【摘要】 目的:探讨标本溶血对生化检验结果的影响。方法:抽取我院50例体检者血液标本5 ml,分别置于2支试管中,每支2.5 ml,其中1支试管中的标本采用人工方法使其溶血,检测正常标本和溶血标本血清中谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)、乳酸脱氢酶(ldh)、碱性磷酸酶(alp)、总胆固醇(chol)、甘油三酯(tg)、尿素氮(bun)、肌酐(cr)、葡萄糖(glu)、血尿酸(ua)、钾离子(k+)等11项临床生化检验指标的含量并进行比较。结果:溶血血清alt、ast、ldh、k+ 、chol测定结果明显高于正常血清(p<0.05), alp的活性随溶血而降低,溶血对bun、cr、tg、glu、ua测定结果影响较小。结论:临床检验工作中应采取一切可能的措施避免标本溶血的发生,如发生了标本溶血现象,可设置样品空白以减少影响,必要时应重新采血。
【关键词】 溶血 ; 生化检验 ;对策
[abstract] objective: to investigate the influence of sample hemolysis on the outcome in biochemical test and countermeasure. methods: blood samples of 50 subjects undergoing examination of health screening were taken, 5 ml each one, and each sample was placed in two test tubes respectively, 2.5 ml each tube; artificial methods were used to make one of the paired samples hemolysis, and all samples were tested for alt, ast, ldh, alp, chol, tg, bun, cr, glu, ua, k+, the contents of them were compared. results: the contents of serum alt, ast, ldh, k+, chol in hemolytic samples were significantly higher than that in normal samples (p<0.05), activity of alp decreased with hemolysis, determination of bun, cr, tg, glu, ua changed little between hemolytic and normal samples. conclusion: all possible measures should be taken to prevent samples hemolysis, if sample hemolysis occurs, blank sample should be set as control to reduce the errors, resampling may be done in necessary. [key words] hemolysis; biochemical test; countermeasures 基层检验工作中,由于采血不当、试管不洁、检验过程中未按操作规范进行操作等原因,均可引起不同程度的标本溶血,而标本溶血又成为日常检验工作中最常见的影响生化检验结果的原因。除此之外,反应时间和温度也可影响临床生化检验指标的测定[1]。本文结合有关溶血对部分临床生化检验指标测定的影响,分析了溶血原因及其对策。
1 材料与方法
1.1 材料
抽取我院体检者50例血液5ml,分别置于2支试管中,每支2.5 ml,其中1支室温自然分离,30 min后以1 200 r/min 离心10 min分离血清,取1 ml血清作为正常血清备用;另1支试管中的标本采用人工方法使其溶血[1],然后以相同条件离心,分离溶血血清后备用。
1.2 方法
采用7020生化分析仪(日立公司)和国产科华东菱试剂测定血清中谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)、乳酸脱氢酶(ldh)、碱性磷酸酶(alp)、总胆固醇(chol)、甘油三酯(tg)、肌酐(cr)、尿素氮(bun)、葡萄糖(glu)、血尿酸(ua)等10项指标水平,操作方法和步骤均按试剂盒说明书规定进行;采用迅达903电解质分析仪及其配套试剂测定k+,每份正常血清和溶血血清共进行10次测定,取均值,分别计算50例标本各指标的测定均值,得到正常标本的测定均值()及溶血标本的测定均值(1),并对测定结果进行对比观察。
1.3 统计学处理
计量资料的比较采用t检验,检验水准α=0.05。
2 结果
溶血血清alt、ast、ldh、k+ 、chol测定结果明显高于正常血清(p<0.05), alp的活性随溶血而降低(p<0.05),溶血对bun、cr、tg、glu、ua测定结果影响较小,正常血清与溶血血清差异无统计学意义(p>0.05)(表1)。表1 溶血血清与正常血清各生化指标测定 结果比较注:与正常血清标本比较,*p<0.05。
3 讨论
溶血分为体外溶血和体内溶血,体外溶血可有物理因素(如机械性破坏、冰冻)、化学因素(如血样接触活性剂)和代谢性因素(如遗传性疾病引起的血细胞脆性增加)引起,体内溶血则可有物理因素(如人工心脏瓣膜或大血管手术后)、生物因素(如疟疾)和药物毒性反应、配血不合引起的输血反应等因素[2]引起。然而细胞内液中某些物质如ldh、alt、alp、ast、k+等的含量是细胞外液中浓度的22~160倍,只要轻微溶血就会造成检验结果明显的变化,另外,血红蛋白可干扰胆固醇的酶法测定[3]。本实验结果表明,标本溶血后酶浓度的变化极为显著,酶对标本的要求比其它生化检验项目的要求都要高,因此在日常工作中标本溶血后不适宜再对酶类进行测定。另外血清k+受溶血后影响较大,chol其次,而溶血对蛋白类、na+、cl、ca2+、tg、glu、bun、cr、ua等的影响十分有限。
体外溶血可通过样品制备技术的标准化加以克服,在采血过程中严格按照操作技术规范执行,采血器具应保持清洁和干净,注射器针头不能用酒精消毒,因酒精可致溶血;止血带不宜扎得过紧过久,进针出现回血后注射器活塞不宜过快拔出;血液注入试管不宜过快,以免血泡过多引起血细胞破裂;血液标本采取后尽可能早的使血清自然分离出来,一般应于采血后室温放置30~60 min内分离血清;标本离心前应自行凝集,不用器物等剥离血块;标本离心控制在 1 000~1 200 r/min,离心5~10 min;血液不可存放于冰箱冷冻室,避免融化后引起溶血;血液放置时间不宜过长,防止消毒液或其他物质滴入标本,溶血将影响检验结果;在条件允许的情况下,溶血标本应要求重新采集,以便提高检验结果的准确性[4]。另外,目前各大医院都逐渐应用真空管进行采血,这也尽可能地减少了标本溶血的机会。另一方面,从方法学上克服和减少溶血的影响也是重要的,对于溶血后血红蛋白对光度比色的影响可通过设置样品空白等措施加以克服,以提高临床生化检验的准确性和可靠性。
【参考文献】
1 刘波,范建. 标本溶血对常规生化检验项目的影响[j].邯郸医学高等专科学校学报,2001,1(3):6364 .
2 沈伽弟.溶血对临床生化检验的干扰和影响[j].中华医学检验杂志,2001,17(4):250251 .
3 符贻峰. 溶血、黄疸、脂浊、样本对生化项目结果干扰的探讨[j].海南医学,2003,8(6):652.
4 吴立翔,林一民.溶血对干化学生化检验结果的影响[j].第三军医大学学报,2005,27(6):546.