【关键词】 调化三焦方;2型糖尿病;大鼠;糖脂代谢
【摘要】 目的观察调化三焦方(tiaohua triple-jiao recipe，ttr)对链脲佐菌素(stz)诱导的2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响。方法建立stz诱导的2型糖尿病大鼠模型，实验分为6组：正常对照组、模型组、阳性药组、ttr高剂量组、ttr中剂量组及ttr低剂量组，观察血糖、血脂、血清胰岛素、肝脏和心肌组织糖原含量的变化。结果①ttr(2g/kg)与阳性药格列美脲200mg/kg的降糖作用相当;②ttr治疗组大鼠的tg、cho和ldl水平均明显低于模型组(p<0.01);③ttr对大鼠血清胰岛素水平无明显影响;④ttr能显著促进肝糖原和心肌糖原的合成(p<0.01)。结论ttr能改善stz诱导的2型糖尿病大鼠的糖脂代谢。
【关键词】 调化三焦方;2型糖尿病;大鼠;糖脂代谢
[abstract]objectiveto observe the effects of tiaohua triple-jiao recipe on the glucose and lipid in streptozotocin-induced diabetic rats.methodsrats models with diabetes mellitus were induced by intraperitoneal injection of streptozotocin.then the rats were divided into six groups at random： normal group，model group，glimepiride group，l-ttr group，m-ttr group and h-t tr group.levels of blood glucose，blood fats，insulin，hepatic and myocardium glycogen were determined.results①hypoglycemic effect of ttr(2g/kg) closes to glimepiride (200 mg/ kg); ②compared with model group，ttr different dose groups can reduce the level of tg，cho，and ldl(p<0.01); ③ttr effects on the insulin of rats serum little; ④ttr can effectively enhance the synthesis of hepatic and myocardium glycogen(p<0.01).conclusionttr can improve the glucose and lipid metabolism in streptozotocin-induced.
[key words]tiaohua triple-jiao recipe; type 2 diabetes mellitus;rats;glucose and lipid metabolism
全国著名中医专家北京中医药大学东直门医院博士生导师姜良铎教授认为，2型糖尿病的发病特点与"三焦瘀滞证"基本吻合，提出从“三焦气化”论治2型糖尿病的思想，并在“小柴胡汤”基础上创立了“调化三焦方”(tiaohua triple-jiao recipe，ttr)。WwW.11665.Com作者的前期研究[1-2]表明，“调化三焦方”对降低2型糖尿病患者的血糖水平有较好的疗效。本文运用此方对2型糖尿病大鼠模型进行了药效学研究，为今后探讨其治疗机制打下基础。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1药物：
ttr由柴胡、黄芩、人参、大枣、生姜、枳壳实、仙鹤草、赤白芍、炙甘草等组成(宁夏医科大学中医门诊部提供);格列美脲(国药准字：h20000704，宁夏医科大学中医门诊部提供)。
1.1.2动物：
健康成年雄性wistar大鼠，体重180-220g，由宁夏医科大学实验动物中心提供。
1.1.3主要试剂：
链脲佐菌素(stz，sigma，美国)，胆固醇测定试剂盒，甘油三酯测定试剂盒，低密度脂蛋白测定试剂盒，高密度脂蛋白测定试剂盒(北京信德生物制品研究所)。
1.1.4主要仪器设备：
mini血糖仪(arkray，japan)，chem300半自动生化分析仪(germany)，血糖测定试纸条(glucocardtm，japan)，tgl-16c台式离心机(上海)，倒置显微镜(olympus，日本)。
1.2方法
1.2.1造模：
本实验参照杨氏的造模方法[3]，成年雄性wistar大鼠共80只，体重180-220g。按体重随机选取10只大鼠，作为正常组;剩余大鼠禁食12h后，尾静脉注射0.1m柠檬酸钠缓冲液(ph=4.5)所配制的链脲佐菌素(stz，60mg/kg)，注射stz72h后，尾静脉采血，检测空腹血糖，并检测尿糖，确定模型是否成功复制。空腹血糖≥16.7mmol/l，尿糖+++以上者，说明造模成功。
1.2.2分组与给药：
将造模成功的大鼠随机分为模型组，阳性药组，ttr低、中、高剂量组，每组10只。各组均给予正常大鼠饲料(由宁夏医科大学动物实验中心提供)喂养，自由饮水进食，每只鼠笼饲养5只大鼠，空间充分，每日光照12h，室温18-23℃。造模后4d起，各组灌胃给药。阳性药组予格列美脲，200mg/kg;ttr低、中、高剂量组分别予ttr1g/kg、2g/kg、4g/kg;正常组及模型组予等体积蒸馏水，每天1次，连续3周。
1.2.3观察指标：
(1)血糖测定：大鼠分别于注射stz后的第3d及灌胃ttr治疗的第0、7、14、21d，尾静脉取血，通过血糖测试仪检测大鼠的随机血糖。(2)血脂测定：大鼠断头取血，离心分离血清。用全自动生化分析仪测甘油三酯(tg)、总胆固醇(tc)、低密度脂蛋白(ldl)及高密度脂蛋白(hdl)。(3)血清胰岛素含量测定：采用放射免疫分析方法，根据放射性记数测定ins含量。 (4)肝脏和心肌组织糖原含量测定：糖原测定用硫酸-蕙酮法。
1.3统计学方法：
采用spss 17.0统计软件,用均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析，方差齐性用s-n-k检验，方差不齐用tamhane's t2检验进行各组间比较，p<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1ttr对2型糖尿病大鼠血糖的影响：
与正常组比较，模型组大鼠的血糖值极显著升高(t=2.17，p=0.006)，说明造模成功。与模型组比较(f=4.59)，阳性药组(p=0.04)及ttr中剂量组(p=0.02)、高剂量组(p=0.03)给药14d后均可明显降低糖尿病大鼠的血糖值，其中ttr中剂量组与阳性药组的降糖作用相当(表1)。表1ttr对2型糖尿病大鼠血糖的影响
2.2ttr对2型糖尿病大鼠血脂的影响：
对于血脂指标的检测，只挑选最佳剂量ttr中剂量组(2g/kg)作为实验检测对象，观察其对糖尿病相关并发症的治疗效果。模型组大鼠血清tg(t=3.46，p=0.008)、cho(t=6.15，p=0.009)和ldl(t=1.12，p=0.007)水平与正常组相比均明显升高，hdl与对照组比明显降低(t=3.34，p=0.005)。m-ttr组大鼠的tg(t=2.57，p=0.0075)、cho(t=6.12，p=0.007)和ldl水平(t=1.28，p=0.002)均明显低于模型组。结果表明，m-ttr对2型糖尿病大鼠具有明显的降低血脂作用(表2)。表2ttr对2型糖尿病大鼠血脂的影响
2.3ttr对2型糖尿病大鼠血清胰岛素含量的影响：
与正常组相比，模型对照组大鼠的血清胰岛素水平明显升高(t=5.62，p=0.04)。与模型对照组相比，ttr治疗组大鼠的血清胰岛素水平无明显影响，而且随着剂量的增加，血清胰岛素水平反而有明显降低的趋势，这表明ttr不是通过促进胰岛素的分泌达到清除高糖效果的(表3)。表3ttr对2型糖尿病大鼠血清胰岛素含量的影响
2.4ttr对2型糖尿病大鼠肝脏和心肌组织糖原含量的影响：
与正常组相比，模型组肝糖原(t=2.58，p=0.002)和心肌糖原(t=5.34，p=0.007)明显减少;与模型组相比，ttr能显著促进肝糖原(t=2.54，p=0.004)和心肌糖原(t=7.54，p=0.006)的合成)。结果表明，ttr可以通过促进肝脏和肌肉的糖原合成，降低血液中的高糖状态(图1)。图1ttr对2型糖尿病大鼠肝脏和心肌组织糖原含量的影响
3讨论
糖尿病(dm)是胰岛素分泌缺陷、胰岛素作用缺陷或二者共同所导致的以慢性得高血糖为特征的一组代谢疾病，且相关的研究表明，糖脂代谢紊乱是导致糖尿病并发症的一个重要因素[4-6]。本实验成功地建立了stz诱发的2型dm大鼠模型，并观察了ttr不同剂量组的降糖效果。结果表明，ttr对stz诱导的2型dm大鼠具有明显的降糖作用，ttr中剂量组和高剂量组的剂量降糖效果显著。ttr能明显地提高dm大鼠肝糖原和hdl-c含量，降低血清tc和tg水平，提示ttr可以调节dm大鼠的血脂代谢。ttr2g/kg能促进2型dm大鼠心肌组织和肝脏的糖原合成，提示，促进组织糖原合成，也是降糖作用机制之一。
ttr由柴胡、黄芩、人参、大枣、生姜、枳壳实、仙鹤草、赤白芍、炙甘草等组成，柴胡和解少阳，舒肝和胃，升阳举陷;黄芩清热燥湿，泻火解毒，止血;人参大补元气，固脱生津，安神;枳实化痰散痞，破气消积。且现代药理学已经证实，人参、柴胡、甘草、枳实等药确有改善2型糖尿病糖脂代谢的作用。因此，我们认为ttr可能通过多种中药的协调作用，改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢。
【参考文献】
[1]南一,袁玲,姜良铎.柴胡剂治疗糖尿病合并泌尿系感染的中医证候疗效分析[j].辽宁中医杂志,2009,36(11)：1881-1883.
[2]南一,袁玲,姜良铎.柴胡剂治疗糖尿病合并泌尿系感染的中医证候疗效分析(2)[j].辽宁中医药大学学报,2009,11(10)：107-109.
[3]杨宝峰,艾静,王宁.wistar大鼠2型糖尿病动物模型的建立[j].中国药理学通报,2004,20(11)：1309-1312.
[4]chavez ja，knotts ta，mang lp，et al.a role for ceramide，but not diary glycerol in the antagonism of insulin signal transduction by saturated fatty acids[j].j biol chem,2003,13：10297-10303.
[5]gorska m，dobrzyn a，zendzian-piotrowska m，et al.effect of streptozotoe in-diabetes on the functioning of the springy myelin-signaling pathway in skeletal muscles of the rat [j].horm metab res,2004,36：14-21.
[6]straczkowski m，kowalska i，nikolajuk a，et al.relationship between insulin sensitivity and springy myelin signaling pathway in human skeletal muscle[j].diabetes,2004,53：1215-1221.
