撕去小肠的粘膜层和粘膜下层,获得小肠平滑肌层铺片。PBS漂洗3次,每次5 min。1%BSA孵育30 min后加入第一抗体,Kit单克隆抗体(1∶100)4 ℃ 48 h,Cy3标记的兔抗大鼠IgG抗体(1∶100)25 ℃ 60 min。随后4%多聚甲醛固定10 min,2 mol/L HCl处理标本30 min(室
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