糖尿病大鼠血液流变学与血管内皮功能的相关性及益气活血通络方药的干预作用
【关键词】 糖尿病;血液流变学;血管内皮功能;中药
【摘要】 目的 探讨糖尿病大鼠血液流变学变化与血管内皮功能的相关性及益气活血通络方药的干预作用。方法 链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型，随机分为模型组、中药高剂量组(7.44 g·kg-1·d-1)、中剂量组(3.72 g·kg-1·d-1)、低剂量组(1.86 g·kg-1·d-1)，并设正常对照组。8 w检测血液流变学指标、一氧化氮(no)、内皮素(et)的含量。结果 糖尿病大鼠血液流变学发生改变，血清no含量明显降低，血浆et含量明显升高。结论 糖尿病大鼠血液流变学变化与血管内皮功能改变具有相关性，益气活血通络方药可以改善糖尿病大鼠血液流变学及血清no、血浆et，从而防治糖尿病及其并发症。
【关键词】 糖尿病;血液流变学;血管内皮功能;中药
糖尿病患者的血液流变学改变导致其微血管病变发生，而一氧化氮(no)与内皮素(et)作为一对具有拮抗作用的血管活性物质，是协调血管张力的关键〔1〕。前期研究表明，益气活血通络方药能够提高糖尿病大鼠坐骨神经传导速度、调节血清胰岛素、c肽的分泌、降低坐骨神经糖基化终末产物(ages)含量〔2～5〕。在此基础上，本文继续探究糖尿病大鼠血液流变学与血管内皮功能的相关性，旨在揭示该方药的作用机制。Www.11665.CoM
1 材料与方法
1.1 试剂及药品
链脲佐菌素(stz)(美国sigma公司)。益气活血通终方药由黄芪、桂枝、葛根、水蛭等药物组成。no硝酸还原酶法试剂盒(南京建成生物工程研究所提供，批号:20091112)，血浆t放免试剂盒(解放军总医院科技开发中心放免所，批号:091105)。
1.2 动物模型建立及分组
选用wistar大鼠，雄性，体重220～240 g，由吉林大学实验中心提供。适应性喂养1 w，禁食12 h后，按60 mg/kg的剂量一次性腹腔注射stz(用ph4.5 0.1 mol/l枸橼酸钠缓冲液稀释)，72 h后由尾静脉采血测定血糖，凡血糖>16.7 mmol/l者纳入实验。其余达不到标准者剔除。将入选的模型动物随机为模型组、中药高、中、低剂量组，并以体重、年龄、血糖正常大鼠作为对照组。
1.3 给药方法
中药组分别给予7.44、3.72、1.86 g·kg-1·d-1灌胃;模型组、正常对照组灌服相应容量的蒸馏水。给药8 w。
1.4 指标检测
大鼠麻醉后，腹主动脉取血，肝素抗凝，应用全自动血液流变快测仪fasco3010检测(重庆大学维多生物工程研究所)。采用硝酸还原酶法检测no。取血1.5 ml，3 000 r/min离心10 min，收集上清液，置-20℃冰箱。采用放射免疫法检测et。取血2 ml，注入含10%乙二胺四乙酸(edta)二钠30 μl和抑肽酶40 μl的试管中，用力摇匀，4℃，3 000 r/min离心10 min，分离血浆，严格按照试剂盒说明书进行操作。
1.5 统计学处理
应用spss13.0软件，数据以x±s表示，组间样本均数比较采用单因素方差分析，组间比较采用q检验。
2 结 果
2.1 各组大鼠血液流变学变化的比较
与正常对照组相比，模型组、中药各剂量组大鼠全血黏度、红细胞聚集指数及刚性指数明显升高(p<0.05);与模型组相比，中药高、中剂量组各项指标有显著差异(p<0.05)。见表1。
2.2 各组大鼠no、et含量比较
与正常组相比，模型组、中药各剂量组no含量降低、et含量明显升高;与模型组相比，中药高剂量组no、et含量有显著差异(均p<0.05)。见表2。表1 各组大鼠血液流变学变化的比较表2 各组大鼠no、et含量的变化
3 讨 论
糖尿病的血液流变学改变主要表现为高黏滞综合征，包括血细胞和血浆两个方面。血细胞的变化为红细胞比积增加、聚集性增强、变形能力降低等。糖尿病患者长期处于高血糖状态，使红细胞膜血红蛋白糖基化，携氧能力下降，内皮细胞缺氧损伤，et生成增加，no生成降低，引起微血管持久收缩、痉挛，血管平滑肌增生，血管狭窄，加速糖尿病血管并发症的发生发展。因此，et的升高在一定程度上反映了内皮细胞损伤的程度，而内皮细胞损伤是导致糖尿病血管病变的主要原因。
中医认为，糖尿病主要病机为气阴两虚、瘀血阻络。益气活血通络法方由黄芪、桂枝、元胡、水蛭、地龙、生地组成。具有养阴益气、活血化瘀的功用。高血黏度导致低灌流状态以及内皮功能损伤，从而导致循环障碍使血管并发症发生，因此，改善血液流变学对糖尿病并发症的防治、预后有深远的影响〔6〕。以往研究证实，活血化瘀中药能改善糖尿病大鼠血液流变学、降低血小板聚集、改善血流、增加周围神经的供血和营养、抑制坐骨神经的纤维脱髓鞘和轴索萎缩、提高传导速度〔7〕、改善不同切变率下血液表观黏度、降低血浆黏度，使各级血管的血液流变性普遍趋于正常〔8〕。
实验结果表明，糖尿病大鼠的血浆黏度、红细胞聚集及刚性指数、no、et的含量均发生改变;益气活血通络方药能改善血浆黏度、红细胞聚集及刚性指数，提高血清no含量、降低血浆et含量，可以防治糖尿病及其并发症。
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