作者：万明珠，梁逸曾，赵晨曦，陈爱明，曾茂茂

【摘要】  　　目的对10个来源不同的中药温莪术挥发油的化学成分进行定性定量分析，建立指纹图谱。方法采用气相色谱-质谱联用仪（gc-ms）并运用化学计量学方法辅助定性，运用“计算机辅助相似性评价系统”软件建立指纹图谱及其共有模式。结果10个样品共鉴定出34个共有组分，主要共有成分为桉叶素（eucalyptol）、榄香烯（elemene）、莪术烯（curzerene）、β-榄烯酮（β-elemenone）、吉马酮（germacrone）、莪术二酮（curdione）、新莪术二酮（neocurdione）。所建立指纹图谱共有模式结果良好。结论指纹图谱和定性分析相结合是温莪术质量控制的一种好方法。

【关键词】  气相色谱-质谱联用 温莪术 挥发油 纹图谱共有模式

　　abstract：objective to analyze the chemical composition in volatile oil from curcuma aromatic salisb. and establish the chromatographic fingerprints of the oil samples. methodsvolatile oils were investigated by gas chromatography mass spectrometry (gc-ms) combined with chemometrics method.the chromatographic fingerprints as well as its common model was established by drawing assistance from “computer aidede similarity evaluation”. resultstotally thirty-four common compounds were identified, of which eucalyptol, elemene, curzerene, β-elemenone,germacrone,curdione and neocurdione were the major compounds. there was a little difference in the chemical composition among the ten samples but in percentages on many levels.on the other hand,the common model of chromatographic fingerprints was believable.conclusionthe common model of chromatographic fingerprints established on the ten samples provides theoretical basis for appraisal and quality control of commercial volatile oil from curcuma aromatic salisb..

　　key words： gas chromatography-mass spectrometry (gc-ms);   curcuma aromatica salisb.;   volatile oil;   common model of chromatographic fingerprints
   
　　中药温莪术、温郁金和片姜黄为姜科姜黄属植物温郁金curcuma wenyujin y.h.chen et c.ling不同部位经由不同的炮制方法而成的3种中药，其性味与功能既相似又不同［1，2］，如何界定三者的有效成分和建立科学的质量控制标准成为研究的难题；另外，温莪术curcuma aromatica salisb.又与广西莪术curcuma kwangsiensis s. g.lee et c. f. liang、蓬莪术curcuma phaeocaulis val.归为莪术类，此3种中药虽植物来源皆不相同，但其行为与功能极其相似，亦难辨别。WwW.11665.cOm本文采用气相色谱-质谱联用法对温莪术挥发油的化学成分进行分析，建立温莪术挥发油的标准指纹图谱和共有模式，从整体上反映药品内在成分，易于对中药温莪术进行质量控制。

　　1  仪器与材料
   
　　6890/5973n型气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）；正己烷（ar，500 ml/瓶，国药集团化学试剂有限公司）。10个温莪术挥发油样品由佳木斯大学药学系生药教研室方洪壮教授和天瑞制药公司提供。

　　2  方法

　　2.1  测定条件

　　2.1.1  色谱条件hp-5ms弹性石英毛细管柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）；载气:he；载气流速:1.0 ml·min-1；进样口温度:280 ℃；采用程序升温，初始温度80 ℃，以4 ℃·min-1速率升至220 ℃；进样量:1 μl；分流比为50∶1。

　　2.1.2  质谱条件离子源:电子轰击(ei)离子源；电子能量:2 400 ev；离子源温度:230 ℃；接口温度:280 ℃；扫描范围:30～450 amu；扫描速度:3.46 scans·s-1。

　　2.2  数据处理数据分析所采用程序均由中南大学中药现代化研究中心开发研制(matlab6.5编写)。 所分辨的质谱在nist02标准质谱库中检索。对于部分重叠峰，则采用化学计量学方法进行解析得到纯色谱峰和纯质谱后，再与质谱库对照定性。采用峰面积归一化法确定各成分的相对含量。

　　3  结果

　　3.1  温莪术挥发油定性定量分析在上述的实验条件下，经过gc-ms分析得到10个温莪术挥发油的化学组分总离子流图见图1，色谱峰基线分离情况较理想, 但也有个别色谱峰有重叠现象，影响定性结果的准确性和可靠性。本文采用直观推导式演进特征投影法 ［3～6］对重叠色谱峰进行解析并结合文献［7～9］鉴定出10个温莪术挥发油样品中34个组分，占各挥发油样品总量的78.03%以上。结合10个温莪术挥发油的指纹图谱（图1）可以初步判断10个不用来源样品具有高度相似性，为建立共有模式提供了先行依据，预期了共有模式的可靠性。本文并采用峰面积归一化积分法定量，定性与定量结果见表2。表2  温莪术挥发油组分的定性定量结果

　　3.2  温莪术挥发油gc-ms指纹图谱共有模式的建立中药指纹图谱技术与传统质量控制模式不同，它从整体上反应中药复杂成分的面貌，“模糊性”和“整体性”是指纹图谱的基本特征，也是体现指纹图谱相似性的依据。作为一种有效的质量控制手段，国家药典委员会2002-04-27颁发的《中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行）》指出“指纹图谱的评价指标是供试品指纹图谱与该品种对照用指纹图谱（共有模式）及供试品之间指纹图谱的相似性”。共有模式的建立通常有均值法和中位数法两种，为增加结果的可靠性，两种方法均被本研究采用。

　　具体做法如下:使用“计算机辅助相似性评价系统”软件对所得到的10个温莪术挥发油原始指纹图谱进行基线校准和保留时间漂移校准后得到如图1的温莪术挥发油标准指纹图谱，在此基础上建立标准指纹图谱的共有模式（见图2）。计算各挥发油样品指纹图谱与建立的标准指纹图谱共有模式的相似度，具体结果列于表1中。根据国家药典委员会颁布的要求，相似度计算结果在0.9～1.0之间符合要求。按照样品编号1～10的顺序，除3号样品相似度偏低外（>0.93）其余9个温莪术挥发油样品相似度均达到0.96以上，符合标准要求，因此作者并未进行剔除3号样品二次建立共有模式的工作。此法建立的共有模式简单可靠，可用于质量控制。表1  温莪术样品指纹图谱的相似性分析（略）

　　4  讨论
   
　　所得温莪术挥发油以桉叶素（eucalyptol）、榄香烯（elemene）、莪术烯（curzerene）、β-榄烯酮（β-elemenone）、吉马酮（germacrone）、莪术二酮（curdione）、新莪术二酮（neocurdione）为主要成分，它们的含量均占各挥发油样品鉴定总量的68%以上，其中又以curzerene(莪术烯)和curdione(莪术二酮)为主（44%以上），此二者峰（图2a峰、b峰）可作为参照峰辅助共有模式图谱共同进行质量控制和产品鉴定。
   
　　由于姜黄属品种间挥发性成分差异较大,特征成分的选择趋于片面，建立几种药材共有指纹图谱的难度较大，更适宜建立单一品种的挥发油指纹图谱［10］。综合本实验室采集样品的条件，本实选定温莪术作为单一研究对象建立其指纹图谱，以期有助于温莪术的质量控制。在今后的工作中，可以采集姜黄属的其它品种作为指纹图谱的研究对象，建立姜黄属植物挥发油指纹图谱库，为我国传统中药现代化生产实践提供实践依据。
   
　　目前，简单的测定几种特征物质、辨别几个特征峰控制中药质量的传统方法存在一些不足，它缺乏从整体上把握中药复杂体系的质量信息，因此建立系统的、全面的反映中药化学成分的指纹图谱成为一种有效的中药质量评价和控制的手段。
   
　　本文建立的中药温莪术质量评价和控制的方法，考虑了指纹图谱（共有模式）及其组分定性两方面，可以说是指纹图谱（共有模式）与组分定性结合的双重控制。相比单一手段而言，它既从大处着眼又在细节把握，为温莪术质量控制提供新的质量控制手段。
   
　　致谢：感谢佳木斯大学药学系生药教研室方洪壮教授和天瑞制药公司提供温莪术挥发油样品！

【参考文献】
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