【摘要】  目的 探讨沙利度胺对血液肿瘤患者内皮细胞功能的影响。方法 检测和比较32例血液肿瘤患者服用沙利度胺前后内皮细胞功能指标：血浆内皮素1（et1）、血管内皮生长因子（vegf）、组织因子（tf）、凝血酶调节蛋白（tm）、凝血因子ⅴ、血管性血友病因子（vwf）、抗凝血酶（at）、组织型纤溶酶原激活物（tpa）及纤溶酶原激活物抑制物1（pai1）的活性。结果 服用沙利度胺后血液肿瘤患者体内的vegf、tf、tm、vwf、at活性明显降低（p＜0.05或p＜0.01），而血浆et1水平比治疗前显著升高（p＜0.05），其余指标无明显改变（p＞0.05）。结论 沙利度胺可以影响内皮细胞功能，抑制新生血管的增生，从而在血液肿瘤治疗中发挥作用。

    【关键词】  沙利度胺； 血液肿瘤； 内皮细胞功能

    influences of thalidomide on function of endothelial cells in patients with hematologic tumors

    zou lifang，dou hongju，yao yiyun，hu junpei

    （department of hematolgy，shanghai ninth people’s hospital affiliated to shanghai jiao tong university school of medicine，shanghai 200011，china）

    abstract： objective  to assess the influences of thalidomide on function of endothelial cells in patients with hematologic tumors.methods  we evaluated makers of endothelial cells，including serum levels of endothelin1，thrombomodulin，tissue factor，vascular endothelial growth factor as well as activities of coagulation factor v， von willebrand factor，antithromobin，tissue plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor1 during treatment with thalidomide in 32 patients with hematologic tumors.results  it was found that activities of vegf，tf，tm，vwf and at significantly decreased （p＜0.05 or p＜0.01），while the serum level of et1 dramatically increased （p＜0.05）in patients with hematologic tumors after receiving thalidomide.other parameters were not affected by thalidomide.conclusion  thalidomode are capable of reducing angiogenesis through the inhibition of endothelial cell.therefore，thalidomide are effective in the treatment of hematiligic tumors.

    key words：  thalidomide； hematologic tumor； function of endothelial cell

    近年来，沙利度胺（反应停）由于其独特的抗炎、免疫调节及抗血管生成作用，在多种疾病的治疗中再次广泛应用于临床，且其应用度有逐渐增长趋势[1]。wWW.11665.COm最近几年研究证明，沙利度胺对血液系统肿瘤尤其是多发性骨髓瘤（mm）、慢性移植物抗宿主病（cgvhd）、骨髓增生异常综合征（mds）等疾病治疗有效[2]。本文通过对32例血液肿瘤患者在服用沙利度胺期间血管内皮细胞功能指标的检测，进一步探讨沙利度胺在治疗血液肿瘤患者中的作用机制和地位。

    1  资料与方法

    1.1  病例选择  32例血液肿瘤患者均为我院血液科2003年2月～2007年6月住院患者，男性20例，女性12例，年龄36～76岁，病程2～28个月。其中mm患者22例，mds 6例（ras 1例，rcmd 3例， raeb 2例），华氏巨球蛋白血症1例，难治复发白血病3例。所有病人除了2例初治mm 和1例华氏巨球蛋白血症外，其余患者均曾接受过mp（马法兰、强的松）、vad（长春新碱、表阿霉素、地塞米松）、环胞菌素a、ma（米妥蒽醌、阿糖胞苷）等不同方案治疗未缓解或缓解后复发者。全部病例均经临床、骨髓活检及涂片血清免疫固定蛋白电泳及骨骼摄片检查后认为符合fab诊断标准。

    1.2  治疗方法  沙利度胺（商品名反应停）系江苏常州制药厂生产的25 mg片剂，治疗剂量200 mg/d，每晚顿服。应用沙利度胺4周后，根据患者病情发展联合应用其它方案化疗。所有患者在服药前2 周和在开始服用沙利度胺4周期间未用其它治疗的药物。

    1.3  标本采集  分别于血液肿瘤患者服用沙利度胺前及服用沙利度胺后14 d和28 d抽取外周静脉血4 ml，经129 mmol/l枸橼酸钠9∶1抗凝，于4℃下3 000 r/min离心10 min，分离血浆，置-20℃冰箱保存，检测内皮细胞功能指标。取200 μl血浆加等体积的酸化液混合以检测组织型纤溶酶原激活物活性。

    1.4  检测指标及方法  et1、tm、tf、vegf、vwf检测采用elisa双抗体夹心法，测定试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司，酶联免疫检测仪为美国的elx800，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。凝血因子ⅴ活性测定采用美国康宁公司的acl3000型自动凝血抗凝纤溶检测仪测定，at、tpa、pai1活性测定采用发色底物法。

    1.5  统计学处理  测定结果采用x±s表示，比较采用t检验，p＜0.05表示有统计学意义。

    2  结    果

    血液肿瘤患者服用沙利度胺后14～28 d时血浆vegf、tf、tm、vwf、at值均明显低于治疗前（p＜0.05或p＜0.01），而et1活性比较治疗前显著升高（p＜0.05）。其余指标在治疗前后虽有变化，但无统计学意义（p＞0.05）。检测结果见表1。表1  沙利度胺对32例血液肿瘤患者内皮细胞功能的影响注：*与治疗前相比p＜0.05,**与治疗前相比p＜0.01

    3  讨    论

    内皮细胞（ec）是一种涉及到血管形成、凝血、炎症和免疫反应、合成基质成分、调节血管张力及脂质代谢等的多功能细胞。在生理状态（如子宫内膜增厚及伤口的修复等）或病理状态、特别是肿瘤生长和转移及炎症等疾病时，ec均可以形成新生血管，因此通过外界干预（如药物）来控制血管形成非常有价值。血管生成在实体瘤的发生、发展中的重要作用已被证实，且抗血管生成治疗实体瘤也取得了令人满意的效果。近年来血液肿瘤的发生发展与血管生成的关系逐渐受到人们的关注。许多实验研究和临床观察的资料表明，各种类型的白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等患者骨髓组织血管数目增加[3]，血清血管内皮生长因子（vegf）的水平增高和血管内皮细胞的损伤，且与疾病的发生发展和预后有关。

    组织因子（tf）是ec释放的主要促凝物质，除作为外源凝血系统的启动者外，其促进细胞增生、肿瘤形成及转移方面的作用备受关注。肿瘤细胞的tf表达，在调节血管内皮生长因子（vegf）合成上有重要作用。ec合成和释放凝血因子ⅴ、黏附血浆中的凝血因子ⅸa和ⅹa、使凝血因子ⅻ活化启动凝血过程。ec还分泌一种血管性血友病因子（vwf）。vwf一面与膜糖蛋白结合，另一面与胶原结合，参与血小板黏附反应，在血管早期反应的止血过程中起重要作用，同时vwf也是肿瘤细胞黏附与血小板及血管内皮表面的桥梁。凝血酶调节蛋白（tm）是ec分泌的一种表面蛋白，能提高凝血酶原激活蛋白c的活性。ec也分泌抗凝血酶（at），与凝血酶形成共价复合物而灭活凝血酶。ec还分泌组织型纤溶酶原激活物（tpa）。tpa与纤维蛋白形成复合物、使纤溶酶原转化为纤溶酶，溶解局部血栓。ec还能分泌tpa抑制物（pai），其与tpa结合并降低upa活性，ec对体内纤溶系统不仅有促进作用，也有抑制作用。ec尚可分泌收缩血管物质内皮素（et1），它是目前抑制作用最强大的强效收缩血管剂[4]。许多疾病的产生和发展都可能与ec的功能障碍有关。

    沙利度胺（thalidomide）曾因严重的致畸作用而被禁用，然而近年来基础研究和临床试验均证实其有明显的抗血管生成作用从而具有抗肿瘤潜能，成为治疗血液肿瘤的有效药物。沙利度胺主要的不良反应为有周围神经炎、中枢神经病变、消化道症状、皮疹及面部四肢水肿、血栓性静脉炎、深静脉血栓形成、白细胞减少等毒副作用，其症状的出现和药物剂量和用药时间不成比例[5]。本文观察了32例血液系统肿瘤患者服用沙利度胺后内皮细胞功能的变化，结果发现在服用沙利度胺14 d后，血管内皮生长因子（vegf）、组织因子（tf）、凝血酶调节蛋白（tm）、血管性血友病因子（vwf）和抗凝血酶（at）的活性明显下降，而内皮素1（et1）水平明显提高，提示其有明显抑制血管生成的作用。同时沙利度胺可能通过内皮细胞活化或受损，激活血管内皮细胞的促栓功能而诱发血栓的形成，影响患者的止凝血功能[6] 。由于沙利度胺作为血管生成抑制剂单药使用在治疗血液肿瘤患者时不能在短时间内出现明显的量效关系，加之对不同血液肿瘤患者的治疗效果也有很大差异，因而对有效剂量、持续时间和不良反应等问题有待进一步观察和研究。

【参考文献】
［1］ eriksson t，bjorkman s，hoglund p.clinical pharmacology of thalidomide[j].eur j clin pharmacol，2001，57（5）：365376.

［2］ rajkumar sv.current status of thalidomide in the treatment of cancer[j].oncology （huntingt），2001，15（7）：867874.

［3］ sezer o，niemoller k，eucker j，et al.bone marrow microvessel density is a prognostic factor for survival in patients with multiple myeloma[j].ann hematol，2000，24：574576.

［4］ chen y，mccarron rm，golech s，et al.et1 and nomediated signal transduction pathway in human brain capillary endothelial cells[j].am j physial cell physiol，2003，9：284，243.

［5］ meierhofer c，dunzendorfer s，wiedermann c j.theoretical basis for the activity of thalidomide[j].biodrugs，2001，15（10）：681703.