【摘要】  目的对王氏萎胃灵安全性作出正确评价，为临床用药提供科学依据，保证用药安全。方法王氏萎胃灵分大剂量组（3.6 g/kg）、中剂量组（1.8 g/kg）、小剂量组（0.9 g/kg）。大鼠每天灌胃给药，共180 d，并对大、中、小剂量组和正常组进行一般情况观察、体重测量、血液指标、检测脏器系数和对心、肝、脾、肺、肾、脑等29个脏器进行肉眼观察和镜下检查。结果王氏萎胃灵口服长期毒性实验未发现蓄积毒性（p＞0.05）。结论王氏萎胃灵在规定剂量下口服安全，无明显毒副作用。

【关键词】  王氏萎胃灵； 长期毒性

　　abstract:objectiveto evaluate the safety of wang′swei wei ling,so to provide the scientific basis for its clinical usage.methodsthe long time toxicity experiments were performed on high dosage group 3.60 g/kg ,middle dosage group 1.80 g/kg ,low dosage group 0.90 g/kg and the normal group, one daily for 180 days. the rats weight , blood, the coefficient of organs were generally observed and the hearts ,livers, spleens, kidneys and brain etc. nonacosa organs were observed with the naked eyes and under microscope.resultsno accumulative toxicity was observed in the experimental study on long time toxicity of wang′swei wei ling （p＞0.05）.conclusionit is safe to take wang′sweiweiling under the priscribed dosage and it has little toxicity .

　　key words:wang′sweiweiling;  chronic toxicity;  experimental study
   
　　王氏萎胃灵方剂是王道坤教授针对慢性萎缩性胃炎及其癌前病变 “本虚标实、痰瘀互阻”的基本病机，在发掘敦煌医方并结合近四十年临床经验研制而成的纯中药复方制剂。wWW.11665.coM临床治疗上取得满意疗效。为保证临床长期用药的安全性,我们对王氏萎胃灵进行了长期毒性研究,现报道如下。

　　1  材料

　　1.1  动物健康wistar大鼠80只，雌雄各半，体质量100～120 g，由甘肃中医学院科研实验中心提供。实验动物质量合格证号:scxk（甘）2004-007-0001524,动物实验设施使用证号: syxk（甘）2004-006-0001522。

　　1.2  药品及仪器王氏萎胃灵：由甘肃医学科学院肿瘤医院药剂科制备（每克相当于原生药7.5 g），批号041023。primo电动高速离心机（德国生产），al c yon - 300 全自动血液生化分析仪（美国雅培生产），全自动血细胞记数仪（瑞典麦道尼克生产）。

　　2  方法

　　2.1  动物分组按体质量编号用随机数字表法将80只大鼠分为4组，分别为中药大剂量组、中剂量组、小剂量组、正常对照组，每组20只(雌雄各半)。

　　2.2  方法及给药按临床王氏萎胃灵治疗慢性萎缩性胃炎及其癌前病变用药期（1个疗程）为3个月，而依据长期毒性试验要求，给药时间应为临床试验用药期的2～3倍，最长不超过6个月的要求［1～3］，在spf级实验室中将实验动物分笼喂养，每笼5只。自由饮水，自由摄食标准块状饲料［4］。灌胃给药,1次/d，连续180 d，每次均用温水(40～50℃)将散剂冲成悬液，灌胃容积15 ml/kg。并按体重调整给药量和给药体积，对照组给以等体积水。大、中、小剂量组分别给以王氏萎胃灵60，30，15倍等效剂量治疗。按照体重换算给药［4］。全部实验过程分两个阶段，即试验末期及停药观察期。观察动物的一般情况、进食及大小便，每10天称体质量1次。

　　2.3  标本采集与处理于实验第180天每组随机取10只动物，股动脉取血，进行红细胞、白细胞、血红蛋白等血象检查，同时进行总蛋白、球蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基移位酶、天门冬酸氨基移位酶、碱性磷酸酶、血糖、总胆红素、总胆固醇、肌酐、尿素氮、甘油三酯、肌酸磷酸激酶、钠离子浓度、钾离子浓度、氯离子浓度等生化指标检查。
   
　　解剖动物进行心、肝、脾、肺、肾、脑、垂体、气管、子宫、卵巢、肾上腺、睾丸、附睾、食管、胸腺、胃、大小肠、胰腺、乳腺、脊髓、坐骨神经、膀胱、淋巴结、颌下腺、甲状腺、甲状旁腺、主动脉、骨髓、前列腺等主要脏器尸检，肉眼观察并称重，测其脏器权重系数(脏器重量/体重)。脏器经中性福尔马林固定后，于相同部位分别取一块组织，按常规方法做石腊切片，he染色，并进行病理组织学镜检，记录组织改变。
   
　　剩余动物留作恢复观察。在停药一个月时取血，进行血象和血液生化检验并解剖动物行上述检测。

　　2.4  统计学处理计量资料均以±s表示，各组间比较采用单因数方差分析（one-way anova）进行检验，采用spss11.5统计软件进行分析。

　　3  结果

　　3.1  一般状况及死亡情况除正常组有1例动物死亡（系灌胃不当所致）外，连续灌胃给药6个月和停药1个月后大鼠的一般情况良好，毛发、饮食、大小便、分泌物和排泄物以及行为活动等均无异常。

　　3.2  对大鼠体质量增长的影响每10天称1次体重，各组动物体质量均有明显增加，各给药组及对照组动物体质量净增长值之间无显著性差异（p﹥0.05）。结果见表1。表1  王氏萎胃灵胶囊对大鼠体重的影响（略）

　　3.3  血液常规检查结果两次检查结果表明，给药组与对照组比较，大鼠白细胞（wbc）、红细胞（rbc）、血红蛋白（hgb）、血小板（plt）及wbc分类：淋巴细胞（l）、中性粒细胞（n），经统计学处理，组间无显著差异（p>0.05）。结果见表2。表2  王氏萎胃灵胶囊对大鼠血常规的影响（略）

　　3.4  对血液生化的影响 两次检测大鼠总蛋白（tp）、球蛋白（g）、白蛋白（alb）、丙氨酸氨基移位酶（alt）、天门冬酸氨基移位酶（ast）、碱性磷酸酶（alp）、血糖（glu）、总胆红素（t-bil）、总胆固醇（cho）、肌酐（cr）、尿素氮（bun）、甘油三酯（tg）、肌酸磷酸激酶（ck）、钠离子浓度（na+）、钾离子浓度（k+）、氯离子浓度（cl-）等的结果表明：各剂量组动物不同时期上述指标与对照组相比无显著性差异（p＞0.05）。结果见表3。表3  王氏萎胃灵胶囊对大鼠血液生化的影响（略）

　　3.5  对主要脏器重量和脏器系数及病理切片的影响

　　给药6个月及给药6个月后停药1月，解剖动物取其心、肝、脾、肺、肾、脑、垂体、气管、子宫、卵巢、肾上腺、睾丸、附睾、食管、胸腺、胃、大小肠、胰腺、乳腺、脊髓、坐骨神经、膀胱、淋巴结、颌下腺、甲状腺、甲状旁腺、主动脉、骨髓、前列腺等主要脏器，先肉眼观察其大小、形状、色泽、质地、包膜等与对照组比较均无异常改变，再将各脏器称重，计算脏器系数（各占体质量的百分比），病理检查（固定于10﹪甲醛液中常规脱水、石蜡包埋，切片、he染色、光镜下观察），各用药组与对照组比较镜下均未见有意义的病理变化及中毒性病理改变，给药6个月及给药6个月后停药1月的脏器重量、脏器系数组间比较无显著性差异(p>0.05)。结果见表4。表4  王氏萎胃灵胶囊对大鼠主要脏器系数的影响（略）

　　4  结论

    王氏萎胃灵采用大（3.6 g/kg）、中（1.8 g/kg）、小（0.9 g/kg）3个剂量经180 d每日灌胃给药1次，长期毒性实验观察。给药期间，各组动物的活动、毛色、饮水、摄食、粪便及体质量增长、常规血液学与血液生化指标检测均正常，与空白对照组比较无显著性差异（p＞0.05）。

    给药180 d及停药30 d后分别处死的各组动物，对其心、肝、脾、肺、肾、脑、垂体、气管、子宫、卵巢、肾上腺、睾丸、附睾、食管、胸腺、胃、肠、胰腺、乳腺、脊髓、坐骨神经、膀胱、淋巴结、颌下腺、甲状腺、甲状旁腺、主动脉、骨髓、前列腺等进行肉眼观察及病理切片检查，上述器官均未见异常。

    以上结果表明，在大于人临床用药量15倍以上连续给药6个月，未引起大鼠病理性改变，剂量增至人用药量60倍时，也未引起器质性改变，而且停药30 d后也未见蓄积毒性引起的后遗效应，因此可以认为该药是有较高安全性的。

【参考文献】
  　　［1］中华人民共和国卫生部药政局.中药新药研究指南（药学、药理学、毒理学）［m］.北京：人民卫生出版社,1993:205.

　　［2］国家药品监督管理局.中药新药研究的技术要求(五:毒理研究)［s］.1999:24.

　　［3］国家食品药品监督管理局.中药天然药物长期毒性研究技术指导原则［s］.2005:3.

　　［4］陈奇.中药药理实验方法 ［m］.北京：人民卫生出版社,1993：119.