作者：张茂生， 潘卫东， 郁建平， 梁光义

【摘要】  　　目的研究黄叶地不容的生物碱成分。方法利用各种色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果从黄叶地不容块根中分离并鉴定了6个化合物：l-四氢巴马亭（i），番荔枝宁（ii），巴马亭（iii），紫堇定（iv），异紫堇定（v），东罂粟灵(vi)。结论化合物iv，v，vi为首次从该植物中分离得到，且vi为首次从该属植物中分离得到。

【关键词】  千金藤属； 黄叶地不容； 异喹啉生物碱

　　防己科（menisermaceae）千金藤属（stephania）植物中含有丰富的异喹啉类生物碱，有的已经开发为药物的原料。黄叶地不容stephania viridiflavens h.s.lo et m.yang为该属植物，主要分布于广西中部至西南部、贵州南部及云南文山地区；该植物含较多颅痛定（rotundine）是广西和云南提取这种生物碱的重要原料之一［1，2］。黄叶地不容的块根主治感冒头痛、胃痛、咽喉痛、痢疾、疮痈肿痛、外伤疼痛［3］。曾有报道对其化学成分进行研究［4，5］，但因产地不同等原因，其所含的成分有较大差异。wwW.11665.coM而由于目前还没有对贵州产的黄叶地不容化学成分进行研究的文献报道，为了对该民族药用植物资源的深度开发打下基础，我们对其生物碱类化学成分进行了较系统的研究，并从其块根中分得6种生物碱，经鉴定为：l-四氢巴马亭( l-tetra hydropalmatine, i )，番荔枝宁( xylopinine, ii )，巴马亭( palmatine, iii )，紫堇定( corydine, iv )，异紫堇定( isocorydine, v )，东罂粟灵( orientaline, iv )；化合物iv，v，vi为首次从该植物中分离得到，且vi为首次从该属植物中分离得到。

　　1  材料与仪器
   
　　药材于2007-10采自贵州南部，经贵阳医学院生药学教研室龙庆德副教授鉴定为黄叶地不容stephania viridiflavens 的块根。标本留种于贵州省·中国科学院天然产物化学重点实验室。核磁共振波谱仪：inova 400 mhz（美国varian公司），以tms为内标；熔点仪：xt2型显微熔点测定仪（温度计未校正，北京泰克仪器有限公司）；质谱仪：美国惠普公司ms 5973 型质谱仪。分离材料：柱层析用硅胶均为中国青岛海洋化工厂分厂生产，mci及葡聚糖凝胶 sephadex lh-20为进口材料；层析用溶剂：石油醚、氯仿、醋酸乙酯、丙酮和甲醇为工业试剂经重蒸处理，其它试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  提取和分离黔产黄叶地不容干燥的块根粗粉9.5 kg，以95%乙醇回流提取4次，合并提取液，减压回收乙醇至基本无醇味。加入适量的水以及2%的h2so4调ph（3～4）将样品捏溶，过滤，就酸水层先以氯仿萃取，萃取后的酸水层以浓氨水调ph（10～11），再用氯仿萃取。氯仿萃取得到的两部分分别通过各种溶剂系统冲洗硅胶柱、氨基硅胶柱，以及sephadex lh-20柱等，最终得到6个化合物。

　　2.2  结构鉴定

　　2.2.1  化合物i淡黄色块状结晶，mp 104～106℃(石油醚-醋酸乙酯)，［α］ 22d-752°　(氯仿)，ei-ms: m/z 355 ［m］+, 190, 164, 149;1h-nmr (400 mhz，cdcl3) δ: 6.89 (1h, d, j = 8 hz, 12-h), 6.80 (1h, d, j  = 8 hz, 11-h), 6.74 (1h, s, 4-h), 6.30 (1h, s, 1-h), 4.25和3.55 (2h, ab, d, j  = 16 hz, c13-h2), 3.90, 3.88, 3.86, 3.86 (12h, och3×4), 2.66 (2h, m, c5-h2);13c-nmr (100 mhz, cdcl3) δ: 150.19 (c-9), 147.33 (c-2), 147.30 (c-3),  144.91 (c-10), 129.56 (c-14a), 128.60 (c-12a), 127.61 (c-4a), 126.68 (c-8a), 123.83 (c-12), 111.16 (c-4), 110.76 (c-11), 108.37 (c-1), 60.13 (c-13a), 59.25 (c9-ome), 55.97 (c3-ome), 55.76 (c2,10-ome), 53.94 (c-8), 51.46 (c-6), 36.94 (c-13), 29.03 (c-5)。以上数据与文献［6，7］报道基本一致，故鉴定该化合物为左旋四氢巴马亭( l-tetrahydropalmatine )。

　　2.2.2  化合物ii淡黄色块状结晶，mp 191～193℃ (氯仿-甲醇)，［α］18d -912°(氯仿), ei-ms: m/z 355 ［m］+, 190, 164; 1h-nmr (400 mhz，cdcl3) δ: 6.76 (1h, s, 12-h), 6.68 (1h, s, 4-h), 6.63 (1h, s, 2-h), 6.59 (1h, s, 1-h), 3.96和3.69 (2h, ab, d, j = 15 hz, c8-h2), 3.91, 3.88, 3,87, 3.86 (12h,  och3×4); 13c-nmr (100 mhz，cdcl3) δ: 147.45 (c-2), 147.30 (c-3), 147.26 (c-10), 147.22 (c-11), 129.64 (c-14a), 126.61 (c-4a), 126.23 (c-8a), 126.16 (c-12a), 111.16 (c-4), 111.14 (c-12), 108.80 (c-9), 108.29 (c-1), 59.50 (c-14), 58.17 (c-8), 55.91, 55.82, 55.79, 55.72 (ome×4), 51.30 (c-6), 36.34 (c-13), 28.97 (c-5). 以上数据与文献［7］报道基本一致，故鉴定该化合物为番荔枝宁( xylopinine )。

　　2.2.3  化合物iii黄色针状结晶 (氯仿)，mp 195～197℃(氯仿)，esi-ms: m/z 351　［m］ +;1h-nmr (400 mhz，cdcl3) δ: 9.87 (1h, s, 8-h), 8.56 (1h, s, 13-h)，7.96 (1h, d, 12-h), 7.94 (1h, d, 11-h), 7.44 (1h, s, 1-h), 6.79 (1h s, 4-h)，5.01 (2h, t, 6-h)，4.20, 4.05, 4.02, 3.96 (12h, och3×4), 3.25 (2h, t, 5-h); 13c-nmr (100 mhz，cdcl3) δ: 151.9, 150.12, 149.20, 145.14, 144.16, 137.74, 133.34, 127.93, 126.01, 123.32, 121.68, 119.89, 118.59, 110.54, 108.03, 62.12, 56.71, 56.56, 56.07, 56.07, 26.87. 以上数据与文献［6］报道基本一致, 故鉴定该化合物为巴马亭( palmatine )。

　　2.2.4  化合物iv无色针状结晶, mp 117～119℃ (石油醚-醋酸乙酯),［α］18d+692°(氯仿)，ei-ms: m/z 341 ［m］+, 341, 326, 310, 268; 1h-nmr (400 mhz，cdcl3) δ: 8.72 (1h, s, c1-oh), 7.09 (1h, d, 9-h), 6.88 (1h, d, 8-h), 6.70 (1h, s, 3-h), 3.91 (3h, s, c10-och3), 3.91 (3h, s, c3-och3), 3.74 (3h, s, c11-och3), 3.14 (1h, m, 6a-h), 3.03 (2h, m, 4-h), 2.9和2.67 (2h, ab, d, j = 14 hz,7-h), 2.46 (2h, m, 5-h); 13c-nmr (100 mhz，cdcl3 ) δ: 151.67 (c-10), 148.97 (c-2), 143.63 (c-1), 142.07 (c-11), 130.74 (c-11a), 128.15 (c-7a), 126.36 (c-3a),  124.23 (c-8), 123.93 (c-1a), 119.13 (c-1b), 111.15 (c-9), 110.66 (c-3), 62.69 (c-6a), 61.90 (c11-ome), 55.88 (c2,10-ome), 52.71 ( c-5 ), 44.01 (n-me), 35.47 (c-7), 29.03 (c-4). 以上数据与文献［7］报道基本一致，故鉴定该化合物为紫堇定( corydine )。

　　2.2.5  化合物v白色柱状结晶 (石油醚－醋酸乙酯), mp 183～184℃ (石油醚-醋酸乙酯),［α］25d +480° (氯仿)，ei-ms: m/z 341 ［m］+ , 326, 310, 295. 1h-nmr (400 mhz，cdcl3) δ: 8.85 (1h, s, c11-oh), 6.87 (1h, d,   8-h), 6.84 (1h, d, 9-h), 6.70 (1h, s, 3-h), 3.92 (3h, s, c10-och3), 3.91 (3h, s, c2-och3), 3.71 (3h, s, c1-och3), 3.15 (1h, m, 6a-h), 3.03 (1h, m, 4-h), 2.79 (2h, ab, d, j = 14 hz, 7a-h), 2.54 (3h, s, n-ch3), 2.47 (2h, m, 5-h); 13c-nmr (100 mhz，cdcl3)δ: 151.19 (c-2), 149.40 (c-10), 143.92 (c-11), 142.07 (c-1), 130.14 (c-3a), 129.99 (c-7a), 129.22 (c-1b), 125.87 (c-1a), 120.13 (c-11a), 118.93 (c-8), 111.06(c-3), 110.83 (c-9), 62.86 (c-6a), 62.06 (c1-och3), 56.09 (c10-och3), 55.84 (c2-och3), 52.72 (c-5), 43.95 (n-ch3), 35.89 (c-7), 29.37 (c-4). 以上数据与文献［6，7］报道基本一致, 故鉴定该化合物为异紫堇定( isocorydine )。

　　2.2.6  化合物vi无定形黄色粉末 (氯仿-甲醇), ［α］24d +80°(氯仿), esi-ms: m/z 329 ［m］ +, ei-ms: m/z 192, 177; 1h-nmr (400 mhz, cdcl3) δ: 6.74 (1h, d, j = 1.6 hz ,c2′ -h), 6.72 (1h, d, j = 8.0 hz ,c5′ -h), 6.57 (1h, dd, j = 1.6, 8.0hz, c6′-h), 6.54(1h, s, c5-h), 6.30(1h, s, c8 -h), 4.88(2h, br, 7, 4′-oh), 3.84 (3h, s, c3′ -och3), 3.84 (3h, s, c3′ -och3), 3.76 (1h, t, j = 6.0 hz ,c1 -h), 3.23 (1h, m, c3-ha), 3.11 (1h, dd, j = 6.8, 14.4 hz, c9-ha), 2.87 (1h, m, c4-ha), 2.83 (1h, m, c3-hb), 2.80 (1h, dd, j = 6.8, 14.4 hz, c9-hb), 2.64 (1h, m, c4-hb), 2.51 (1h, s, n-ch3); 13c-nmr (100 mhz, cdcl3) δ: 145.54 (c-3′), 145.44 (c-6), 145.26 (c-4′), 143.50 (c-7), 132.14 (c-1′), 128.68 (c-8c), 124.10 (c-4a), 120.91 (c-6′), 115.68 (c-2′), 113.88 (c-8), 110.54 (c-5), 110.51 (c-5′), 64.36 (c-1), 55.80 (c3′ -och3), 55.74 (c6-och3), 46.19 (c-3), 41.79 (n-ch3), 40.66 (c-9), 24.30 (c-4)。以上碳氢的化学位移归属经cosy，hmqc，hmbc谱得以确证, 该化合物的数据与文献［8］报道基本一致，故鉴定该化合物为东罂粟灵( orientaline )。

　　3  讨论
   
　　在植物体中生物合成的系统规律性比较明显，本次分到的化合物也证明了这一点。千金藤属植物是苄基异喹啉类生物碱的重要分布中心［9］，这点也得到了验证。本研究为从天然的苄基异喹啉类生物碱中寻找具有一定生物活性的先导化合物提供了基础，同时也为黄叶地不容药材的质量控制以及综合开发利用提供了部分科学依据。
   
　　致谢：核磁和质谱数据分别由贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室张建新副研究员和王道平老师测定！

【参考文献】
  　　［1］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志，第30卷，第1分册［m］. 北京：北京科学出版社，1996：40．

　　［2］贵州植物志编辑委员会.贵州植物志，第8卷［m］.成都：四川民族出版社，1988：11.

　　［3］何顺志，徐文芬. 贵州中草药资源研究［m］.贵阳：贵州科技出版社，2007：292.

　　［4］方圣鼎，王怀女, 陈嬿, 等. 千金藤属生物碱的研究ii——黄叶地不容中的生物碱［j］.中草药, 1981，12 ( 2 )：1.

　　［5］方圣鼎，陈嬿,王怀女,等.黄叶地不容中的细胞毒成分［j］. 中草药，1996，24(9)：457.

　　［6］杨秀伟. 实用天然产物手册生物碱，第1版［m］.北京：化学工业出版社，2005：169.

　　［7］龚运淮, 丁立生. 天然产物核磁共振碳谱分析，第1版［m］.昆明：云南科技出版社，2006：719．

　　［8］barton, d.h.r. . phenol oxidation and biosynthesis. part xxll. the alkaloids of erythrina lysistemon, e. abyssinica, e. peoppigiana, e. fusca. and e. lithosperma; the structure of erythratidine［j］．j.c.s. perkin 1, 1973：874．

　　［9］黄建明, 郭济贤, 潘胜利.千金藤属植物化学分类的初步研究［j］.华西药学杂志，1999，14 ( 2 )：108