作者：刘莉，刘强，吴苗，张宏伟
【摘要】 目的 比较化橘红不同粒径粉末的粉体学特性和体外溶出特点，探索超微粉碎技术在中药化橘红中的应用。方法 采用激光粒度分析仪测定粉末粒径;采用生物显微镜观察不同粒径粉末的显微特征;采用固定漏斗法测定休止角;采用高效液相色谱法测定化橘红不同粒径粉末中柚皮苷的体外溶出度。结果 化橘红超微粉碎前后粉末的粉体学特征、有效成分的溶出量差异较大，超微粉中柚皮苷的相对累积溶出率高于普通粉碎所得粉末。结论 化橘红微粉化可使植物药细胞破壁，促进有效成分的溶出。
【关键词】 化橘红;柚皮苷;超微粉碎;溶出度
abstract:objective to compare the powder characteristics and dissolution rate of exocarpium citri grandis in different diameters, and explore the application of ultramicro pulverization technology to e. citri grandis.methods the particle size was detected by laser particle analyzer, and microscopic characteristics were surveyed by the biological microscope. the angle of repose was measured by fixed funnel, and the content of naringin was determined by hplc.results significant differences were observed after micronization in powder characteristics, dissolution rates and concentrations of naringin, which were higher than those in the common powder.conclution ultramicro pulverization is helpful for the cell disruption and dissolution of the active components from e. citri grandis.
key words:exocarpium citri grandis; naringin; micronization; dissolution rate
超微粉碎技术是近20年 发展 起来的一项高新技术，尤其应用于中药研究，显现出特有的优势。WWw.11665.CoM植物药有效成分需通过细胞壁才能发挥作用，而超微粉碎可使细胞壁破裂，有效成分直接溶出，从而达到减小用药剂量，提高生物利用度的目的[1，2]。
化橘红系由芸香科植物化州柚citrus grandis ‘tomentosa’或柚citrus grandis(l.) osbeck未成熟或近成熟的果实外果皮干燥而成，功能散寒、燥湿、利气、消痰，主治风寒咳嗽、喉痒痰多、实积伤酒、呕恶痞闷等证，又名“化州橘红”、“化州陈皮”、“柚皮橘红”等。化橘红是广东特产药材，以广东化州地区产者为上品，辛香味特别醇厚[3]。笔者采用超微粉碎机对化橘红进行超微粉碎，并与普通粉碎方法所得化橘红粉末进行了粉体学性质和有效成分溶出的比较研究，为化橘红超微粉碎产业化研究提供理论依据。
1 材料
1.1 仪器
fw型高速万能粉碎机 (武汉理科光电技术有限公司);bmf6超微粉碎机(济南倍力粉技术工程有限公司);nikon eclipse e600生物显微镜;nikon coolpix 4500数码相机;jl9200激光粒度分析仪(济南微纳颗粒技术有限公司);sk1200h超声波提取器(上海科导);rc6溶出度测定仪器(天津市国铭医药设备有限公司);agilent 1100高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司，美国惠普hp 8453紫外检测器);bp110s 电子 天平(德国)。
1.2 试药
化橘红(购自广东广弘药材有限公司，经南方医科大学中医药学院中药鉴定教研室张宏伟教授鉴定为芸香科植物化州柚citrus grandis ‘tomentosa’近成熟果实的外果皮);柚皮苷对照品(购自 中国 药品生物制品检定所，批号：111702200607);甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 不同粒径化橘红粉末的制备
取化橘红药材1 kg，40 ℃干燥，经高速万能粉碎机粉碎，分别过80目、200目、300目(网孔直径45 μm)筛，得80～200目、200～300目之间的粉末。取一部分粉末，再经超微粉碎，分别过300目、400目(网孔直径30 μm)筛，得300～400目及400目以下的粉末。
2.2 粉末粒径的测定和显微特征观察
取适量药粉样品置于激光粒度分析仪容器内，采用无水乙醇作为分散剂，并将样品进行超声分散，然后测定其粒径。结果显示，超微粉碎后粉末的d10、d50、d90均显著减小(见表1)。
将4种粉末分别混悬于水中，超声分散，取此混悬液滴于载玻片上，于生物显微镜下观察粉末显微特征。结果显示，80～200目和200～300目的粉末颗粒较大，粒径不均匀，并可见原药材的显微特征;300～400目及400目以下粉末粒度明显变小，且大小较为均匀，几无完整的细胞存在(见图1)。
2.3 休止角(θ)的测定
固定漏斗法：将漏斗固定于水平放置的绘图纸上方，漏斗下口距绘图纸高度为h，小心地将微粉倒入漏斗中，直到漏斗下形成的圆锥体的尖端触到漏斗下口为止，圆锥体的直径为2r，休止角(θ)由公式tgθ=h/r求出。
4种化橘红粉末的休止角的测定结果表明化橘红粉末流动性并无太大改变(见表2)。 表1 粉末粒径分析结果表2 休止角(θ)测定结果
2.4 化橘红不同粒径粉末中柚皮苷相对累积溶出率的比较研究
2.4.1 色谱条件与系统适用性试验[5] thermo hypersil gold c18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以甲醇醋酸水(体积比35∶4∶61)为流动相;检测波长为283 nm。
2.4.2 对照品溶液的制备 精密称取柚皮苷对照品0.02000 g，置100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得对照品储备液。精密吸取储备液3 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液(每1 ml含柚皮苷60 μg)。
2.4.3 标准曲线的制备 分别精密吸取对照品贮备液0.3、0.6、1.2、2.4、4.8 ml置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。各精密吸取10 μl注入液相色谱仪中，测得峰面积，以对照品质量浓度(x)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程y=1188754x+23.754，r=0.999 9，柚皮苷在0.006～0.096 mg·ml-1范围内线性关系良好。
2.4.4 溶出试验[4] 准确称取不同粒径粉末各3.0 g，进行体外溶出实验(溶出介质：人工胃液，体积为1 000 ml)分别在10、15、20、30、45、60、90、120 min时取样5 ml，取出后补充相应的溶出介质5 ml，溶出条件：转速100 r·min-1，温度为37 ℃。
2.4.5 供试品溶液的制备 精密量取“2.4.4”项下样品溶液2 ml于5 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得。
2.4.6 柚皮苷相对累积溶出率测定结果 以所测得柚皮苷溶出的最大值对应的浓度做为100%，其他粉末溶出浓度与之相对比，比较不同粒径化橘红粉末中柚皮苷的相对累积溶出率，以相对累积释放百分率为纵坐标，时间为横坐标作图(见图2)，由图可知，不同粒径化橘红粉末柚皮苷在不同时间的相对累积溶出率有明显差异，且粒径越小的粉末柚皮苷越容易溶出。
3 讨论
3.1 激光粒度仪测定结果表明，超微粉的d10、d50、d90均显著小于普通粉碎所得粉末，其直径小于细胞的直径，故可认为细胞基本上破壁完全。显微测定的结果也可以看出：普通粉颗粒大小不均，植物细胞较完整;而超微粉颗粒较均匀，几无完整细胞存在，说明超微粉碎可使植物药的破壁率大大提高。
3.2 化橘红不同粒径粉末的流动性并无太大改变，这与已有的其他药材超微粉研究的报道结果不同，如在当归[2]、女贞子[6]的研究中均为超微粉流动性变差，笔者也进行过肉桂和川芎的超微粉研究，发现对于含挥发油类的药材，超微粉碎后其流动性均没有太大的改变，这可能与药材本身含有的挥发油诱发的药材黏性有关。
3.3 溶出实验初始阶段(0～20 min)，粒径小的粉末柚皮苷的溶出反而缓慢，可能与粉末粉碎后短暂的团聚有关，提示在超微粉的储放过程中应注意团聚现象;0.5 h后，超微粉碎粉末有效成分溶出逐渐增加，最终柚皮苷的溶出量大于普通粉碎所得粉末，说明超微粉碎促进了化橘红有效成分的溶出。
【 参考 文献 】
[1] 邵林,邵新. 超微粒粉碎技术对部分中药疗效的作用[j].时珍国医国药，2007,18(7):45-47.
[2] 孙强,何应.当归超微粉的药剂学研究[j].
