(ast)测定试剂盒（上海荣盛生物技术有限公司提供，批号：20070725）。
1.4 仪器台式高速冷冻离心机（tl-16k，上海市离心机械研究所）；722型光栅分光光度计（上海第三分析仪器厂）；电子天平（el104，梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。
2 方法
2.1 对d-galn所致急性实验性肝损伤的影响［3～6］取健康小鼠84只，雌雄各半，随机分为6组，每组14只，分别为正常组、模型组、联苯双酯组(0.45g·kg-1)、苦石莲高剂量组(0.84 g·kg-1)、苦石莲中剂量组(0.56g·kg-1)、苦石莲低剂量组(0.28g·kg-1)。联苯双酯组、苦石莲高、中、低剂量组小鼠均按20ml·kg-1灌胃给药，正常组及模型组小鼠灌胃给等体积生理盐水，2次/d，连续给药7d。于第7天第2次给药1h后，除正常组外，其余各组小鼠均腹腔注射d-galn，0.45g·kg-1，正常组小鼠腹腔注射等体积蒸馏水。末次给药16h后摘眼球取血，分离血清，检测alt、ast活性。采血后，迅速颈椎脱臼处死小鼠，取出整个肝脏用生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，计算肝脏系数。
2.2 对酒精所致实验性肝损伤的影响［3，4，6］分组及给药方法同“2.1”项，于第7天第2次给药8h后，除正常组外，其余各组小鼠均灌胃给 50度酒精溶液,20ml·kg-1，正常组小鼠灌胃给等体积蒸馏水。末次给药4h后摘眼球取血，分离血清，检测alt、ast活性。取肝脏称重，计算肝脏系数。
2.3 计算肝脏系数肝脏系数=肝脏重量(mg)/体质量(g)×100%
2.4 数据处理所有数据均以±s表示，采用t检验观察其组间差异。
3 结果
3.1 苦石莲总提取物对d-galn所致小鼠急性实验性肝损伤的影响对血清alt、ast的活性和肝脏系数的影响。结果见表1。表1 苦石莲对d-galn所致小鼠肝损伤血清alt、ast和肝脏系数的影响（略）
由表1可知，与正常组比较，d-galn模型组血清alt、ast活性和肝脏系数显著升高(p<0.01)，表明造模成功;与模型组比较，苦石莲各剂量组均能明显抑制血清alt、ast和肝脏系数的升高，除低剂量组血清alt和肝脏系数无差异外，其余各组均有显著性差异（p<0.01或p<0.05)。结果显示苦石莲总提取物对d-galn所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
3.2 苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响对血清alt、ast的活性和肝脏系数的影响。结果见表2。表2 苦石莲对酒精所致小鼠肝损伤血清alt、ast和肝脏系数的影响（略）
由表2可知，与正常组比较，酒精模型组血清alt、ast活性和肝脏系数显著升高(p<0.01)，表明造模成功；与模型组比较，苦石莲各剂量组均能明显抑制血清alt、ast和肝脏系数的升高，除低剂量组肝脏系数无差异外，其余各组均有显著性差异（p<0.01或p<0.05)。结果显示苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
4 讨论
肝损伤是一种临床常见的危害人类健康的疾病，肝损伤涉及的病理因素比较广泛，如病毒、生物、药物、理化、酒精等，都可以导致肝损伤。当肝细胞受损时，细胞内alt、ast等会释放入血，血清alt目前仍被认为是反映肝损伤的敏感指标，alt绝大部分位于细胞浆，而ast则主要位于线粒体，少部分位于胞浆。肝损伤较轻时仅使细胞膜通透性增加，胞浆内alt释放入血；肝细胞受损严重时，线粒体内ast才释放入血。目前检测血清alt、ast活性和肝脏系数，仍作为判断肝损伤的程度和药物治疗肝损伤的效果的重要指标［5］。
d- glan是肝细胞内尿苷二磷酸葡萄糖的干扰剂。d- glan可造成肝弥漫性坏死或炎症, 是目前最接近人临床病毒性肝炎病理变化的模型。其损害肝细胞的机理是d- glan进入体内后与磷酸尿苷( udp)结合以形成udp- 半乳糖胺,致使尿嘧啶核苷耗竭及肝脏转录功能障碍, 从而使依赖生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物质合成受抑制, 限制了细胞器及酶的生成和补充, 细胞器和细胞膜受损、ca2+内流入细胞，从而造成肝细胞损伤, 严重的可造成肝细胞坏死［7］。酒精则是通过其代谢中间产物乙醛与生物大分子的功能基团结合从而干扰其功能, 当机体进入大量酒精后，激活氧分子产生自由基，使肝细胞膜的脂质过氧化和消耗还原性谷胱甘肽，另外，酒精大量脱氢氧化，使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，从而导致肝细胞损伤［8］。
实验结果表明，苦石莲对d-galn、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤血清alt、ast活性的异常升高具有显著的抑制作用,但具体的保肝作用机理还有待进一步研究。
【参考文献】
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