作者：宋建芳,边宝林,王宏洁
【关键词】 黄连解毒汤;药理作用;老年性痴呆;综述
黄连解毒汤出自《肘后方》,系清热解毒代表方剂,由黄连、黄柏、黄芩、栀子组成,主治一切实热火毒、三焦热盛之证[1]。现代药理研究表明,黄连解毒汤对肿瘤、脑缺血、糖尿病等疾病具有良好作用,尤其在老年性痴呆(ad)方面的报道更多。笔者在参考大量文献的基础上,分类整理,总结了黄连解毒汤在ad的药理研究进展,为相关研究提供参考。
1 抗炎
免疫性疾病与年龄的增长有正相关性,机体的免疫防御、免疫监视、免疫稳定三大功能障碍,会导致免疫性疾病增加。ad患者胸腺激素水平明显降低,白细胞介素-1(il-1)过度表达导致神经胶质细胞增生,诱导β-淀粉样蛋白前提基因(β- app)表达增加,肿瘤坏死因子(tnf-α)在ad患者血清中水平升高,而tnf-α对神经细胞有毒性作用[2]。黄连解毒汤一直以来即用于治疗急性传染性疾病和感染性疾病,现代药理学研究表明其具有良好的抗菌、消炎、提高免疫功能的作用。秦氏等[3]研究表明,黄连解毒汤能明显降低毛细血管通透性,对二甲苯诱发的小鼠耳廓水肿有显著影响,同时对醋酸所致的小鼠扭体反应和热刺激阈值均有显著作用,表明其有抗炎镇痛作用;另外,还能显著对抗腹腔注射(ip)醋酸引起的毛细血管通透性升高,表明其抗炎作用与降低毛细血管通透性有关[4-5]。WWW.11665.cOM
王氏等[6]通过实验发现,黄连解毒汤能抑制角叉菜胶所致小鼠气囊内白细胞游出,减少前列腺素e2(pge2)生成,还可抑制脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞生成il-1和一氧化氮(no),从而揭示了黄连解毒汤抗炎作用机理是抑制il-1、no、pge2等炎症因子的生成。有学者从血清药理学角度研究,发现黄连解毒汤含药血清不仅能抑制非致炎状态下中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附,而且抑制致炎因子所诱导的中性粒细胞与血管内皮细胞粘附作用增强[7]。方氏等[8]研究黄连解毒汤对ad大鼠治疗作用时,发现其对tnf-α、tnf-γ、白细胞介素-2 (il-2)3种炎症细胞因子具有显著的抑制作用,这为黄连解毒汤在ad的应用上提供了药理研究依据。
为研究黄连解毒汤抗炎分子和靶点,龙氏等[9]运用计算机辅助药物设计(cadd)研究黄连解毒汤与炎症靶点环氧化酶2 (cox-2)、ikk蛋白激酶亚基(ikk-2)、磷酸二酯酶(pde-4)受体的相互作用,结果发现,黄连解毒汤中28个化学成分分子与2个以上靶点存在作用效应,其中10-乙酰京尼平苷和红景天苷对3个靶标均呈现抑制作用。从而为黄连解毒汤抗炎作用药效学的分子机制提供了依据。
2 抗氧化、消除自由基
在人体衰老的自然过程以及脑缺血状态下,机体内会有大量自由基产生。因自由基有极强的氧化能力,破坏细胞膜的完整性,损伤线粒体、脱氧核糖核酸(dna)、核糖核苷酸(rna),所以,消除自由基可延缓衰老,预防ad。实验表明,黄连解毒汤具有抗氧化、减少自由基的作用[10]。郭氏等[11]发现,黄连解毒汤能够预防或治疗因高热或中毒引起的神昏,对东莨若碱所致记忆障碍亦有明显的改善作用。认为黄连解毒汤作为抗衰老药应用有进一步深入研究的价值。王氏等[12]实验表明,黄连解毒汤体外给药能明显抑制红细胞自氧化和过氧化氢(h2o2)所致红细胞溶血,并抑制小鼠肝匀浆自发性或fe2+-vitc诱发的脂质过氧化反应,对h2o2所产生的羟自由基亦有直接的清除作用。徐氏等[13]研究发现,黄连解毒汤提取物2.0、4.0、8.0 g/kg能显著降低脑缺血小鼠大脑皮质及海马组织中丙二醛(mda)的含量,显著增加脑缺血小鼠脑中谷胱甘肽(gsh)的含量;能显著提高脑缺血小鼠大脑皮质及海马组织中超氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)、过氧化氢酶(cat)的活力,表明其提取物对脑缺血小鼠脑组织有很强的抗氧化作用。另外,吴氏等[14]通过提取分离得到黄连解毒汤有效部位,运用多发性脑梗死(mci)大鼠脂质过氧化损伤模型,进一步表明了黄连解毒汤可以提高模型动物脑匀浆sod、铜锌超氧化物歧化酶(cu-znsod)、cat、gsh-px、谷胱甘肽s转移酶(gst-st)活性,提高gsh含量,降低mda、乳酸脱氢酶(ldh)的含量与活性。吴氏等[15-18]还通过体外观察黄连解毒汤对多种机制损伤的大鼠皮层神经元的保护作用,发现黄连解毒汤有效部位能减少模型ldh漏出率,提高细胞sod活性,减少mda和no生成,对培养神经细胞自由基损伤、缺血性损伤、谷氨酸兴奋毒性等具有显著的保护作用,其机制可能与降低no含量,抗过氧化作用有关。
还有学者从交叉配伍及血清药理学的角度,比较和分析黄连解毒汤中抗氧化作用的物质基础。谢氏等[19]观察了黄连解毒汤交叉配伍对活性氧自由基(h2o2、o2-)的清除作用,结果黄连解毒汤及交叉配伍提取液对h2o2、o2-均具有清除作用,而且黄连解毒汤全方与单味药及交叉配伍相比较,其清除作用最强。不但表明了黄连解毒汤的抗氧化作用,而且为复方用药提供了依据。宋氏等[20]以含药血清对小鼠肝匀浆体外生成mda的抑制作用为指标测定小鼠ip黄连解毒汤及单味药所得含药血清对mda生成作用的经时过程,并考察黄连解毒汤含药血清、单味药煎剂及小檗碱、黄芩苷抑制mda生成作用的剂量-效应关系。结果发现,黄连解毒汤体内抗氧化作用强于各单方。其中黄芩苷可能是黄芩药液和含药血清中抗氧化成分之一,而小檗碱可能与含药血清抗氧化作用无关。
3 脑神经保护和抗脑缺血
我国是高血压病、脑血管疾病的高发地区,约有30%中风患者可出现智能减退乃至发展为ad。在日本,黄连解毒汤的一个重要的应用就是脑血管疾病[21]。目前无论是药理实验还是临床实践都表明黄连解毒汤对脑缺血型ad具有良好的治疗和预防作用。通过药理研究发现,黄连解毒汤还能减少脑中自由基终产物mda含量、增加大脑皮质和海马组织脑血流量、对脂质过氧化反应具有抑制作用、增强海马区星形角质细胞cu-zn sod活性,减少海马区神经元的氧化应激、废除局部缺血诱导的m受体的减少和羟(基)吲哚乙酸水平的增加,抑制暂时缺血诱导的胆碱能突触机能障碍和5-羟色胺能突触前的机能亢进,进而保护神经,促进脑缺血动物学习记忆行为[22-24]。徐氏等[25]通过跳台、避暗实验,也发现黄连解毒汤能改善脑缺血小鼠学习记忆行为,能显著减少脑缺血小鼠脑中mda的含量。黄连解毒汤股静脉给药能增加大鼠大脑皮质和海马组织中脑血流量,进一步表明了黄连解毒汤能促进脑缺血动物学习记忆行为,其作用机制与减少脑中自由基终产物mda含量、增加大脑皮质和海马组织脑血流量有关。吴氏等[26-27]用大孔树脂技术制备了黄连解毒汤有效部位,发现其可明显减轻单侧大脑中动脉阻塞大鼠神经症状,减少脑梗死范围,还能显著降低双侧颈总动脉结扎大鼠血脑屏障毛细血管通透性;该有效部位还可延长双侧颈总动脉反复缺血再灌注小鼠的断头张口喘气时间,降低脑指数,减轻脑水肿,说明黄连解毒汤有效部位具有很好的脑保护作用;在此基础上还发现,黄连解毒汤有效部位可以提高小鼠耐缺氧能力,同时改善多发脑梗死大鼠脑组织能量代谢(乳酸、ldh、na+-k+ atp酶和ca2+-mg2+ atp酶)障碍,为其脑保护作用的机制提供依据。
随着黄连解毒汤在抗脑缺血和脑神经保护方面研究的不断深入,国内外学者开始从各个方面研究其抗脑缺血的物质基础和机理。邵氏等[28]通过比较黄连解毒汤煎剂及其石油醚和正丁醇萃取后的水层液对脑缺血的作用后发现,小鼠灌胃后,对东莨菪碱致记忆获得障碍、nano2致记忆巩固障碍、乙醇致记忆再现障碍、脑缺血再灌注致记忆障碍、d-半乳糖致衰老的记忆障碍有显著改善作用,能显著增加脑血流量,并证明了黄连解毒汤治疗脑血管性和老年性痴呆的有效部位或有效成分在水层液中。袁氏等[29-31]则从抗炎的角度来解释黄连解毒汤对缺血再灌注损伤后脑血管的保护机制,通过研究黄连解毒汤的主要成分(小檗碱、栀子苷、黄芩苷)对缺氧/复氧时脑微血管内皮细胞核因子-κb(nf-κb)细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,icam-1)、血管细胞间粘附分子-1(vascularcell adhesion molecule-1,vcam-1)的基因和蛋白表达的影响,结果发现,这3个成分都能够保护缺氧/复氧损伤的大鼠脑微血管内皮细胞,其保护机制之一是抑制nf-κb蛋白表达和核移位、诱导大鼠脑血管内皮细胞icam-1和vcam-1蛋白和mrna高表达。付氏等[32]研究发现,黄连解毒汤能够通过下调与细胞凋亡相关的效应蛋白酶caspase-3的表达来抑制脑细胞凋亡,发挥脑保护作用。王氏等[33]则从与老年斑相关的β-淀粉样蛋白(β-amyloid, aβ)方面进行研究,采用快速老化模型小鼠(seneacence accelerated mouse,sam)的快速老化亚系sam-prone/8 (samp8),观察黄连解毒汤对samp8海马中29个蛋白点的影响。结果发现,黄连解毒汤是通过调节与能量代谢、信号传导、细胞骨架及氨基酸代谢等相关蛋白的表达,通过多种途径对samp8的老化起到改善作用的。
4 结语
目前没有确切的关于ad的病因以及治疗方法的报道,已有的关于其病因的科研成果主要集中在以下几方面：遗传因素、铝蓄积说法、病毒感染、免疫、神经递质学说、雌激素和脑外伤等。临床上治疗方法也仅仅局限于对症给药,如使用胆碱能药、乙酰胆碱酯酶抑制剂、受体激动剂、钙离子拮抗剂、抗炎药、抗氧化消除自由基药、营养因子、雌激素替代治疗、干扰aβ沉淀药等[34]。由此可见,ad需要综合多种因素来进行治疗,这正与中药复方具有整体调整、综合施治的优点相吻合。黄连解毒汤具有脑神经细胞保护、抗脑缺血、抗炎、抗氧化等与ad的相关药理作用,但因其成分复杂、分析难度大等原因,对其研究大多仍停留在整体或成分药理学和仅有的几个药理模型上,因此,还有待进一步深入广泛的研究。
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