作者：陈玉娟， 王会堂，贺丽鹏，张宏桂，殷金玲

【摘要】  目的研究水曲柳皮的香豆素类成分。方法对水曲柳皮95%乙醇提取物的醋酸乙酯部分和正丁醇部分进行色谱分离，通过理化性质和波谱分析鉴定其化合物的结构。结果从水曲柳皮中分得8个香豆素类成分，分别鉴定为fraxinol(ⅰ), isofraxidin(ⅱ), fraxetin(ⅲ), aesculetin(ⅳ), mandshurin(ⅴ), isofraxidin-β-d- glucoside(ⅵ), fraxin(ⅶ), isoscopoletin-β-d-glucoside(ⅷ)。结论ⅱ，ⅲ，ⅵ，ⅵ，ⅶ，ⅷ均为首次从水曲柳皮中分离得到。

【关键词】  水曲柳; 香豆素; 化学成分

　　abstract：objectiveto investigate the chemical constituents from fraxinus mandschurica rupr. methodsthe constituents of the etoac-solube portion and normal butanol solube portion in the 95% ethanol extract were isolated and purified by means of chromatography. compounds were identified by their physical characteristics and spectral features. resultseight compounds were isolated and identified as fraxinol(ⅰ), isofraxidin(ⅱ), fraxetin(ⅲ), aesculetin(ⅳ), mandshurin(ⅴ), isofraxidin-β-d-glucoside(ⅵ), fraxin(ⅶ), isoscopoletin-β-d-glucoside(ⅷ). conclusioncompoundsⅱ, ⅲ, ⅵ, ⅵ, ⅶ and ⅷ are isolated for the first time from fraxinus mandschurica rupr.

　　key words：fraxinus mandschurica rupr.; coumarins; chemical constituents

　　水曲柳fraxinus mandschurica rupr.是木樨科梣属植物，民间用其树皮治疗风湿、类风湿、骨痛等疾病，作用疗效确切，而对其化学成分的基础研究较少，所以本实验选择水曲柳皮作为研究对象，对其化学成分进行了分析。wWW.11665.cOM从水曲柳树皮的95%乙醇提取液提取物中分离得到8个香豆素类化合物，根据理化常数和光谱分析，鉴定为fraxinol(ⅰ), isofraxidin(ⅱ), fraxetin(ⅲ), aesculetin(ⅳ), mandshurin(ⅴ), isofraxidin-β-d- glucoside(ⅵ), fraxin(ⅶ), isoscopoletin-β-d-glucoside(ⅷ)。ⅱ，ⅲ，ⅵ，ⅶ，ⅷ均为首次从水曲柳皮中分离得到。

　　1 仪器与材料

　　1.1 仪器与试剂x-4数字显微熔点测定仪(北京福凯仪器有限公司);柱层析硅胶(200-300目)和gf254为青岛海洋化工产品;其余试剂均为分析纯(北京化工)。

　　1.2 样品水曲柳采自长白山，经吉林大学药学院张静敏教授鉴定为水曲柳fraxinus mandschurica rupr.。

　　2 方法与结果

　　2.1 提取与分离 水曲柳皮10 kg，粉碎，95%乙醇加热回流提取3次，2 h/次，滤过，合并滤液，减压浓缩回收溶剂，至小体积。浓缩液用水混悬后，依次用乙醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。取醋酸乙酯部分50g，用石油醚-醋酸乙酯体系进行硅胶柱层析，分段收集，共分离出4个简单香豆素类化合物。取正丁醇层100g，用氯仿-甲醇-水体系进行硅胶柱层析，分段收集，共分离4个香豆素苷类化合物。

　　2.2 结构鉴定分离所得的化合物结构见图1。

　　化合物ⅰ：黄色针状结晶(meoh)，mp.171～172℃。tlc薄层板置紫外灯下(365 nm)显弱黄色荧光。异羟肟酸铁反应阳性，表示有内酯环存在;fecl3 反应阳性(墨绿色)，表示有酚羟基存在;判断为香豆素类化合物。esi-ms m/s:245.3 [m+na]+，分子c11h10o5。 1h-nmr (dmso-d6)g：9.02(1h, brs, oh)，7.95(1h, d, j=9.66 hz, 4-h)，6.84(1h, s, 8-h)，6.23(1h, d, j=9.66 hz, 3-h)，3.85(3h, s, -och3)，3.82(3h, s, -och3 ); 13c-nmr(dmso-d6) g：161.4(2-c)，153.8(7-c)，148.6(9-c)，143.7(5-c)，140.0(44-c)，136.5(6-c)，112.9(3-c)，107.5(10-c)，96.2(8-c)，61.97(-och3)，57.22(-och3)。根据理化性质和波谱数据，对照文献[1]，鉴定该化合物为fraxinol(见图1)。

　　图1 化合物ⅰ,ⅱ,ⅲ,ⅳ,ⅴ,ⅵ,ⅶ和ⅷ的结构式

　　化合物ⅱ：白色针状结晶(meoh)，mp.144～146℃。异羟肟酸铁反应阳性，表示有内酯环存在;fecl3 反应阳性(墨绿色)，表示有酚羟基存在;判断为香豆素类化合物。esi-ms m/s:245.4 [m+na]+，分子式c11h10o5。1h-nmr (dmso-d6) δ：9.85(1h, brs, oh)，7.88(1h, d, j=9.45 hz, 4-h)，7.00(1h, s, 5-h)，6.21(1h, d, j=9.45 hz, 3-h)，3.78(6h, s, -och3); 13c-nmr(dmso-d6) δ：161.0(2-c)，146.5(6-c)，145.7(4-c)，144.84(8-c)，143.9(9-c)，135.6(7-c)，112.9(3-c)，111.1(10-c)，105.3(5-c)，61.6(-och3)，57.0(-och3)，数据与文献[2]对照，确认其结构为isofraxidin(见图1)。

　　化合物ⅲ：黄色晶体(meoh)，mp.235～236℃，溶于热的甲醇和乙醇。异羟肟酸铁反应阳性，表示有内酯环存在。fecl3 反应阳性(墨绿色)，表示有酚羟基存在。判断为香豆素类化合物。esi-ms m/s:231.1 [m+na]+，分子式c10h8o5。1h-nmr (dmso-d6) δ：9.44(1h, brs, oh)，9.54(1h, brs, oh)，7.89(1h, d, j=9.45 hz, 4-h)，6.80(1h, s, 5-h)，6.21(1h, d, j=9.45 hz, 3-h)， 3.81(3h, s, -och3 ); 13c-nmr(dmso-d6)δ：161.37(2-c)，146.2(7-c)，145.8(4-c)，140.2(6-c)，140.1(8-c)，133.7(9-c)，112.7(3-c)，111.1(10-c)，101.2(5-c)，56.9(-och3)，数据与文献[3]对照，确认其结构为fraxetin(见图1)。

　　化合物ⅳ：淡黄色针晶，mp. 259～260℃。紫外灯下(365nm)显亮蓝色荧光，tlc薄层板与标准品秦皮乙素有相同的rf值，uv显示香豆素的特征吸收，fec13反应阳性(墨绿色)。esi-ms m/s:201.2[m+na]+，分子式c9h6o4。1h-nmr (dmso-d6) δ：10.06(1h, brs, oh)，9.48(1h, brs, oh)，7.82(1h, d, j=9.30 hz, 4-h)，6.93(1h, s, 8-h)，6.69(1h, s, 5-h)，6.12(1h, d, j=9.30 hz, 3-h);13c-nmr(dmso-d6)g：161.3(2-c)，150.9(7-c)，149.0(9-c)，144.9(4-c)，143.3(6-c)，112.8(5-c)，111.2(10-c)112.0(3-c)，103.1(8-c)，，数据与文献[3]对照，确认其结构为aesculetin(见图1)。

　　化合物ⅴ：白色无定形粉末，mp.128～130℃，molish反应阳性，示有糖，tlc检出fraxinol和葡萄糖。13c-nmr(dmso-d6)δ：161.1(2-c)，157.7(7-c)，152.0(9-c)，149.8(5-c，6-c)，140.1(4-c)，113.0(3-c)，107.5(10-c)，103.3(1'-c)，97.1(8-c)，78.1(5'-c)，77.3(3'-c)，74.9(2'-c)，70.8(4'-c)，63.1(6'-c)，61.7(-och3)，57.5(-och3)。数据与文献[1]对照，确认其结构为mandshurin(见图1)。

　　化合物ⅵ：无色针晶(meoh)，mp.218～219℃，molish反应阳性，示有糖，tlc检出isofraxidin和葡萄糖。13c-nmr(dmso-d6) δ：160.6(2-c)，150.3(6-c)，145.2(4-c)，143.2(8-c)，142.5(7-c)，141.1(9-c)，115.5(10-c)，115.3(3-c)，106.3(5-c)，103.0(1'-c)，78.3(3'-c)，77.3(5'-c)，75.0(2'-c)，70.7(4'-c)，62.1(6'-c)，61.6(-och3)，57.4(-och3)，数据与文献[2]对照，确认其结构为isofraxidin-β-d-glucoside(见图1)。

　　化合物ⅶ：浅黄色针状结晶(meoh)，mp.208～209℃。molish反应阳性，示有糖，tlc检出fraxetin和葡萄糖。13c-nmr(dmso-d6) δ：160.7(2-c)，145.9(7-c)，145.2(4-c)，143.1(8-c)，144.2(6-c)，132.1(9-c)，112.7(3-c)，110.6(10-c)，105.5(5-c)，104.4(1'-c)，77.8(3'-c)，76.7(5'-c)，74.3(2'-c)，70.1(4'-c)，61.3(6'-c)，56.6(-och3)，数据与文献[1，3]对照，确认其结构为fraxin(见图1)。

　　化合物ⅷ：白色粉末，mp.152～153℃。紫外灯下(365 nm)显亮蓝色荧光，异羟肟酸铁反应阳性，表示有内酯环存在，molish反应阳性，示有糖，tlc检出葡萄糖，表明化合物ⅷ为香豆素苷。13c-nmr(dmso-d6) δ：161.7(2-c)，153.7(7-c)，150.8(9-c)，145.2(4-c)，144.2(6-c)，114.0(5-c)，113.6(3-c)，112.1(10-c)，101.2(1'-c，8-c)，77.9(3'-c)，77.7(5'-c)，74.0(2'-c)，70.5(4'-c)，61.5(6'-c)，57.1(-och3)，数据与文献[4]对照，确认其结构为isoscopoletin-β-d-glucoside(见图1)。

【参考文献】
  　　[1] hiroki tsukamoto, sueo hisada, sansei nishibe, coumarins from bark of fraxinus japonica and f. mandschurica var. japonica[j].chem.pharm. bull. 1985, 33(9):4069.

　　[2] 李创军，张东明，罗永明.宽叶金粟兰化学成分的研究[j].药学学报，2005，40(6)：525.

　　[3] renmin liu, qinghua sun, ailing sun, et al.isolation and purification of coumarin compounds from cortex fraxinus by high-speed counter-current chromatography[j].journal of chromatography a, 2005, 1072: 195.

　　[4] 林 生，肖永庆，张启伟，等.滨蒿化学成分的研究(ⅲ)[j].中国中药杂志，2004，29(5)：429.