【关键词】  亚硫酸氢钠穿心莲内酯
    摘要:目的 考察注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍的稳定性及溶血性。方法 采用高效液相色谱法试验。结果 亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后，在强光(4 500±500) lx 、(40±2) ℃两种条件下，24 h内，主药含量和降解产物均无明显变化。注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与2种输液配伍后无溶血现象和凝集现象。结论 亚硫酸氢钠穿心莲内酯与2种输液配伍24 h内稳定，临床上可配伍使用。
　　关键词:亚硫酸氢钠穿心莲内酯；配伍稳定性；高效液相色谱法
　　abstract: objective to study the stability and hemolysis of andrographolidesodium bisulfite injection mixed with 5%  glucose and  0.9%  sodium  chloride  injections.methods and results hplc was used to evaluate the chemical stability of the admixtures. andrographolidesodium bisulfite  injection  mixed with 5%  glucose  and  0.9%  sodium  chloride  injections was  stable  when exposed to  light radiation (4 500±500) lx  at  (40±2)℃  for 24 h, and no hemolysis was measured throughout the trial.conclusion andrographolidesodium bisulfite injection mixed with 5% glucose and 0.9% sodium chloride injections is stable for 24 h.
key words:andrographolidesodium bisulfite injection; stability; compatibility; hplc 
    亚硫酸氢钠穿心莲内酯是穿心莲内酯与亚硫酸氢钠加成反应制得的水溶性亚磺酸盐，是穿心莲内酯的衍生物。Www.11665.COm用于治疗上呼吸道感染、恶性肿瘤、急性细菌性痢疾等疾病［1］。注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯是亚硫酸氢钠穿心莲内酯的冻干制剂，临床上以肌肉注射与静脉滴注的方式给药，但亚硫酸氢钠穿心莲内酯与临床常用输液的配伍研究目前尚无文献报道，为此，考察注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液的配伍稳定性及溶血性，为临床用药提供理论依据。
　　1  仪器与试药
　　美国waters2487高效液相色谱仪，515 hplc pump；hypersil ods2 c18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；yb―2型澄明度检测仪（天津大学精密仪器厂）。
　　亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品（纯度＞99.0%，无锡山禾药业集团提供）；注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯（自制，批号：040101）； 5%葡萄糖注射液（批号：0407300，上海华源股份有限公司安徽华源生物药业有限公司）；0.9%氯化钠注射液（批号：040724，上海华源股份有限公司安徽华源生物药业有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯）；系列比色液（广东省药品检验所）。 
　　2  测定方法与结果
　　2.1  样品溶液配制
　　模拟临床亚硫酸氢钠穿心莲内酯单日用药最大剂量（750 mg）及最大浓度（7.5 mg/ml），分别以5 %葡萄糖注射液与0.9%氯化钠注射液为溶剂配制浓度为7.5 mg/ml注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯注射液。
　　2.2  配伍前后色泽、澄清度、ph值变化情况
　　上述注射液分别置4 500 lx光照及40 ℃条件下，于0，4，8，24 h定时取样检测样品溶液的色泽、澄清度、ph值见表1。
　　2.3  亚硫酸氢钠穿心莲内酯的含量测定
　　2.3.1  色谱条件［2］  
　　色谱柱：hypersil ods2 c18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长：220 nm；流动相：甲醇乙腈 0.02 mol/l磷酸二氢钾溶液（体积比5∶24∶75）；流速：1.0 ml/min；进样量：10 μl。经计算，理论塔板数大于2 500。表1  亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后色泽、澄清度、ph变化情况（略）注：a：5%葡萄糖注射液；b：0.9%氯化钠注射液
　　2.3.2  波长选择  
　　取亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品适量，以流动相溶解，制成每1 ml含亚硫酸氢钠穿心莲内酯0.5 mg的溶液；另取5%葡萄糖注射液和09%氯化钠注射液适量，按“含量测定”的方法分别配制两种溶剂的空白溶液，分别注入高效液相色谱仪。结果5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液在220 nm处均无吸收。因此选择220 nm为测定波长。
　　2.3.3  线性范围  
　　精密称取亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品约50 mg，用流动相溶解并定容至25 ml,分别精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，各置10 ml量瓶中，加流动相定容，分别进样10 μl测定，记录峰面积，以峰面积（a）对亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度（ρ）进行回归，得线性方程a=17653734 ρ-4082（r=09999，n=5），线性范围为100.4～1004 μg/ml。
　　2.3.4  精密度试验  
　　取亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品溶液（取亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品适量，加流动相配制成浓度为0.5 mg/ml的溶液）重复进样7次，以峰面积计算含量，结果亚硫酸氢钠穿心莲内酯的rsd为0.477%。
　　2.3.5  灵敏度试验  
　　浓度为0.4 μg/ml的亚硫酸氢钠穿心莲内酯溶液10 μl进样测定，灵敏度是以信号为噪音比的3倍所对应的样品量进行计算，结果亚硫酸氢钠穿心莲内酯的灵敏度为4.0 ng。

　　2.3.6  加样回收率试验  
　　5%葡萄糖注射液：精密称取批号为040101 的样品适量，精密加入亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品适量，用5%葡萄糖注射液4 ml溶解，用流动相定容至25 ml。精密吸取10.00 μl注入色谱仪，测定，结果亚硫酸氢钠穿心莲内酯的平均回收率为100.03%，rsd=274%。
　　0.9%氯化钠注射液：精密称取批号为040101 的样品适量，精密加入亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品适量，用0.9%氯化钠注射液4 ml溶解，用流动相定容至25 ml。精密吸取10.00 μl注入色谱仪，测定，结果亚硫酸氢钠穿心莲内酯的平均回收率为100.50%，rsd=2.02%。
　
　　2.3.7  含量测定  
　　取本品适量，精密称定，分别加5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液溶解，并定量稀释制成每1 ml中约含亚硫酸氢钠穿心莲内酯3 mg的溶液，分别置于(4 500±500) lx 强光，40 ℃条件下，并于0、4、8、24 h定时精密量取4 ml溶解，用流动相定容至25 ml，作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液1000 μl，注入色谱仪；另取亚硫酸氢钠穿心莲内酯精制品溶液，并同法测定，按外标法，以峰面积计算出供试品中亚硫酸氢钠穿心莲内酯的含量，测定结果见表2。结果表明注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后，24 h内主药含量无明显变化。表2  亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后含量的变化情况（略）
　　2.4  有关物质的测定
　　精密量取供试品溶液1 ml，用流动相稀释至100 ml，摇匀，作为对照溶液。用含量测定项下的方法，取对照溶液10 μl注入色谱仪进行预试，调整仪器灵敏度，使亚硫酸氢钠穿心莲内酯色谱峰高度为记录仪满刻度的20%；再准确量取上述两种溶液各10 μl分别进样。记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如显示杂质峰，量取各杂质峰面积的和，与对照溶液主成分峰的峰面积进行比较。测定结果见表3。表3  注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后有关物质的变化情况（略）注：注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯厂订质量标准规定有关物质不大于5%
　　结果表明注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后，24 h内有关物质无显著性变化。
　　2.5  溶血试验
　　取家兔1只，自颈动脉取血约20 ml，置三角瓶中，用竹签搅拌去除纤维蛋白，然后将血移入刻度离心管内，加入注射用生理盐水5～10 ml，混合后离心10 min（2 000～2 500 r/min）去除上清夜，再加生理盐水混合离心，反复洗3～4次，至上清夜呈无色透明时用于试验。将所得红细胞按其容积，用生理盐水配制成2%红细胞混悬液。取试管，按表4，表5配制溶血性试验溶液。表4  注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与0.9%生理盐水配伍溶血性试验溶液　表5  注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液配伍溶血性试验溶液（略） 注：第6、6’为不溶血对照管，第7、7’为完全溶血对照管。
　　按上表配制各种溶液后轻轻摇匀，置37 ℃恒温水浴中观察，1 h内每隔15 min观察1次，1 h后，每隔1 h观察1次，连续观察4 h。
　　结果：第1～6号、1’～6’号试管均无溶血和凝集现象，第7、7’号管全溶血。表明注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后，对家兔红细胞无溶血和凝集现象。
　　3  讨 论
　　3.1  注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液及0.9%氯化钠注射液配伍后，分别在强光（4 500 lx）、40 ℃条件下，24 h内其色泽、澄明度、ph值、主药含量和有关物质的量均无明显变化。溶血试验结果表明，注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯冻干粉末与5%葡萄糖注射液，0.9%氯化钠注射液配伍后无溶血现象和凝集现象。因此认为可以将注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与5%葡萄糖注射液，0.9%氯化钠注射液配伍使用。
　　3.2  本文高效液相色谱条件是参照文献［2］建立起来的。实验结果表明，亚硫酸氢钠穿心莲内酯有关物质与主峰分离度大于1.5,最小检出量为4.0 ng。色谱图见图1。
　　参考文献:
　　［1］莫美霞.莲必治注射液的临床应用概况［j］.湖南中医学院学报，2005，25（3）：63.
　　［2］金描真.亚硫酸氢钠穿心莲内酯有关物质测定的方法学研究［j］.中国新药杂志，2005，14（7）：34.