清开灵眼用凝胶的制备与质量控制

【摘要】  研发清开灵眼用凝胶并对其质量进行控制。以羟丙甲纤维素(hpmc)为主要基质制成眼用凝胶，采用定性和定量方法进行质量控制，定量方法采用紫外可见分光光度仪测定其主要有效成分：黄芩苷和胆酸的含量。清开灵眼用凝胶成型性、澄明度好，且成本低，质量可控。本方法简便、准确、重现性好，可用于清开灵眼用凝胶的质量控制。

【关键词】  清开灵;眼用凝胶;制备;质量控制;羟丙甲纤维素

　preparation and quality control of qingkailing ophthalmic gelbi hongsheng1,guo junguo1,xie xiaofeng1,gao peng3,song jike3

　　(1.eye institute of shandong university of traditional chinese medicine，jinan 250002，china;

　　2.shierming eye hospital of shandong province，jinan 250002;

　　3.shandong university of traditional chinese medicine，jinan 255035,china)

　　abstract：to prepare and establish quality control for qingkailing ophthalmic gel.qingkailing ophthalmic gel was prepared with hpmc .the quality was controlled by qualitative and quantitative methods. the content of baicalin and bile acid was determined by uv.qingkailing ophthalmic gel was formability, good clarity, low cost and quality control.this method is convenient，accurate and reproducible，which can be used for the quality control of qingkailing ophthalmic gel.

　　key words：qingkailing; ophthalmic gel; preparation;quality control;hplc

　　1 引 言

　　清开灵是在古代名方“安宫牛黄丸”的基础上开发的中药复方制剂，由胆酸、珍珠母、猪去氧胆酸、栀子、水牛角、板蓝根、黄芩苷、金银花等组成，具有清热解毒、化痰通络、镇静安神、醒脑开窍等作用。Www.11665.cOm现代药理学研究证明，清开灵主要有效成分为黄芩苷、栀子苷、猪胆酸、珍珠母等，具有改善微循环、解热、镇静、抗病毒、抗菌作用，能抑制病毒复制和多种致病菌生长。此外，清开灵还具有免疫调节作用，能够调整机体的免疫功能，使之恢复正常的状态。我们在长期的临床应用中，发现清开灵注射液对葡萄膜炎、角膜炎、结膜炎、眼内炎等炎症性眼病亦具有良好的治疗效果。并查阅了国内外相关文献，发现亦有清开灵注射液在眼科的临床报道[1-3]，证实清开灵对眼科疾病尤其是葡萄膜炎有治疗效果。

　　眼部给药剂型常采用滴眼液和眼膏，结膜囊内给药是最常见的治疗眼部疾病的方法。近年来，随着生物药剂学、药物动力学的发展和研究的深入，发现常规滴眼液和眼膏存在持续时间短，生物利用度低(1%～10%)和给药频繁等问题[4]。这是由于眼睛具有流泪和眨眼反射等非常有效的保护机制，使滴入到眼内的药液迅速从角膜前区域消除，因而大大影响了眼部给药的治疗效果。滴眼液和眼膏存在的先天不足，促使人们探索开发滞留时间长，兼有缓、控释能力的眼部药物给药系统。我们采用高分子亲水性聚合物为基质的凝胶剂作为药物载体，制备成眼用凝胶剂，可有效解决上述问题。

　　2 仪器与试剂

　　uv-754紫外分光光度仪(上海第三分析仪器厂);ph-3c酸度计(上海雷磁);渗透压计(上海山富科学仪器有限公司);ndj-4旋转黏度计(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂);卡波姆(卡尔康公司);羟丙甲纤维素(山东雨田化工);黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所)对羟基苯甲酸乙酯、氯化钠、氢氧化钠、乙醇等均为分析纯。

　　3 处方与制备

　　3.1 处方

　　胆酸1.3 g，珍珠母20 g，猪去氧胆酸1.5 g，栀子10 g，水牛角10 g，板蓝根80 g，黄芩苷2 g，金银花8 g，羟丙甲纤维素(hpmc)5 g，制成1 000 g。

　　 3.2 制备

　　3.2.1 清开灵提取液的制备[5] 板蓝根80g，加水煎煮2次，每次1 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至20 ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。栀子10 g，加水煎煮2次，第一次1 h，第二次0.5 h，合并煎液，滤液浓缩至25 ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。金银花8 g，加水煎煮2次，每次0.5 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至6 ml，加乙醇使含醇量达75%，滤过，滤液调节ph值至8.0，冷藏，回收乙醇，再加乙醇使含醇量达85%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。水牛角粉10 g，用氢氧化钡溶液;珍珠母粉20 g，用硫酸分别水解7～9 h，滤过，合并滤液，调节ph值至3.5～4.0，滤过，滤液加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，冷藏备用。将栀子液、板蓝根液和水牛角、珍珠母水解混合液合并后，加到胆酸1.3 g、猪去氧胆酸1.5 g的75%乙醇溶液中，混匀，加乙醇使含醇量达75%，调节ph值至7.0，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。黄芩苷2 g，用纯净水或注射用水溶解，调ph值至7.5，加入金银花提取液，混匀，与上述各备用液合并，混匀，并加注射用水至100 ml，冷藏，作为储备液备用。

　　3.2.2 眼用凝胶的制备[6-7] 在无菌操作条件下,称取羟丙甲纤维素5.0 g，加入10%～20%的甘油，研磨均匀，放置30 min，加入溶剂润涨(溶剂可以为水或者药物的水溶液，润涨时可以采用常温润涨或者将基质直接加入到一定温度的溶液中润涨)，基质润涨完毕，搅匀，形成凝胶基质。将清开灵储备液加入到凝胶基质中，搅拌，加入对羟基苯甲酸乙酯、ph调节剂，补加注射用水至1000 g，混合均匀，0.22 μm微孔滤膜滤过除菌，分装即得清开灵眼用凝胶。

　　所得清开灵眼用凝胶为黄色半透明状，ph值范围为：6～8，渗透压范围为：300～400 mosmol，黏度范围为：45～75 mpa.s。

　　4 质量控制

　　4.1 理化鉴别[8]

　　4.1.1 取本品0.2 g，加盐酸(6mmol/l) 2滴，乙醇2 ml混合均匀， 取溶液l ml，加冰醋酸1 ml，0.9%香草醛乙醇溶液0.5 ml，80%(v/v)硫酸5 ml， 摇匀，置70℃水浴中加热，呈紫红色。

　　4.1.2 取本品0.2 g，加水10 ml，摇匀，离心，取上清液2 ml，加5%二氯氧锆水溶液2滴，溶液呈黄色并产生混浊，加盐酸2滴，黄色不消失。

　　4.1.3 取本品0.2 g，加无水乙醇1.5 ml，摇匀，过滤，点于滤纸上，喷以 2%茚三酮乙醇溶液，用电吹风吹干，加热，呈紫色斑点。

　　4.2 含量测定

　　4.2.1 黄芩苷[9] 取本品约0.2 g，精密称定，置离心管中，加水5 ml，盐酸(5mmol/l)7滴， 摇匀，置冰箱中放置24 h，取出，离心，小心倾去上清液，再离心，合并沉淀， 沉淀用70%乙醇溶解，移入100 ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀;精 密吸取5 ml，置25 ml量瓶中，用盐酸(0.2 mmol/l)稀释至刻度，摇匀，以70%乙醇l ml加盐酸(0.2 mmol/l)至25 ml作空白，按照分光光度法，在273 nm的波长处测定吸收度，按黄芩苷的吸收系数(e1%1 cm)为631计算，即得。

　　4.2.2 胆酸[10] 对照品溶液的制备：取在105℃干燥至恒重的胆酸对照品12.5 mg，精密称定， 置25 ml量瓶中，加60%醋酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

　　标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 m1分别置于具塞试管中，各管精密加入60%冰醋酸溶液使成l ml，再分别加入新制糠醛溶液(1→100)1.0 ml，于冰浴中放置5 min，加硫酸溶液(取硫酸50 ml，加水65 ml混合)13.0 ml，摇匀，70℃水浴中加热10 min，迅速移至冰浴中放置2 min， 以0管为空白，按照分光光度法在605 nm波长处测定吸收度，吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

　　测定法：精密称取清开灵眼用凝胶0.2 g，加冰醋酸适量混合均匀，移入25 ml容量瓶中，再加入60%冰醋酸溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液各1.0 ml，分置甲、乙两支试管中，于甲管加新制糠醛水溶液(1→100)1.0 ml，乙管加水1.0 ml代替糠醛溶液作空白，照标准曲线制备项下的方法自“于冰浴中放置5 min”起，依法测定吸收度。从标准曲线上读出供试品溶液中胆酸的含量，即得。

　　5 讨论

　　5.1 眼用凝胶剂是近几年发展起来的眼科新剂型，也是眼科药物剂型中最有发展潜力的剂型。目前在眼用凝胶研究中应用最多的凝胶基质主要为卡波姆、羟丙甲纤维素等高分子材料，我们考察了卡波姆、羟丙甲纤维素为基质制备的清开灵眼用凝胶，不但操作过程简单，生产效率高，制剂的成型性、澄明度好，且成本更低，因此，最终确定以羟丙甲纤维素作为本制剂的基质。

　　5.2 中药眼用凝胶剂已经得到了初步的研究， 但是有一些问题我们也不能忽视，由于中药组成成分复杂，有效成分不是很单一明确，在开发和应用的过程中也有很多问题需要解决，如凝胶剂粘性大、促进剂的加人及由于中药所含成分复杂，给分析测试工作的前处理带来困难;制剂的卫生学要求保障难度较大。我们应当大力推广制药新技术、新方法，提高药物制剂的质量，使制成的中药凝胶剂安全、 有效、稳定，为新药的药理、药效、毒理及临床研究提供良好的物质基础，使中药眼用凝胶剂在防病治病方面发挥更大的作用。

【参考文献】
  　　[1]郑颖,刘玉玲,杨宏伟.清开灵联合无环鸟苷滴眼液治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的疗效观察[j].实用药物与临床,2006,9(5):302.

　　[2]李菊琦.清开灵为主治疗周边葡萄膜炎临床观察[j].中西医结合眼科杂志,1997,15(1):6-7.

　　[3]宋春杰,尹岭,朱克.清开灵有效治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎[j].中国神经免疫学和神经药理学杂志,2003，10(3)：156-158.

　　[4]郭炎荣.眼用凝胶剂临床应用概述[j].海峡药学,2008,20(4):74-77.

　　[5]中华人民共和国药典[m].2005.610.

　　[6]朱继峰,李金伟,孟宪丽. 喷昔洛韦眼用凝胶的制备及质量控制[j].中国医药导报,2008,5(21):34-35.

　　[7]孟祥云,中药凝胶剂的研究概况[j].黑龙江医药,2007,20(1):70-71.

　　[8]边立江,李臻,曲韵智.清开灵滴丸的开发改制[j].内蒙古医药杂志,2004,36(2):96-97.

　　[9]唐小明. 紫外分光光度法测定清开灵注射液中黄芩苷的含量[j].海峡药学,2001,13(1):33-34.

　　[10]曹进,徐燕,王义明,罗国安. 清开灵注射液中三种胆酸含量测定方法比较[j].中成药,2003,25(9):705-708.