作者：贺建 虞竞峰 祝炳方 胡志刚 肖华龙
【摘要】目的 探讨血清及胸水p53抗体水平检测对肺癌诊断价值和临床意义。方法 采用酶联免疫吸附法（elisa）检测36例肺癌患者、29例经手术或化疗治疗后的肺癌患者血清p53抗体，并以30例健康体检者作对照，其中15例肺癌患者同时检测胸水p53抗体，以16例良性胸水作为对照。结果 肺癌组血清p53抗体水平为3.879±5.963 iu/ml，明显高于对照组0.144±0.019 iu/ml，且差异有高度显著性(p<0.01)，阳性率为52.8%；在肺癌治疗组，血清p53抗体水平为1.86±2.914 iu/ml，阳性率为34.5%，而且与对照组和未治疗肺癌组差异无显著性（p>0.05）；肺癌胸水p53抗体水平18.95±7.319 iu/ml高于良性胸水对照组0.267±0.318iu/ml，且具有高度显著性差异（p<0.01），阳性率86.7%。WWw.11665.COM结论 检测血清及胸水p53抗体水平有助于肺部良恶性疾病的诊断及鉴别诊断，血清p53抗体可成为肺癌的血清标志物，胸水p53抗体检测比血清更具敏感性。
【关键词】血清 胸水 p53抗体 肺癌
随着肺癌发病率的迅速上升和分子生物学研究的进展，对肺癌发生、发展过程中基因改变的研究日益深入。文献报道，约50％～60％的非小细胞肺癌和80％小细胞肺癌有p53突变[1]。本文通过对一组肺癌患者血清及胸水p53抗体的定量检测，分析肺癌血清p53抗体水平与临床资料的关系，探讨p53抗体对肺癌临床的应用价值。
1 材料与方法
1.1 检测对象 入院未经治疗肺癌患者36例，其中男性21例，女性15例，平均年龄为66.92±15.07岁；肺癌治疗组29例为手术或化疗患者，其中男性18例，女性11例，平均年龄为63.52±17.61岁；健康对照组30例为本院健康体检者，其中男性17例，女性13例，平均年龄为53.36±18.19岁；肺癌胸水组15例，男性11例，女性4例，平均年龄为63.14±6.91岁；胸水对照组16例为渗出性胸膜炎等非恶性肿瘤疾病，男性7例，女性9例，平均年龄为61.24±8.78岁。所有肺癌的诊断均经组织病理或细胞病理学证实。
1.2 试剂与仪器 p53抗体检测试剂盒为adlitteram diagnostic laboratories（adl）公司提供的 mouse anti-human antioncogene p53-17q13.1。酶标仪 mutiskan ascunt， labsystem公司产品。
1.3 检测方法 血清p53抗体检测采用elisa法，严格按说明书操作。
1.4 标本采集 血清标本采用普通真空血清采血管，采集受检者当日晨空腹静脉血2m1，离心分离血清。胸水标本由临床送检的胸水中离心后吸取上清液2-3 ml待检。当日未检测标本置于-20℃冰箱保存，1周内测定。
1.5 统计学处理 本实验数据采用t检验和f检验进行统计分析。
2 结果
2.1 血清与胸水p53抗体水平检测结果见表1。
2.2 按照95%可信限设定参考值，以≥0.35 iu/ml正常上限为阳性，肺癌血清组阳性率为52.8%；肺癌治疗组阳性率为34.5%；肺癌胸水组阳性率为86.7%。
2.3 肺癌血清p53抗体水平明显高于健康对照组和良性疾病对照组且差异有高度显著性(p<0.01)。肺癌治疗组p53抗体的血清水平虽然有所增高，但与健康对照组和良性疾病对照组比较无显著性差异(p>0.05)。肺癌组与肺癌治疗组比较无显著性差异(p>0.05)。
2.4 胸水对照组p53抗体的检出结果略高于血清对照组，但两者之间没有显著性差别（p>0.05）；肺癌胸水p53抗体结果高于良性胸水对照组，且具有高度显著性差异（p<0.01），提示：胸水p53抗体的检测对肺癌具有一定的诊断价值。
3 讨论
肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，尽管先进的诊断技术和治疗措施不断涌现，但是肺癌的早期诊断、复发和转移的早期发现、疗效监测以及判断预后，仍是目前临床工作者所面临的难题。p53抗体是突变型p53蛋白激发人体免疫系统而产生的自身免疫反应的产物，p53抗体作为一种间接指标用来反映p53基因突变，由于其取材方便，有利于术后动态监测，具有一定的临床价值[2]。
本文结果显示，肺癌组血清p53抗体水平明显高于对照组且差异有高度显著性(p<0.01)，与文献报道相似[3]。肺癌组血清p53抗体检出率较高，表明p53抗体的出现与肺癌高度相关，p53抗体可以作为肺癌诊断的一个可行的敏感性标志物[4]。
在肺癌治疗组，血清p53抗体水平与对照组差异无显著性(p>0.05)。p53抗体是突变型，其蛋白是激发人体免疫系统而产生的自身免疫反应的产物，因基因错义突变产生的突变型p53蛋白半衰期延长(野生型p53蛋白的半衰期仅20～30分钟，而突变型p53蛋白高达20～40小时)，有效的治疗(手术、化疗、放疗)减少了肿瘤细胞的数量和p53蛋白的积聚，使得机体产生p53抗体减少。提示我们经过治疗后p53抗体水平有所下降，阳性检出率下降，结果表明p53抗体可以作为疗效和病程转归的一个指标[5]。
我们观察结果显示，胸水中p53抗体的水平要高于血清中的含量，且与良性胸水对照比较具有高度显著性差异(p<0.01)，阳性率达86.7%，提示我们，胸水p53抗体的检测对肺癌的诊断具有更高的敏感性。
p53抗体可在-80℃长期保存，对抗体活性无影响。良好的稳定性使其便于临床应用[6]。采用elisa测定血清p53抗体，方法简便，取材容易，不需癌组织标本，费用低,可成为p53基因突变检测的替代和补充手段。因此检测血清p53抗体可作为肺癌诊断甚至早期诊断以及疗效观察的可靠标志物[7]。
参 考 文 献
[1]brambilla e,brambilla c. p53 and lung cancer. pathol biol,1997,45(10):852-863.
[2]韩毅,许绍发.血清p53抗体与肺癌的研究进展.中国肺癌杂志,2003,6(5):406-408.
[3]朱珊,刘运秋,刘金梅等.血清p53抗体与肺癌早期诊断、判定疗效、预测复发及预后.中国综合临床，2004，20(4)：319-321.
[4]钟亚华,谢丛华.血清p53抗体的表达及其临床意义.临床肿瘤学杂志,2002,7(1)：71—73.
[5]张燕,徐从高.血清p53抗体与肺癌.国外医学肿瘤学分册,2000,27(3):170-172.
[6]赵峰，周清华，王兰兰.检测肺癌患者血清p53抗体的临床意义.中国肿瘤临床,2002,29(8)：551-553.
[7]邹学森，赵华，黄秀珍等.肺癌患者血清p53抗体检测及其临床意义. 中国医学检验杂志,2003,4(l):16-17.
